尼古丁对人RPE细胞及HUVEC的影响

目的探讨尼古丁对人视网膜色素上皮(RPE)细胞和血管内皮细胞(HUVECs)中血管内皮生长因子(VEGF)表达及形成新生血管能力的影响。方法 MTT法检测尼古丁对两种细胞增殖的影响;划痕及成管实验检测其对HUVECs迁移、成管的影响;RT-PCR和Western blotting法检测两种细胞经尼古丁处理后VEGF、PEDF mRNA及蛋白的表达。结果尼古丁促进HUVECs增殖、迁移、成管(P<0.05),但对ARPE-19细胞增殖无影响(P>0.05),且高浓度(100μmol/L)时抑制细胞增殖(P<0.01)。尼古丁以剂量和时间依赖方式促进两种细胞VEGF mRNA及蛋白的表达,抑制PEDF mRNA及蛋白的表达,上调VEGF/PEDF基因表达的比率(P<0.05)。结论尼古丁可上调ARPE-19细胞和HUVECs中VEGF/PEDF基因表达的比率,促进HUVECs增殖、迁移、成管。     

下调血管内皮细胞蛋白激酶CK2表达对血管增殖影响的体外研究

目的 探究蛋白激酶CK2表达下调对血管内皮细胞形成新生血管的能力以及对其细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法 化学合成siRNA转染人脐静脉内皮细胞(HUVECs), 用RT-PCR法和Western blotting法检测细胞转染效率;MTT法检测CK2表达下调对HUVECs细胞增殖的影响;成管实验和划痕实验检测CK2表达下调对细胞成管、迁移的影响;Real-time PCR和Western blotting法检测siRNA干扰蛋白激酶CK2表达后VEGF mRNA及蛋白的表达。结果 siRNA干扰蛋白激酶CK2达到了预期干扰率75%, 蛋白激酶CK2表达下调后抑制了HUVECs增殖、成管、迁移(P<0.05), 也抑制了VEGF mRNA及蛋白的表达。结论 蛋白激酶CK2表达下调可抑制VEGF的表达及HUVECs的增殖、成管、迁移。     

尼古丁对人RPE细胞及HUVEC的影响

目的 探讨尼古丁对人视网膜色素上皮(RPE)细胞和血管内皮细胞(HUVECs)中血管内皮生长因子(VEGF)表达及形成新生血管能力的影响。方法 MTT法检测尼古丁对两种细胞增殖的影响;划痕及成管实验检测其对HUVECs迁移、成管的影响;RT-PCR和Western blotting法检测两种细胞经尼古丁处理后VEGF、PEDF mRNA及蛋白的表达。结果 尼古丁促进HUVECs增殖、迁移、成管(P<0.05), 但对ARPE-19细胞增殖无影响(P>0.05), 且高浓度(100 μmol/L)时抑制细胞增殖(P<0.01)。尼古丁以剂量和时间依赖方式促进两种细胞VEGF mRNA及蛋白的表达, 抑制PEDF mRNA及蛋白的表达, 上调VEGF/PEDF基因表达的比率(P<0.05)。结论 尼古丁可上调ARPE-19细胞和HUVECs中VEGF/PEDF基因表达的比率, 促进HUVECs增殖、迁移、成管。