姜黄素对TRP离子通道抑制作用的研究

目的验证瞬时受体电位（TRP）通道在胶质瘤MGR2细胞中的存在,研究姜黄素对TRP通道的电生理影响,探讨姜黄素抑制肿瘤细胞增殖的可能机制。方法体外培养人脑胶质瘤细胞MGR2;利用膜片钳技术检测胶质瘤细胞MGR2的电生理特性,验证并分离TRP离子通道。使用薄荷醇、无Mg2＋内液、酸以及非特异阻断剂2-氨基乙氧基苯硼酸（2-APB）及钆离子（Gd3＋）对TRP通道的敏感性进行检测。记录不同浓度的姜黄素对TRP通道电流幅度的影响。结果神经胶质瘤细胞MGR2是一种非可兴奋细胞,其细胞上表现出TRP离子通道的电生理特性。该通道对薄荷醇不敏感,对酸的反应不明显。对细胞内液低Mg2＋有（24.2±4.1）%的TRP电流增加（n=12,P〈0.05）,200μmol/L2-APB及10μmol/LGd3＋对TRP电流分别有（46.4±4.5）%及（73.2±3.6）%的增加（n=12,P〈0.05）。姜黄素对TRP通道的抑制作用具有浓度依赖性和可恢复性。结论 TRP通道在胶质瘤细胞MGR2中存在,姜黄素对TRP通道的作用具有浓度依赖性,为姜黄素抑制肿瘤增殖的可能机制提供了实验依据。     

MCI和AD患者血清hs-CRP、Hcy水平研究

目的研究轻度认知功能障碍(MCI)与阿尔茨海默病(AD)患者血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、同型半胱氨酸(Hcy)的变化,探讨炎症及血管因素在AD临床诊断和治疗中所起的作用。方法依据美国DSM-IV诊断标准,将研究对象分为健康对照组、MCI组和AD组;hs-CRP检测采用免疫透射比浊法,Hcy检测采用酶循环法。结果 AD组hs-CRP水平为(0.92±0.88)mg/L,与健康对照组的(2.24±1.34)mg/L及MCI组的(11.25±3.73)mg/L相比明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),MCI组与健康对照组相比则明显升高(P<0.05);AD组Hcy水平为(18.53±7.06)μmol/L,与健康对照组的(14.36±4.86)μmol/L及MCI组的(15.22±5.90)μmol/L相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),MCI组与健康对照组相比无明显变化(P>0.05)。结论炎症以及血管因素在AD的临床诊断和治疗中具有重要意义。     

MCI和AD患者血清hs-CRP、Hcy水平研究

目的研究轻度认知功能障碍（MCI）与阿尔茨海默病（AD）患者血清超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、同型半胱氨酸（Hcy）的变化,探讨炎症及血管因素在AD临床诊断和治疗中所起的作用。方法依据美国DSM-IV诊断标准,将研究对象分为健康对照组、MCI组和AD组;hs-CRP检测采用免疫透射比浊法,Hcy检测采用酶循环法。结果 AD组hs-CRP水平为（0.92±0.88）mg/L,与健康对照组的（2.24±1.34）mg/L及MCI组的（11.25±3.73）mg/L相比明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,MCI组与健康对照组相比则明显升高（P〈0.05）;AD组Hcy水平为（18.53±7.06）μmol/L,与健康对照组的（14.36±4.86）μmol/L及MCI组的（15.22±5.90）μmol/L相比明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）,MCI组与健康对照组相比无明显变化（P〉0.05）。结论炎症以及血管因素在AD的临床诊断和治疗中具有重要意义。     

19个X-STR荧光复合扩增体系的法医学应用评估

目的 评估含有19 个X染色体-短串联重复序列（X-STR）的复合扩增体系在法医学中的应用效果。方法 参照DNA分析方法科学工作组（SWGDAM）的验证指南,评估了含有19 个X-STR的复合扩增体系的种属特异性、灵敏度、抗抑制剂、精确性、可重复性、一致性、在混合样本与陈旧样本中的检测效果及Stutter峰和群体多态性。结果 DNA 模板量在0.25~1.00 ng 时,各基因座分型结果清晰准确,均衡性好、特异性强,混合、陈旧样本均能获得正确的分型结果;检测中国南方汉族共196份无关个体血样,19个X-STR遗传标记共检出151个等位基因,基因频率为0.0037 ~ 0.8439,其中多态性信息量最为丰富的基因座是DXS10135（多肽性信息含量= 0.9173）,个体识别能力在男、女性群体中分别为0.9124、0.9894;累积个体识别能力在男性群体中大于0.999 999 999 874,在女性群体中大于0.999 999 999 999;在三联体案件中的累积平均排除概率大于0.999 999 999 298,在二联体中的累积平均排除概率大于0.999 999 500 495。结论 含有19 个X-STR的复合扩增体系分型准确、稳定,满足法医学实践的要求,获得的基因频率等参数可为X-STR检验提供数据支撑。     

