端粒酶hTERT mRNA在乳腺癌中的表达及与c-myc相关性分析

目的 探讨人乳腺癌中原癌基因c-myc与hTERT mRNA表达的关系.方法 收集癌旁正常乳腺组织、导管原位癌、浸润性导管癌各12、18和25例,用原位杂交法检测hTERT mRNA表达,并用免疫组织化学法检测乳腺导管癌c-myc表达.结果 ①hTERT mRNA在癌旁正常乳腺组织中未见表达,在导管原位癌、浸润癌中的阳性率分别为83.33%和88.00%,后两组hTERT mRNA表达明显高于正常组;②hTERT mRNA表达与浸润性导管癌肿块大小及淋巴结转移与否无相关性（P＞0.05）;③43例乳腺导管癌中hTERT mRNA与c-myc表达呈正相关（γ=0.388 4,P＜0.05）.结论 端粒酶hTERT的表达可能在乳腺导管癌的组织发生中起关键作用,c-myc的过度表达可能与乳腺导管癌hTERT基因转录激活有关.     

紫杉醇对survivin表达的影响及其抗肿瘤作用

目的 研究体内外紫杉醇处理后,胃癌细胞survivin蛋白表达的改变及同细胞凋亡关系,探讨紫杉醇抗肿瘤机制.方法 以不同浓度紫杉醇(0、12、60、300、1500 ng/mL)分别处理胃癌BGC-823细胞24 h,检测survivin蛋白表达;另以600 ng/mL紫杉醇处理该细胞72 h,检测处理0、12、24、36、48 h时survivin表达及反映细胞凋亡程度的PARP89000片段.以BGG-823细胞构建裸鼠移植瘤模型,予紫杉醇40 mg/kg腹腔注射,分别在干预后0、1、3、5、7、14 d处死裸鼠,取移植瘤,一半固定行免疫组化检测;一半液氮冻存留行Western blot检测.结果 紫杉醇处理BGC-823细胞24 h时,survivin表达升高具有紫杉醇剂量依赖性.600 ng/mL紫杉醇处理24 h内,survivin表达逐步升高,36 h后明显下降,48 h时更低;处理36 h和48 h时出现明显的PARP89000片段.裸鼠移植瘤结果显示,紫杉醇处理后第3天瘤体内坏死区明显增多,第5～7天达高峰,第14天又有缩小;免疫组化结果显示干预前survivin表达强阳性,干预后1 d变化不明显,第3天明显减弱、第5～7天时最低,第14天又开始升高.Western blot也得出同样结果.结论 体内外试验结果证实,紫杉醇可能通过抑制肿瘤survivin表达,引起细胞凋亡,从而抑制肿瘤生长.体外干预早期survivin表达升高可能为细胞的一种保护作用.     

生存蛋白在胃癌中的表达及与p53、c-erbB2表达的关系

目的　研究人胃癌组织中凋亡抑制蛋白 (IAP)家族的生存蛋白 (survivin)的表达与临床病理及与 p5 3和c erbB2表达的关系。方法　采用免疫组化的方法检测 5 6例胃癌患者肿瘤组织及 2 0例慢性胃炎患者胃粘膜中survivin和 p5 3、c erbB2的表达。结果　 2 0例慢性胃炎患者胃粘膜中survivin的表达阳性 1例 ,阳性率为 5 % ;5 6例胃癌组织中survivin阳性 2 7例 ,阳性率 4 8.2 % ;5 6例胃癌患者c erbB2阳性率 35 .7% (2 0 / 5 6 ) ,p5 3阳性率39.3% (2 2 / 5 6 )。survivin表达与患者年龄、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、临床分级等无明显相关性 ,而与肿瘤Lauren组织分型相关。survivin阳性率在肠型胃癌 (2 0 / 32 ,6 2 .5 % )中显著高于弥漫型 (7/ 2 4 ,2 9.2 % ,P <0 .0 5 )。survivin在c erbB2阳性和阴性患者中阳性率分别为 80 % (16 / 2 0 )和 30 .6 % (11/ 36 ) ,两者间有显著差异 (P <0 .0 1) ;survivin在 p5 3阳性和阴性患者中阳性率分别为 6 8.2 % (15 / 2 2 )和 35 .3% (12 / 34) ,两者比较也有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论　胃癌患者survivin高表达导致的凋亡抑制在胃癌的发生发展中起了重要作用 ,survivin表达与胃癌中 p5 3和c erbB2异常表达相关。     

中药治疗对大鼠坐骨神经损伤后mRNA^NGF表达的影响

目的研究中药党参、丹参、黄芪、生地和复方神肌再生冲剂对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的影响。方法将大鼠分为党参组、丹参组、黄芪组、生地组、复方冲剂组和对照组，每组大鼠18只。麻醉下暴露右侧坐骨神经，在坐骨结节远侧0．8cm处造成坐骨神经挤压伤，根据分组，术后给予不同的中药喂养大鼠。术后不同时间，取紧邻挤压伤部位远侧神经干，应用原位杂交的方法和图像分析处理系统定量测定神经组织中神经生长因子mRNA（mRNA^NGF）的表达。结果丹参组和黄芪组大鼠坐骨神经挤压伤后第2周起，坐骨神经组织中mRNA^NGF表达明显增加，至伤后第4周达到高峰。党参治疗坐骨神经挤压伤，治疗后8周，mRNA^NGF表达较对照组明显增加，差异有显著性。在复方冲剂组，大鼠坐骨神经挤压伤后8周内，神经组织中mRNA^NGF表达始终处于高水平。各组大鼠坐骨神经mRNANG”表达与对照组之间的差异具有显著性（P〈0．05）。复方冲剂组大鼠坐骨神经mRNA^NGF表达与丹参和黄芪组之间的差异也具有显著性。结论中药党参、丹参和黄芪可以促进挤压伤后大鼠坐骨神经mRNA^NGF表达；这种作用在组成复方冲剂后，表现得更为明显。     

