病毒性肝炎患者HGVRNA的检测及其临床意义

病毒性肝炎患者ＨＧＶＲＮＡ的检测及其临床意义徐芳芹１汤伟１张冬雷２王惠民２Ｓｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓｈｅｐａｔｉｔｉｓ，ｖｉｒａｌ，ｈｕｍａｎ；ｌｉｖｅｒｃｉｒｈｏｓｉｓ；ＲＮＡ，ｖｉｒａｌ／ａｎａｌｙｓｉｓ；ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒ...     

银杏内酯和神经生长因子影响原代人胚肝细胞的增殖及分泌

目的:如何培养足够的肝细胞以及应用一些物质、因子从而使其增加分裂、减少凋亡?观察银杏内酯和神经生长因子对体外原代培养的人胚肝细胞增殖、凋亡及相关分泌功能的影响具有临床实用性意义。方法:实验于2005-07/2006-10在南通大学神经生物学研究所完成。①细胞来源:孕14～16周流产胎儿,由南通市妇幼保健院妇产科提供,产妇及其家属均知情同意,实验经医学伦理委员会批准。银杏内酯由中国药科大学提供,神经生长因子为Roche公司产品。②实验方法:用非灌流法从人胚肝中分离肝细胞,以DMEM作为培养基,接种于4块24孔培养板中,每两块培养板各接种36孔,12孔/组,细胞3×105/孔。银杏内酯组各孔加入含37.5g/L银杏内酯和体积分数为0.1小牛血清的DMEM培养液2mL,神经生长因子组各孔加入含100mg/L神经生长因子和体积分数为0.1小牛血清的DMEM培养液2mL,空白对照组各孔加入仅含体积分数为0.1小牛血清的DMEM培养液2mL。③实验评估:人胚肝细胞原代培养至9d,倒置显微镜下计数每视野的肝细胞数,同时行MTT试验,并用流式细胞仪检测肝细胞凋亡情况。分别于培养3,6,9d时收集肝细胞培养液进行白蛋白含量检测。结果:①原代肝细胞生长情况及肝细胞计数:接种12h后各组肝细胞均已贴壁,3d后可见由3～5个细胞组成的细胞集落,至9d时银杏内酯组和神经生长因子组肝细胞已基本铺满孔底,且呈立体生长倾向,空白对照组肝细胞较少,胞间有空隙存在。至培养9d,银杏内酯组、神经生长因子组、空白对照组每视野内肝细胞计数差异有显著性意义(F=12.97,P=0.00)。②MTT试验结果:原代肝细胞培养至9d时,银杏内酯组、神经生长因子组、空白对照组吸光度值差异有显著性意义(F=71.90,P=0.00)。③肝细胞培养液白蛋白含量:培养3d时各组细胞培养液的白蛋白含量方差分析无明显差异(F=0.23,P=0.79)。培养6,9d同一时间点组间比较差异有显著性意义(F=11.69,P=0.00;F=9.35,P=0.00)。④细胞凋亡情况:银杏内酯组、神经生长因子组、空白对照组凋亡肝细胞百分率分别为11.53%,9.29%,15.27%。结论:银杏内酯和神经生长因子对原代人胚肝细胞的增殖和分泌白蛋白功能均具有促进作用,并抑制细胞凋亡。     

前列地尔对重度慢性乙型肝炎疗效观察

目的 :观察前列地尔对重度慢性乙型肝炎的治疗作用。方法 :采用随机分组 ,对治疗组重度慢性乙型肝炎加前列地尔治疗 ,对治疗前后肝功能情况、临床疗效进行统计分析。结果 :治疗前后肝功能情况治疗组明显优于对照组 ,治疗组取得了较为满意的疗效。结论 :前列地尔能明显改善重度慢性乙型肝炎患者的肝功能 ,联合应用前列地尔对重度慢性乙型肝炎有治疗作用     