SIRT6在大鼠脑组织中的表达与分布

目的研究SITR6蛋白在正常大鼠脑组织中的表达与分布。方法在常温下自由饮水与饮食的情况下喂养8周的大鼠,采用免疫组织化学检测大鼠脑组织中SIRT6的表达与定位。结果 SIRT6是一种主要在神经元中表达的核蛋白,在大鼠正常脑组织中广泛表达,尤其在大脑组织中的皮质、髓质、海马中的神经元表达量较高;且在海马集中表达和在大脑皮质的外锥体细胞层和内椎体细胞层较明显,而在大脑髓质中表达低于海马和皮质。结论 SIRT6作为一种核蛋白,为研究SIRT6的功能提供了新的思路。     

PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物物理性能和转染C17.2神经干细胞效率的研究

目的探索PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物的物理性能及转染C17.2神经干细胞的效率。方法设计合成PEG-PEI共聚物基因载体,与ROCK-Ⅱ-siRNA进行复合;用凝胶阻滞电泳实验、粒径与电位的测定观察PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物的复合效果;采用透射电镜观察PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物的形态学;通过流式细胞仪技术定量检测复合物对C17.2神经干细胞的转染效果。结果 PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物在N/P=10时完全复合。随着N/P比的增大,复合物的粒径变小而电位增大。在N/P=50时,透射电镜观察到复合物为球形,很好的分散性,平均粒径约为100 nm。PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物在N/P=50时转染C17.2神经干细胞的转染效率最高,为(70.24±5.21)%。结论 PEG-PEI基因载体可以很好的与ROCK-Ⅱ-siRNA复合。PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA复合物对于C17.2神经干细胞具有良好的转染效率。     

加巴喷丁复合吗啡预防慢性压迫坐骨神经致痛觉敏化的疗效分析

目的观察加巴喷丁复合吗啡预防性镇痛对大鼠慢性压迫坐骨神经（CCI）后导致的机械缩足阈变化以及脊髓背角肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法随机选择重量（180±20）g的成年雄性SD大鼠24只,分为假手术组（S组）、模型组（M组）、预防性镇痛组（P组）和常规镇痛组（N组）。观察不同方式给药的模型组和对照组大鼠的行为学变化。术后10d分离脊髓通过免疫组化检测TNF-α水平的变化。结果术前各组大鼠机械痛阈差异无统计学意义,与M组相比,手术后各时段S、P、N组都存在不同程度的改变,差异均有统计学意义（P〈0.05）;P、N组TNF-α的积分光密度均值（IOD）水平分别为（0.2185±0.01980）、（0.2301±0.01386）,与M组的（0.2902±0.01325）比较明显降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论加巴喷丁复合吗啡对大鼠采用预防性镇痛有较好的效果,可显著降低CCI后导致的机械痛阈,降低TNF-α在脊髓背角的表达。     

六色荧光标记同步检测27个STR基因座的法医学应用评估

目的探讨同步检测27个STR基因座多态性及法医学应用价值。方法用Power PlexFusion 6C荧光标记系统对274份广东汉族无关个体的DNA进行PCR扩增,在3130XL遗传分析仪上进行电泳分析。用Gene MapperID-X软件分析基因型,用Power Stats v1.2软件分析群体遗传学参数。并观察该系统对微量及混合检材的检验效果。结果 23个常染色体STR基因座遗传多态性高,在广东汉族人群的累积个人识别率为1-2.3×10-28,累积非父排除率为0.999 999 999。DYS391、DYS570和DYS576的GD值分别为0.481、0.791和0.751,共检出58种单倍型,单倍型多态性为0.337。微量检材STR基因座检出率为93.33%,混合检材Y-STR基因座检出率为96.67%。结论 Power PlexFusion 6C系统遗传多态性高,可以用于亲缘鉴定、个体识别以及数据库建设。     

加巴喷丁复合吗啡预防慢性压迫坐骨神经致痛觉敏化的疗效分析

目的观察加巴喷丁复合吗啡预防性镇痛对大鼠慢性压迫坐骨神经(CCI)后导致的机械缩足阈变化以及脊髓背角肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法随机选择重量(180±20)g的成年雄性SD大鼠24只,分为假手术组(S组)、模型组(M组)、预防性镇痛组(P组)和常规镇痛组(N组)。观察不同方式给药的模型组和对照组大鼠的行为学变化。术后10d分离脊髓通过免疫组化检测TNF-α水平的变化。结果术前各组大鼠机械痛阈差异无统计学意义,与M组相比,手术后各时段S、P、N组都存在不同程度的改变,差异均有统计学意义(P<0.05);P、N组TNF-α的积分光密度均值(IOD)水平分别为(0.2185±0.01980)、(0.2301±0.01386),与M组的(0.2902±0.01325)比较明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论加巴喷丁复合吗啡对大鼠采用预防性镇痛有较好的效果,可显著降低CCI后导致的机械痛阈,降低TNF-α在脊髓背角的表达。     

SIRT6在大鼠脑组织中的表达与分布

目的研究SITR6蛋白在正常大鼠脑组织中的表达与分布。方法在常温下自由饮水与饮食的情况下喂养8周的大鼠,采用免疫组织化学检测大鼠脑组织中SIRT6的表达与定位。结果 SIRT6是一种主要在神经元中表达的核蛋白,在大鼠正常脑组织中广泛表达,尤其在大脑组织中的皮质、髓质、海马中的神经元表达量较高;且在海马集中表达和在大脑皮质的外锥体细胞层和内椎体细胞层较明显,而在大脑髓质中表达低于海马和皮质。结论 SIRT6作为一种核蛋白,为研究SIRT6的功能提供了新的思路。