人端粒酶逆转录酶在喉鳞状细胞癌中表达与c-myc的相关性

目的研究人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA在喉鳞状细胞癌中和病理分级、临床参数的关系以及和c-myc的相关性。方法用原位杂交法检测40例喉鳞状细胞癌中hTERT mRNA的表达，用免疫组织化学法检测c—myc蛋白。结果喉正常组织、不典型增生、鳞癌组织中hTERT mRNA的阳性率分别为0％（0／10）、10％（1／10）、80％（32／40），喉鳞癌中hTERT mRNA的阳性率明显高于正常组织（P〈0．05）和不典型增生（P〈0．05），hTERT mRNA水平与c—myc的表达呈显著相关（r=0．5422，P〈0．01）。喉鳞癌中hTERT mRNA表达水平与病理分级不相关（P〉0．05），与年龄、性别、TNM分期和淋巴结转移情况不相关（P〉0．05）。结论喉鳞癌中hTERT mRNA的阳性率明显高于正常组织和不典型增生，有助于喉部良恶性病变的鉴别，c-myc的过度表达可能是喉鳞癌端粒酶活性升高的一个重要机制。     

实时RT-PCR检测人端粒酶逆转录酶mRNA用于乳腺癌鉴别诊断及与c-Myc基因的相关性

目的 探讨定量检测人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA在乳腺癌鉴别诊断中的价值，并观察原癌基因c-Myc与hTERTmRNA表达的关系。方法 收集癌旁正常乳腺组织、乳腺普通型导管增生、不典型导管增生、导管原位癌、浸润性导管癌病例，采用实时荧光定量RT-PCR技术（Real-timeRT-PCR）定量检测hTERT和e-Myc基因的转录水平。结果 以NhTERT=10为临界值，所有正常组织和良性病变NhTERT值均小于临界值，而hTERT基因转录升高的导管原位癌及浸润性导管癌其NkTERT值均大于此临界值。显示hTERT和e-Myc基因转录水平呈正相关（y=0．7395，P〈0．01）。结论 实时荧光定量PCR技术检测hTERT基因表达具有高敏感性和特异性。能为常规病理学诊断提供客观的参考指标。从而提高乳腺不典型导管增生与导管原位癌鉴别诊断的准确性。原癌基因e-Myc转录水平上调可能与乳腺癌hTERT基因转录激活有关。     

SARS疫情对列车乘务员心理状况的影响

目的　探讨SARS疫情对列车乘务员心理健康状况的影响 ,为采取防护措施提供依据。方法　对某局承担SARS疫情较重的南部线行车任务的 15 4名列车乘务员 ,在返乘途中采用SCL -90进行心理健康状况分析。结果　观察组除阳性症状均分、人际关系因子分外 ,SCL -90其他各项指标都显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,高年龄组与低龄组相比 ,除敌对、偏执外 ,其余 11项指标二者差异均有统计学意义。结论　SARS疫情对列车乘务员心理状况产生影响 ,相关职能部门不但要重视其身体健康 ,防止感染SARS ,同时也应关注其心理健康 ,特别是高年龄组乘务员 ,要帮助他们解决特殊情况下的后顾之忧 ,使他们都能全身心地投入工作     

Survivin反义核酸协同紫杉醇的体外及大鼠体内抗肿瘤作用

目的研究转染生存蛋白survivin反义寡核苷酸的抗肿瘤作用,对大鼠胃癌模型形成的干预作用、机制及是否与紫杉醇间有协同作用。方法在脂质体介导下进行survivin反义寡核苷酸的体外转染,以WesternBlot检测survivin蛋白表达,以MTT法检测转染survivin反义寡核苷酸及联合紫杉醇对胃癌BGC823细胞生长增殖的影响;以高盐饲料和甲基硝基二硝基胍(MNNG)诱导大鼠发生胃癌,造模中期分别腹腔注射脂质体包裹的survivin反义寡核苷酸、紫杉醇或两者联用,检测造模结束时各组大鼠胃癌的发生率、肿瘤组织中Brdu标记率及凋亡指数。结果Survivin反义寡核苷酸能明显抑制survivin蛋白表达,并抑制BGC823细胞的生长,其IC50约350nmol/L;survivin反义寡核苷酸与紫杉醇联合能显著降低其IC50值,起到协同抗肿瘤作用。造模结束时对照组(C)、紫杉醇组(T)、反义寡核苷酸组(A)、反义寡核苷酸联合紫杉醇组(AT)胃腺癌发生率分别为90%、78.6%、73.3%和50%,AT组的胃癌发生率显著低于对照组(P<0.05),两个单独治疗组胃癌发生率均低于对照组,但无统计学差异(P>0.05);AT组胃癌的BrdU标记率(10.2±4.7)显著低于对照组(18.7±5.5,P<0.05)及T、A两个单独治疗组(分别为16.0±5.8和15.4±5.2,P<0.05);AT组胃癌的凋亡率(1.71±0.41)显著高于对照组(0.91±0.14,P<0.01)及T、A单独治疗组(1.19±0.42、1.29±0.43,P<0.05)。结论Survivin反义寡核苷酸能抑制BGC823细胞生长,与紫杉醇有协同抗肿瘤作用;腹腔注射survivin反义寡核苷酸与紫杉醇能协同抑制胃癌形成,与促进凋亡和抑制细胞增殖有关。Survivin是抗肿瘤基因治疗的良好靶点。