膀胱副神经节瘤组织中SDHB、EPAS1及Ki⁃67表达的研究

目的：探讨膀胱副神经节瘤临床病理特征以及琥珀酸脱氢酶B（succinate dehyrogenase B，SDHB）、内皮PAS区域蛋白1（EPAS1）及Ki?67在膀胱副神经节瘤中的表达情况，以及三者作为预测恶性副神经节瘤指标的意义。方法：回顾性分析本院收治的43例膀胱副神经节瘤患者的临床病理资料，对43例标本行SDHB、EPAS1、CgA、Ki?67免疫组化检测，并分析其作为预测恶性副神经节瘤指标的意义。结果：43例中，男24例，女19例；年龄26~81岁，中位年龄68岁；随访时间2~84个月，中位随访时间51.3个月；3例死亡，9例术后转移，4例术后反复复发，无转移；其余无复发及转移。良性30例，镜下表现为肿瘤细胞呈经典的巢状排列，核分裂及坏死罕见，瘤细胞巢周围有支持细胞包绕。SDHB阴性（-）4例，EPAS1强阳性（+++）14例，CgA强阳性（+++）18例，2例Ki?67≥3%。恶性13例，镜下表现为肿瘤细胞呈弥漫浸润性生长或大巢状分布，核分裂多见，可见肿瘤性坏死及脉管内瘤栓。SDHB阴性（-）8例，EPAS1强阳性（+++）9例；CgA强阳性（+++）10例；11例Ki?67≥3%。SDHB阴性（-）肿瘤中66.7%为恶性，SDHB阳性（+）的肿瘤中16.1%为恶性，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。SDHB 阴性（-）肿瘤中EPAS1、CgA表达强度以及Ki?67≥3%的比例明显高于SDHB阳性（+）肿瘤。恶性膀胱副神经节瘤中EPAS1、CgA、Ki?67阳性表达率明显高于良性膀胱副神经节瘤。结论：恶性膀胱副神经节瘤组织中SDHB免疫组化阴性率为66.7%，SDHB阴性的膀胱副神经节瘤组织中EPAS1过表达，EPAS1阳性表达强度与CgA及Ki?67高表达呈正相关。SDHB、EPAS1、Ki?67是预测恶性膀胱副神经节瘤的生物学指标。     

子宫腺瘤样瘤110例临床病理分析

目的 探讨子宫腺瘤样瘤的临床病理特点,以提高子宫腺瘤样瘤的诊断水平。方法对南京医科大学附属常州第二人民医院2008年1月至2015年12月收治的110例子宫腺瘤样瘤患者的手术组织标本进行临床病理及免疫组织化学观察,分析其临床及病理学特征。结果110例子宫腺瘤样瘤占同期子宫切除或子宫肿瘤剥除标本的1.55％,患者临床表现无特异性。109例位于肌层,1例位于浆膜下。镜下肿瘤排列成腺管样、微囊状、梁状、实性结构,肿瘤细胞扁平、立方状或上皮样。免疫组化染色显示,肿瘤细胞CK、Vim、HBME-1、D2-40、Calretinin、WT-1阳性表达,CD34、EMA不表达。结论 子宫腺瘤样瘤并不罕见,但临床和病理组织学均易误诊。免疫组化可作为诊断和鉴别诊断的重要参考依据。     

miR-21真核表达载体的构建及其对胃癌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨人微小RNA-21（miR-21）重组表达质粒对人胃癌SGC-7901细胞增殖与凋亡的影响及可能机制。方法设计合成靶向miR-21的互补双链DNA,退火后与真核表达载体pPG—miR．EGFP克隆连接,构建pPG—miR-21-EGFP重组表达质粒,利用脂质体LipofectamineTM2000将鉴定正确的重组表达质粒pPG—miR-21．EGFP转染人胃癌SGC-7901细胞,荧光显微镜下观察转染效率。实验分为3组：空白对照组、空载体组、重组表达质粒组。以RT—PCR检测转染前后胃癌细胞miR-21的表达水平。MTY法评价重组表达质粒抑制肿瘤细胞生长的效果,流式细胞术及Hoechst33258法检测转染后胃癌SGC-7901细胞周期的分布和凋亡。Westernblot法、免疫细胞化学法分别检测转染前后PTEN、PCNA、PDCD4、bcl-2、cyclinD1蛋白表达的水平。结果酶切及测序鉴定证实成功构建重组质粒pPG—miR-21-EGFP,转染人胃癌SGC-7901细胞后,荧光显微镜下观察转染效率达75％。RT—PCR检测显示重组表达质粒组胃癌细胞miR-21的表达下调,与空白对照组和空载体组比较,差异具有统计学意义（P〈O．05）。Westernblot法、免疫细胞化学法检测结果显示重组表达质粒组胃癌细胞cyclinD1、PCNA、bcl-2蛋白的表达下调（P〈0．05）,而PDCD4、PTEN蛋白的表达上调（尸〈0．05）。重组表达质粒组的细胞生长缓慢,凋亡指数增加。流式细胞术检测结果显示重组表达质粒组G。期细胞的百分比较空白对照组增加[（69．71±0．314）％（50．1~0．331）％],S期细胞较空白对照组明显减少[（14．68~0．448）％口s（28．47~0．316）％]（P〈0．05）。结论重组表达质粒pPG．miR．21-EGFP可显著下调miR-21在胃癌SGC-7901细胞中的表达,并在-定程度上抑制胃癌细胞的增殖,促进其凋亡,使较多的细胞停留在G。期,s期细胞减少,其作用机制可能是通过下调cyclinD1、PCNA、bcl．2蛋白的表达,上调PDCD4、PTEN蛋白的表达而实现的。