TLR4在鼠感染疾病模型的作用机理

TLRs是宿主识别各种病原体相关分子模式、并激活和调节天然免疫-适应性免疫反应的一类模式识别受体。在哺乳动物发现13种TLRs成员;已利用近交系小鼠对其作用机理进行了深入研究,本文简要综述TLR4在抗细菌、病毒、寄生虫感染中的作用机理。     

弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫免疫检测中的应用

目的评价弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫感染诊断中的效果,探索多表位抗原在弓形虫免疫检测中的应用前景。方法以Ni-NTA Agarose和割胶电渗两步纯化法,获取弓形虫多表位基因的原核表达纯化产物rMAG,以适宜浓度的rMAG包被ELISA微孔板,分别检测弓形虫急性和慢性感染血清,评价试剂盒检测的敏感性和特异性。结果经Ni-NTAAgarose和割胶纯化,得到了纯度为95.86%的弓形虫多表位重组可溶性抗原。以3!g/ml的抗原浓度包被ELISA微孔板,对兔和小鼠的急慢性弓形虫感染血清进行了检测。结果检测小鼠血清141份,其中慢性感染弓形虫小鼠血清117份、正常小鼠血清24份,检测体系的敏感性为88.88%,特异性为91.67%,一致性为89.36%。检测兔血清24份,其中急性感染弓形虫兔血清18份,正常兔血清6份,阳性血清检出率为94.4%,总一致性为91.5%。结论以弓形虫多表位重组抗原构建的ELISA试剂盒既可以检测弓形虫急性感染血清,又可以检测弓形虫慢性感染血清,具有一定的应用前景。     

适当比例的DNA:脂质体混合物能显著增强DNA疫苗的免疫效果

目的探讨脂质体能否加强DNA疫苗的免疫效果.方法本文应用一系列具有不同比例的编码弓形虫主要表面抗原的质粒DNA脂质体混合物免疫小鼠,并对不同组小鼠的抗体产生情况进行了分析比较.结果不同组小鼠的特异抗体滴度有很大不同,只有一定比例的DNA脂质体混合物才能有效激发体液免疫;适量比例的DNA脂质体混合物能提高特异抗体的滴度、提前特异抗体出现的时间,还能大大降低DNA的用量.本研究尚揭示;一定量的DNA对于有效免疫的激发是必需的,但并不是越多越好.加强注射可以增加免疫反应性,但3次以上似乎没有必要.结论适量比例的DNA脂质体混合物能显著增强DNA疫苗的免疫效果.     

健全伦理审查机制 促进实验动物管理工作

针对我国实验动物伦理学工作中存在的问题,提出了建立和完善伦理学审查制度的必要性和可行性,并建议采取相应措施,以推进我国的实验动物伦理工作。     

实验动物在弓形虫病研究中的应用

弓形虫病 (toxoplasmosis)是一种呈世界性分布的寄生虫病 ,可致人的弓形虫性脑炎、弓形虫性脉络膜视网膜炎、孕妇流产、死胎、胎儿畸形等。作为机会性细胞内寄生原虫 ,弓形虫 (Toxoplasmagondii)尤其对免疫功能受累患者 ,如艾滋病病人、器官移植患者等 ,造成严重乃至致命的威胁。弓形虫病又是一种人兽共患病 ,可引起山羊、绵羊、牛等反刍动物的流产、死胎等 ,给畜牧业造成巨大的经济损失。随着宠物的兴起 ,作为弓形虫惟一终末宿主的猫以及起机械传播作用的犬与人们的关系越来越密切 ,在弓形虫病的传播中起着尤为重要的作用。因此如何全面揭…     

医院动物实验伦理学审查的意义与规范

阐述了实验动物对医院医、教、研的作用,即借助实验动物完成的新药新技术对于医院的发展起到了很大的促进作用;实验动物平台是医院教学工作不可缺少的重要的组成部分;实验动物是医学研究进步与发展的重要支撑条件,是提升医院科研水平与竞争实力、实现可持续发展的重要平台.讨论了保护、关爱动物对建立和谐医院、提高医生医德、促进科技交流的意义,并简要介绍了某医院规范实验动物伦理审查的一些经验与体会.     

