ctB和ureⅠ双基因融合表达及其免疫特性分析

目的：构建霍乱毒素B亚单位（CtB）和幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白（UreⅠ）融合的原核表达质粒pET32a（＋）ctB/ure Ⅰ,并初步研究融合蛋白Ct B/Ure Ⅰ的表达特性和免疫特性.方法：PCR从pUC18 ctB中克隆ctB基因,定向在pET32a（＋）/ureⅠ的ureⅠ基因5＇端插入ctB基因,构建ctB和ure Ⅰ双基因原核表达质粒pET32a（＋）ctB/ure Ⅰ,转该质粒于E.coli BL-21（DE3）,经酶切和序列分析鉴定工程菌.IPTG诱导表达,HP-His亲和层析纯化,SDS-PAGE和Gel-Pro Analizer4分析,重组蛋白免疫BALB/c小鼠.用Western blot和ELISA分析重组蛋白的免疫特性.结果：工程菌含完整的ctB和ure Ⅰ基因,与相对应基因的序列同源性分别为100%.在22℃,1 mmol/L IPTG诱导4 h后,重组蛋白的表达占菌体总蛋白12%,亲和层析纯化后蛋白纯度为94.3%.Western blot表明重组蛋白分别能与相应的抗体反应,该蛋白免疫小鼠后能产生相应的IgG抗体.结论：成功构建了能表达CtB/Ure Ⅰ蛋白的大肠杆菌表达菌株.对融合蛋白表达和纯化后,初步证明了该重组蛋白有CtB和Ure Ⅰ的双特异反应原性和免疫原性,为研究新型幽门螺杆菌疫苗奠定了坚实的基础.     

加味四妙汤对微晶型尿酸钠致兔急性痛风性关节炎的防治作用

目的:观察加味四妙汤对微晶型尿酸钠(MSU)诱导的兔急性痛风性关节炎的防治作用,并初步探讨其作用机制。方法:用MSU诱导兔痛风性关节炎,致炎5 h后收集关节液进行白细胞计数,测定关节液中细胞因子和炎症因子含量,并对关节及周围软组织进行病理组织学检查。结果:加味四妙汤12,6 g.kg-1灌胃可显著降低兔关节液白细胞数以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α),前列腺素E2(PGE2),IL-1β,IL-8水平,减轻关节及软组织水肿和炎细胞浸润、变性坏死。加味四妙汤各组对关节液中IL-6,一氧化氮(NO)抑制作用不明显。结论:加味四妙汤能明显改善MSU诱导的兔痛风性关节炎,其机制可能是抑制炎症细胞趋化和激活,抑制炎症因子、细胞因子的合成与释放。     

论人体寄生虫学在基础医学教育中的科学定位

人体寄生虫仍然是目前危害人类健康的重要病原体，现代科学对于寄生虫的研究已经从单纯病原学的范围发展到对生命现象的研究领域。面对国内部分医学院校在制定教学计划时，随意砍掉《人体寄生虫学》教学内容的做法及如何对该教学内容进行科学定位，值得讨论。     

二巯丙磺钠注射液致肝豆状核变性患者过敏反应危险因素及其预测价值分析

目的分析二巯丙磺钠(DMPS)注射液致肝豆状核变性(HLD)患者过敏反应的危险因素及其对过敏反应风险的预测价值。方法收集2019年1月至2021年12月因HLD首次在安徽中医药大学第一附属医院住院且接受DMPS治疗患者的电子病历, 记录患者基本信息、应用DMPS前有关实验室指标检查结果、DMPS日剂量及过敏反应发生情况、治疗和转归。根据是否发生DMPS相关过敏反应将患者分为过敏组和对照组, 比较2组患者临床特征, 采用二元logistic回归法分析DMPS致过敏反应的危险因素, 计算比值比(OR)及其95%置信区间(CI);将所有独立危险因素合并为联合预测因子, 应用受试者工作特征(ROC)曲线分析单个危险因素和联合预测因子对过敏反应发生风险的预测价值。结果纳入分析的患者共477例。过敏组124例, 男性80例, 女性44例, 年龄1～51岁, <18岁者55例;对照组353例, 男性237例, 女性116例, 年龄2～66岁, <18岁者106例。过敏组124例患者共发生过敏反应191例次, 主要表现为皮肤瘙痒(67例次、35.1%)和药物性皮炎(58例次、30.4%);...     

