致白内障基因Hsf4b K65R位点突变对下游热休克蛋白表达的影响

目的:探讨致白内障基因热休克因子4b(Hsf4b)K65R位点突变对其调控下游热休克蛋白(HSP)表达的影响。方法:采用KOD-Plus-Mutagenesis-Kit试剂盒构建pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R赖氨酸突变质粒;通过慢病毒感染小鼠晶状体上皮细胞mLEC构建稳定表达Hsf4b/K65R突变质粒的细胞株;Western blotting检测Hsf4b在mLEC K65R点突变细胞株和野生株中的表达;Western blotting及real-time PCR检测K65R点突变后下游蛋白Hsp70、Hsp90、Hsp27和CryAB表达的变化。结果:阳性克隆PCR及基因测序证明慢病毒载体pWZL-blast-HAHsf4b/K65R构建成功。K65R点突变后不影响Hsf4b在小鼠晶状体上皮细胞mLEC中的表达,但能影响下游蛋白CryAB、Hsp27、Hsp70i和Hsp90a的表达。结论:pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R载体可用于慢病毒感染稳定细胞株构建。Hsf4b K65R位点突变能显著影响其对热休克蛋白的调控功能。     

瑞舒伐他汀治疗冠心病的疗效及机制研究

目的：研究瑞舒伐他汀治疗冠心病的疗效并分析其作用机制。方法选择174例冠心病患者进行研究。将其随机分为观察组和对照组，各87例。对照组给予阿司匹林、硝酸异山梨酯片、盐酸索他洛尔基础治疗，观察组在基础治疗基础上施用瑞舒伐他汀进行治疗。对患者治疗前后TC、TG、HDL-C、LDL-C进行检测并分析，观察并记录患者不良反应。结果观察组患者治疗后TC(2.24±1.17)mmol/L、TG(1.24±0.21)mmol/L、LDL-C(1.49±0.14)mmol/L水平较之对照组患者均明显降低，差异有统计意义（P＜0.05）；观察组患者治疗后HDL-C(1.71±0.12)mmol/L,水平较之对照组患者明显升高，差异有统计意义（P＜0.05）。观察组患者不良反应发生率为10.34%，对照组患者不良反应发生率为13.79%，不良反应发生率无明显差异无统计意义。结论瑞舒伐他汀治疗冠心病疗效显著且与传统疗法相较并无明显副作用，值得推广。     

涂布介入器械的人血管内皮生长因子真核表达载体的构建

目的：构建可涂布于介入器械的人血管内皮生长因子（VEGF）真核表达载体。 方法：根据人VEGFA（NM_001025366）目的序列设计引物制备目的基因及载体,双酶切载体pIRES2-ZsGreen1和目的基因homo VEGFA进行连接后转化入大肠杆菌,构建质粒pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA并测序鉴定。 结果：目的基因VEGFA已连接到载体pIRES2-ZsGreen1,大小约1400 bp,与人VEGFA（NM_001025366）目的序列比对结果一致,未见变异。质粒pIRES2-ZsGreen1-homo-VEGFA构建成功。 结论：成功构建重组人血管内皮生长因子真核表达载体,可用于涂布介入器械表面进行下一步实验。