细胞周期素D1、增殖细胞核抗原、P27蛋白在食管癌上的表达及意义

肿瘤是多基因变化导致细胞周期紊乱，细胞失控性生长所致的一类疾病。食管癌是我国常见的恶性肿瘤之一．预后差，因此我们从细胞周期机制及调控研究其发生发展有极其重要的意义。本研究应用流式细胞术定量测定细胞周期素D1（CyclinD1），增殖细胞核抗原（PCNA）及周期素依赖性蛋白激酶抑制因子P27蛋白在食管癌上的表达及其与食管癌的分化，淋巴结转移的关系。     

舒泰在清醒患者置胃管中的应用

在留置胃管过程中我们应用舒泰代替石蜡油润滑胃管,效果满意,现报告如下。方法:患者插胃管前先口服舒泰3ml,2~3min后咽下,按需要插入胃管,将剩余的2ml舒泰均匀涂在胃管表面,其他步骤同传统的置胃管法。讨论:舒泰的主要成分为甘油、黄原胶、二甲基硅油、盐酸丁卡因。甘油为润滑剂,盐酸丁卡因为快速粘膜麻醉剂,黄原胶、二甲基硅油调节粘稠度,粘附于粘膜表面。患者咽下后暂时失去痛触觉,患者反应明显减轻,插管成功率显著提高。该方法操作简便,且灭菌独立包装,防止交叉感染,值得临床推广应用。舒泰在清醒患者置胃管中的应用@杜君 @栾丽娟 …     

颅内动脉瘤破裂出血围手术期的观察及护理

我院自2000年1月至2002年4月,收治颅内动脉瘤破裂并行手术治疗者23例,现将患者围手术期护理体会总结如下.     

蛋白酶体抑制剂诱导多巴胺能神经元变性伴包涵体形成

目的 观察蛋白酶体抑制剂诱导黑质多巴胺(DA)能神经元变性伴胞浆内包涵体形成，探讨蛋白酶体功能在帕金森病发病机制中的作用。方法将蛋白酶体抑制剂Lactacystin立体定向注射至大鼠黑质部位。免疫荧光观察黑质区DA神经元变性缺失及胶质细胞变化。免疫荧光双标法观察DA能神经元内蛋白聚集的包涵体及其主要成分α-共核蛋白(α-synuclein)、Parkin和泛素(ubiquitin)的表达。同时观察。DA能神经元发生细胞凋亡。结果注射Lactacystin第7天大鼠开始出现自发性活动减少，阿扑吗啡可诱导出旋转行为；3周后黑质部位酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞减少，呈剂量依赖性；小胶质细胞增生明显。TH与硫磺素、硫磺素与α-synuclein、硫磺素与Parkin、以及硫磺素与ubiquitin复合染色呈阳性；TH与TUNEL双染亦呈阳性。结论Lactacystin对多巴胺能神经元具有毒性作用，且导致蛋白聚集，包涵体形成。蛋白酶体功能异常可能在帕金森发病机制中起重要作用。     

中心静脉置管在神经外科的应用及护理

随着现代医学的发展,中心静脉穿刺在临床应用日益广泛,它减轻了病人因反复穿刺带来的痛苦.中心静脉置管是使用人体大静脉,直接快速输入大量液体进入血液循环,广泛应用于急、危重症患者.但是,中心静脉置管潜在的并发症较多,良好精心的护理是减少其并发症的关键.现将我科2007年1月～2008年2月,收治62例神经外科病人建立中心静脉置管的护理体会报告如下:     

酸性环境介导皮质神经元损伤及阻断酸敏感离子通道1α的神经保护作用

目的 探讨脑梗死模型中酸性环境能否介导皮质神经元损伤及阻断酸敏感离子通道1α（acidsensing ion channels1α，ASIC1α）的神经保护作用。方法 制作缺氧细胞模型、脑梗死动物模型，检测ASIC1α阻断剂对乳酸脱氢酸（lactate dehydrogenase，LDH）释放率、大鼠行为学、脑梗死体积以及ASIC1蛋白表达的影响。结果 酸性环境可以损伤皮质神经元，加重缺氧对细胞的毒性作用，经侧脑室注射ASIC1α阻断剂可以改善脑梗死大鼠的行为学改变，梗死体积明显减小（P〈0.05）；随梗死时间延长，缺血半暗带ASIC1表达增加，在缺血后24h表达量较明显。结论 酸性环境导致皮质神经元损伤，其损伤机制与缺血后神经元ASIC1α开放以及表达增加有关；阻断ASIC1α具有神经保护作用。     

流式细胞术测定COX-2、iNOS基因蛋白在食管癌上的表达及意义

 目的　探讨环氧化酶 2 (COX 2 ) ,Ⅱ型一氧化氮合酶 (iNOS)基因蛋白在食管癌上的表达以及与食管癌的分化和淋巴结转移的关系。方法　采用流式细胞术定量检测 6 5例食管鳞状细胞癌上COX 2、iNOS的蛋白表达量 (用荧光指数FI表示 )。结果　COX 2、iNOS在低分化型 (G3)鳞癌上的表达量明显高于分化型 (G1、G2 )鳞癌 (其P值分别为 0 .0 0 0 1、0 .0 385 ) ;二者之间呈明显正相关。这两种基因蛋白的表达强弱均与淋巴结转移无关。结论　COX 2、iNOS的表达强弱与食管癌的分化密切相关 ;COX 2与i NOS在促食管癌的发生发展中有互相协同作用     