不同血清学模式乙肝患者的血清病毒水平及其临床意义

目的 :探讨乙肝患者的不同血清学模式与血清乙肝病毒核酸 ( HBV DNA)含量关系及其临床意义。方法 :采用 EL ISA和定量 PCR方法检测 78例乙肝患者的血清乙肝病毒标志物 ( HBVM)和 HBV DNA含量 ,并将 HBVDNA含量和患者肝功能中的主要指标进行相关性分析。结果 :78例乙肝患者的 HBV DNA阳性率为 83 .3 % ( 65 / 78) ,65例阳性患者的血清 HBV DNA含量平均为 5 .78± 1.12 (对数值 ) ;慢性乙型肝炎和活动性乙型肝炎肝硬变患者的血清 HBV DNA含量显著高于急性乙型肝炎患者 ( P<0 .0 1) ;HBe Ag或 HBs Ag阳性组的 HBV DNA含量均显著高于HBe Ag或 HBs Ag阴性组 ( P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ;在出现 HBe Ab血清转换组中 ,HBV DNA阳性率高达 77.8%～ 78.6% ;血清 HBV DNA含量与血清谷丙转氨酶 ( AL T)水平无相关性 ( r=0 .0 2 5 ,P>0 .0 5 ) ,但与血清总胆红素水平呈正相关 ( r=0 .3 0 3 ,P<0 .0 5 )。结论 :HBV慢性持续感染可能与病毒复制活跃及病毒变异等因素有关 ;慢性乙肝患者在出现 HBe Ab血清转换时 ,并不表示病毒复制停止 ,而只是病毒复制水平降低 ;乙肝患者的肝损害与 HBV复制有一定关系     

银杏内酯对原代培养新生大鼠肝细胞增殖的影响

目的 :探讨银杏内酯对原代培养新生大鼠肝细胞增殖的影响。方法 :P7SD大鼠肝脏组织块用胰蛋白酶消化 ,获取的分离肝细胞植入 2块 2 4孔培养板中 ,每板分成 2组 ,各 12孔 :(1)银杏内酯组加入含 37.5 g/L银杏内酯和 2 0 %小牛血清的 William E培养液 ;(2 )对照组仅加入含 2 0 %小牛血清的 William E培养液。培养板置 37℃、5 %CO2 培养箱中培养。第 8d取其中一块培养板在倒置显微镜下 ,每孔随机取 5个视野行肝细胞计数 ,并检测培养液中白蛋白的含量 ;另一块培养板行 MTT试验。结果 :银杏内酯组肝细胞数量较多 ,在放大 40 0倍的情况下 ,每视野 2 14 .8± 2 0 .2 ,白蛋白含量为 3.5 5± 0 .2 3g/L,MTT试验的 OD值为 0 .380± 0 .0 17;而对照组中肝细胞数量较少 ,每视野 176 .4± 2 4.4,白蛋白含量为 3.0 8± 0 .2 4g/L,MTT试验的 OD值为 0 .339± 0 .0 2 3。t检验表明 ,上述指标两组间的差异均具有显著性意义 (P均 <0 .0 1)。结论 :银杏内酯具有促进体外培养肝细胞增殖的作用 ,从而使培养液中白蛋白含量和 MTT试验 OD值增高。     

输液瓶内压力对排气效果的影响

静脉输液必须排尽输液管内的气体。我们在临床实践中发现，输液瓶内的压力直接影响排气速度及一次排气成功率。我们对比观察了输液瓶内正压与等压的排气效果，表明正压排气效果满意，现报告如下。     

银杏内酯和神经生长因子对体外培养人胚肝细胞功能的影响

目的:探讨银杏内酯和神经生长因子(NGF)对体外培养人胚肝细胞功能的影响。方法:用改良的非灌流法分离人胚肝细胞,用DMEM培养基培养,分为银杏内酯组、NGF组和对照组。培养至第9d时进行糖原PAS染色,计数糖原染色阳性细胞,图象分析染色灰度;检测培养液中白蛋白和尿素的含量。STATA7.0统计软件进行方差分析和两两比较。结果:糖原染色阳性细胞银杏内酯组74.63±12.76、NGF组83.25±11.18、对照组38.25±9.44;染色灰度银杏内酯组123.19±18.96、NGF组107.25±17.09、对照组164.91±21.65;白蛋白含量(g/L)银杏内酯组3.213±0.422、NGF组3.450±0.481、对照组2.575±0.498;尿素含量(mmol/L)银杏内酯组1.813±0.290、NGF组2.013±0.344、对照组1.363±0.220。统计显示,上述数据银杏内酯组和NGF组之间的差异均无显著性意义(P>0.05),而他们与对照组之间的差异均有显著性意义(P<0.05或0.01)。结论:银杏内酯和NGF对体外培养的人胚肝细胞功能有促进作用。     

糖皮质激素在急性重型病毒性肝炎前期患者中的应用

分析２１例急性重型病毒性肝炎前期患者用糖皮质激素治疗前后的临床表现和肝功能等主要指标的变化。并与同期住院、病情相似未用激素的２５例患者作对照比较。结果显示：激素组消化道症状改善和黄疸消退均较对照组迅速，肝功能好转及恢复也较快。临床治愈率激素组为９５．２４％，对照组为５６．００％，两组有显著性差异，表明对重症肝炎前期患者恰当使用糖皮质激素可以收到较好的近期疗效。