弓形虫速殖子和缓殖子相互转换机制的研究进展

弓形虫是广泛分布的机会性致病原虫 ,速殖子和缓殖子之间的相互转换是其致病的中心环节。速殖子引起的急性感染可被宿主正常的免疫系统所抑制 ,从而转变为代谢、增殖缓慢的缓殖子 ,并以包囊的形式继续存在于脑、肌肉和视网膜等细胞中 ,形成隐性感染。当宿主免疫功能下降时 ,包囊中的缓殖子则可变为代谢旺盛、增殖迅速的速殖子 ,引起组织破坏 ,形成局部炎症 ,如慢性脑炎和视网膜脉络膜炎等 ,如不及时治疗 ,可直接导致这类免疫功能受累患者 (如爱滋病患者及器官移植患者 )的死亡[1,2 ] 。1　速殖子和缓殖子　作为弓形虫生活史中滋养体阶段的两…     

紧密结合临床实际 做好临床科研工作

医疗工作是医院的核心工作。医院的医疗和科研水平是对一所医院和一名现代医生的重要评价指标。现实中,医院的临床工作和科研工作之间存在一些矛盾。医院和临床医生应从临床工作实际出发,注重临床科研选题的现实性,加强与基础医学的结合,促进科研成果向临床应用的转化,以有效的科研工作促进临床工作,最终提高临床医疗水平,推动人类医学进步。     

弓形虫SAGl基因在大肠杆菌中的高效表达及重组抗原对弓形虫感染的检测

目的在原核系统中高效表达弓形虫表面抗原SAG1并利用重组抗原检测弓形虫感染.方法将截短的SAG1基因经PCR扩增后,定向亚克隆入原核表达载体pET-30a(+),酶切鉴定出阳性重组子并经序列测定证实读码框正确,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,对融合的表达产物进行纯化和复性,通过免疫印迹和ELISA实验检测其特异的免疫反应性.结果成功构建截短型SAG1在原核系统中的重组表达质粒,并以融合蛋白的形式在大肠杆菌中得到了高效表达,其表达量占细菌裂解液中总蛋白量的31.58%.经过简易的纯化和复性过程,该重组抗原(rSAG1)能被弓形虫感染的人血清所识别.用rSAG1构建的ELISA试剂盒对弓形虫病的检测具有高度的敏感性和特异性.结论截短型SAG1在大肠杆菌中得到了高效表达,重组抗原经纯化和复性后,能有效检测弓形虫的感染,可用于构建弓形虫病检测试剂盒.     

弓形虫多表位基因的构建及其在大肠杆菌系统中的表达鉴定

目的　构建弓形虫和破伤风毒素多个表位的编码基因 ,将其在大肠杆菌系统进行表达 ,评价重组抗原的特异反应性。方法　从弓形虫保护性抗原及通用免疫增强佐剂破伤风毒素中选取含有T和 (或 )B细胞表位的抗原片段 ,通过软件分析在各片段之间插入适当数目、起间隔作用的氨基酸 ,以保持个片段的空间构象独立性 ,从而确定氨基酸顺序。根据氨基酸序列选取适当的密码子构成弓形虫多表位基因。将该基因合成并鉴定后 ,亚克隆入原核表达载体 ,在大肠杆菌中表达并分析表达产物的表达形式和抗原活性。结果　成功构建了长度为 36 0bp的弓形虫多表位基因。该基因在原核表达系统中经诱导 ,得到了 14 4kDa的包涵体形式的表达产物。免疫印迹实验表明该产物具有强特异性抗原活性。结论　弓形虫多表位基因在原核中的表达产物在弓形虫病疫苗及诊断中有潜在的应用价值