胸腹水细胞块的改良技术

近年来细胞块技术在细胞病理学中的地位日渐突出。细胞块技术是将浆膜腔积液的样品离心,细胞和微小组织块被高度浓缩后用固定剂凝聚、石蜡包埋,再制成切片。细胞块主要用于免疫细胞化学和基因检测等,对组织类型的鉴别有一定的帮助,从而提高细胞病理诊断的敏感性。现有的细胞块技术主要有琼脂包埋法、血浆凝血酶法和鸡蛋清凝集法等[1-3]。这些方法或操作复杂或成本较高,其制片和染色效果不稳定,组织块不完整,包埋时组织比较散碎,严重影响制片。本文现介绍一种简便有效,费用低廉,组织块比较完整的细胞块制作方法。     

晚期非小细胞肺癌患者恶性胸水中表皮生长因子受体的突变检测

目的探讨胸水表皮生长因子受体(EGFR)基因检测对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗的预测价值。方法纳入62例NSCLC患者,胸水取样通过ARMS检测EGFR基因突变,随访其口服吉非替尼的有效率、疾病控制率及无进展生存期。结果 EGFR突变患者的EGFRTKI治疗的有效率及疾病控制率均优于野生型患者(P0.05),EGFR突变患者的无进展生存期优于野生型患者,但是两者之间的差异不显著(P0.05)。结论胸水的EGFR基因检测对于NSCLC患者的EGFR-TKI治疗具有一定的预测价值。     

顺铂联合雷帕霉素或3-甲基腺嘌呤对肺腺癌A549细胞抑制作用的研究

目的观察非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)中肺腺癌A549细胞在顺铂(cisplatin,CP)联合雷帕霉素(rapamycin,RAPA)或3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)作用下的结果,为提高顺铂的化疗效果提供理论依据。方法 2013年3月至2014年6月期间,通过对人肺腺癌细胞株A549(由河北医科大学第四医院科研中心提供)经四甲基偶氮唑盐3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium (MTT)实验检测顺铂、雷帕霉素和3-MA对A549细胞的增殖抑制率,计算出各药物的50%细胞抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50),并以此作为实验浓度。实验分为4组:对照组(无药物干预)、顺铂组(加15μmol/L的顺铂)、顺铂+雷帕霉素组(加10nmol/L的雷帕霉素1h后再加15μmol/L的顺铂)、顺铂+3-MA组(加3μmol/L的3-MA 1h后再加15μmol/L的顺铂),将对数生长期的肺癌A549细胞以每孔1.0×10^6/ml密度接种于6孔培养板中,待细胞长至孔底面积约70%~80%后分别加入稀释好的药物,分别培养24、48、72h。肺癌A549细胞的生长迁移情况用细胞划痕实验检测,mTOR、LC3-Ⅱ及Bax mRNA和蛋白的表达情况用RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)、Western blot(蛋白质印迹)法检测。数据处理采用SPSS 17.0统计软件进行分析。结果顺铂IC50:15μmol/L;雷帕霉素IC50:10nmol/L;3-MA IC50:3μmol/L。划痕实验显示24h顺铂+雷帕霉素组细胞迁移能力最弱,48h和72h顺铂+3-MA组细胞迁移能力最弱。RT-PCR显示顺铂+雷帕霉素组LC3-ⅡmRNA的2-△△Ct值(24h:1.686±0.069;48h:1.803±0.083;72h:1.836±0.056)与顺铂组(24h:1.489±0.031;48h:1.325±0.007;72h:1.428±0.080)相比表达量均明显上升(24hF=149.780,P<0.01;48hF=111.599,P<0.01;72hF=167.855,P<0.01);而顺铂+3-MA组的Bax mRNA的2-△△Ct值(48h:1.864±0.104;72h:1.935±0.068),与顺铂组(48h:1.346±0.080,72h:1.462±0.029)相比,表达量均明显上升(48hF=52.853,72hF=202.118;P值均<0.01)。Western blot显示顺铂+雷帕霉素组LC3-Ⅱ蛋白(48h:0.556±0.010;72h:0.571±0.009)与顺铂组(48h:0.426±0.0107;72h:0.492±0.009)相比表达量均显著上升(48hF=372.056,72hF=930.500;P值均<0.01);而顺铂+3-MA组的Bax蛋白(48h:0.897±0.022;72h:0.916±0.005),与顺铂组(48h:0.463±0.011;72h:0.581±0.007)相比,表达量均显著上升(48hF=1100.412,72hF=5715.778;P值均<0.01)。结论顺铂联合雷帕霉素或3-MA较单独使用顺铂能更好的抑制A549细胞的生长,长时间用药时顺铂联合3-MA作用最强。