天然产物降血糖活性成分研究进展

糖尿病是一种由于内源性胰岛素相对或绝对不足而引起的糖代谢紊乱的疾病.糖尿病导致的死亡人数在发达国家已经列心脑血管疾病、癌症之后第3位,因此迫切需要开发有效的治疗方法.天然产物具有丰富的降血糖化合物,为糖尿病的预防和治疗提供了新方法和新途径.     

2种纯化流感病毒方法的比较研究

目的比较2种纯化浓缩鸡胚尿囊液中流感病毒方法。方法将流感病毒鸡胚尿囊液分别采用蔗糖密度梯度离心法(sucrose—density—gradient—centrifugation,SDGC)和红细胞吸附释放法(absorption and release-RBC,AR—RBC)进行纯化,收集纯化病毒测定血凝效价,比较2种纯化方法。结果SDGC法纯化病毒可在30％和45％蔗糖层面交界处的区带中检测到流感病毒,血凝效价为1：2560;用AR—RBC法纯化病毒过程中用新鲜鸡红细胞出现了溶血现象,而用甲醛处理过的鸡红细胞则无此现象,血凝效价均为1：2560。结论与SDGC法纯化病毒比较,AR-RBC法是一种经济实用、操作简便并有较高纯化效率的方法,尤以甲醛处理过的鸡红细胞纯化效果最好。     

ctB和ure I双基因融合表达及其免疫特性分析

目的构建霍乱毒素B亚单位(CtB)和幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(UreI)融合的原核表达质粒pET32a( )ctB/ureI,并初步研究融合蛋白CtB/UreI的表达特性和免疫特性。方法PCR从pUC18ctB中克隆ctB基因,定向在pET32a( )/ureI的ureI基因5′端插入ctB基因,构建ctB和ureI双基因原核表达质粒pET32a( )ctB/ureI,转该质粒于E.coliBL-21(DE3),经酶切和序列分析鉴定工程菌。IPTG诱导表达,HP-His亲和层析纯化,SDS-PAGE和Gel-ProAnalizer4分析,重组蛋白免疫BALB/c小鼠。用Westernblot和ELISA分析重组蛋白的免疫特性。结果工程菌含完整的ctB和ureI基因,与相对应基因的序列同源性分别为100%。在22℃,1mmol/LIPTG诱导4h后,重组蛋白的表达占菌体总蛋白12%,亲和层析纯化后蛋白纯度为94.3%。Westernblot表明重组蛋白分别能与相应的抗体反应,该蛋白免疫小鼠后能产生相应的IgG抗体。结论成功构建了能表达CtB/UreI蛋白的大肠杆菌表达菌株。对融合蛋白表达和纯化后,初步证明了该重组蛋白有CtB和UreI的双特异反应原性和免疫原性,为研究新型幽门螺杆菌疫苗奠定了坚实的基础。     

最喜欢的就是最好的

有一位青年．他终日闷闷不乐．觉得生活中没有一件让自己开心的事情。苦闷中,他去拜访一位智者,冀望能从这位睿智的人那儿讨得一剂能让自己快乐起来的良方。智者告诉他,在这个世界上,只有你认为是最好的东西才能使你抉乐。青年瞅了瞅自己周围,他没有发现一样自己认为是世界上最好的东西,于是,他决定云游四方．去寻找世界上最好的东西。     

抗EV713C蛋白酶活性中草药单体的虚拟筛选

目的通过虚拟筛选寻找抑制肠道病毒71型(EV71)3C蛋白酶活性的中药单体化合物。方法从TCM Database@Taiwan数据库下载抗病毒中药的1998个化合物作为筛选对象,以EV71 3C蛋白酶为药物靶点,利用Auto Dock Vina进行分子对接,模拟中草药单体与EV71 3C蛋白酶的结合,根据结合自由能大小对中药单体进行排序;使用Discovery Studio2018 Visualizer对得分≤-37.673 kJ/mol的中草药单体与EV71 3C蛋白酶进行相互作用分析,观察其结合模式。结果虚拟筛选得到2个与EV71 3C蛋白酶结合较好的中药单体,分别是原花青素B5(procyanidin B5)和1,2,3,6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(1,2,3,6-tetra-O-galloyl-β-D-glucose)。结论从传统中药中筛选出抗EV71 3C蛋白酶的候选中药单体,为体外抗EV71实验研究提供参考。     

闸北社区糖尿病管理模式策略研究

自2005年发布<上海市社区糖尿病防治工作指南>以来,糖尿病防治工作卓有成效,但也存在一些问题.现就闸北社区糖尿病管理模式现状进行研究,以此完善防治策略,提高全区糖尿病防治水平.