冷冻消融治疗对肺腺癌细胞凋亡的影响

目的 探究冷冻消融治疗对肺腺癌细胞凋亡的影响。方法 根据冷冻消融术后肿瘤组织局部变化,在细胞水平上建立肺癌冷冻消融模型。传代培养人肺癌H1299细胞株,将细胞分为4组：A组,未处理细胞,为对照组;B组,未处理细胞培养液中加入坏死液(将细胞悬液放入液氮罐中冷冻5 min, 37℃复温后离心取上清液,得到坏死液);C组,亚致死细胞(细胞在-80℃环境中冷冻7 min,模拟亚致死状态);D组,亚致死细胞培养液中加入坏死液。24 h后用流式细胞术检查冷冻消融对肺癌细胞凋亡的影响,qRT-PCR和Western blot检测冷冻消融对凋亡相关分子B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)及Bcl-2相关x蛋白(Bax)表达的影响。采用Lewis肺腺癌细胞株建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,造模成功的小鼠随机分成2组,假手术组和冷冻消融组,每组4只,氩氦刀冷冻14 d后,取肿瘤组织,通过qRT-PCR和Western blot检测冷冻消融对凋亡相关分子Bax及Bcl-2表达的影响。结果 细胞冷冻模型中与对照组A组相比,B、C、D组均能促进细胞凋亡(P<0.05),且D组细胞凋亡率最高,高于其他组...     

不同范围冷消融治疗对Lewis肺癌小鼠Tregs细胞的影响

目的 探究不同范围冷消融治疗对Lewis肺癌小鼠Tregs细胞的影响。方法 采用Lewis小鼠肺腺癌细胞株建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,选取造模成功的小鼠随机分为对照组、冷消融低范围组、冷消融中范围组、冷消融全范围组,每组5只。冷消融组予以不同冷冻范围的冷消融手术,冷消融低范围组消融面积为肿瘤的50%～60%,中范围组为60%～90%,全范围组为100%;对照组予以假手术治疗。术后14日取外周血、脾脏及肿瘤组织。流式细胞仪检测肿瘤组织、脾脏中CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺T细胞数量;Western blot法检测肿瘤组织中Foxp3蛋白表达情况;qRT-PCR检测肿瘤组织中Foxp3 mRNA表达;ELISA检测外周血中细胞因子白介素(IL)-2、转化生长因子(TGF)-β的表达。结果 与对照组相比,冷消融中范围组脾脏组织中CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺T细胞比例降低(P<0.05),冷消融各组组间相比差异无统计学意义(P>0.05);...     

基于MAPK/ERK信号通路探讨冷冻消融对肺癌小鼠的作用机制

目的:研究冷冻消融术对肺腺癌小鼠MAPK/ERK信号通路的调节作用.方法:采用Lewis小鼠肺腺癌细胞株建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,选取造模成功的10只小鼠随机分成2组,假手术组和冷冻消融组,每组5只,冷冻消融组小鼠选用双循环冷冻消融术,假手术组于移植瘤处切开缝合,术后14 d取肿瘤组织,通过Western ...     

冷冻消融联合养肺方治疗对Lewis肺癌CD4+CD25+Foxp3+Treg的影响及机制

目的 探讨冷冻消融联合养肺方治疗对Lewis肺癌CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞影响及机制。方法 构建C57BL/6小鼠肺癌皮下移植瘤模型,随机分为模型组、冷冻消融组、冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组,每组5只。模型组行假手术,在小鼠移植瘤部位切开缝合,其余各组均行双循环冷冻消融术。术后冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组分别给予1.64、3.28、6.56 g/kg养肺方灌胃,模型组、冷冻消融组分别给予等体积的生理盐水灌胃,均1次/d,连续给药14 d。给药期间观察并记录各组小鼠肿瘤体积,末次给药后剥离脾脏和移植瘤,称取瘤体质量并计算抑瘤率;流式细胞术检测脾脏CD4⁺T、CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞比例;qRT-PCR和Western blot法检测瘤组织中Foxp3表达。结果 各组小鼠肿瘤体积均逐渐增长,增长速度为模型组>冷冻消融组>冷冻消融联合养肺方低剂量组>冷冻消融联合养肺方中剂量组>...