呼吸道合胞病毒PCR序列分析方法的建立和应用

目的：探讨呼吸道合胞病毒ｃＤＮＡ（ＲＳＶ ｃＤＮＡ）序列分析的方法。方法：将ＰＣＲ扩增与核酸序列分析技术相结合,以γ＾３２Ｐ－ＡＴＰ标记Ｔ７Ｐｒｏｍｏｔｅｒ为测序引物,Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶直接测序。结果：测序梯清晰,可读性好。．ＲＳＶ ＮＳ和Ｎ基因区虽较稳定,但仍有颠换突变。结论：ＲＳＶ的变异性决定了它对人类的反复感染,ＰＣＲ测序方法较简便,在临床标本的检测和变异的观察中有重要意义。     

缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织尾加压素Ⅱ的分布及意义

目的 揭示血管新型收缩肽--尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ, UⅡ)在缺氧性肺动脉高压发生、发展中可能发挥的病理生理作用,探讨低氧对肺组织各种细胞成分UⅡ基因表达、合成和释放的影响.方法 建立缺氧性肺动脉高压大鼠模型,采用免疫组织化学方法(IHC),观察UⅡ在不同低氧时间点大鼠肺组织各种细胞中的分布及变化.结果 UⅡ在肺组织多种细胞中广泛分布.低氧后,UⅡ在肺组织各种细胞中表达增强.低氧10 d和20 d最明显.结论 低氧可以促使肺组织中多种细胞合成、分泌UⅡ.低氧也促进肺组织UⅡ的释放.UⅡ参与缺氧性肺动脉高压的发生与发展.     

气管内雾化麻醉致双眼上睑下垂1例

1 病历摘要 男，74岁。因咳嗽、发热、痰中带血3d于2006-12-02入院。入院后CT示右肺门见一软组织肿块，右中叶心缘旁可见不规则致密影，右中叶中间段支气管狭窄。入院时患者一般状况良好。隔日行支气管镜检查，先以2％利多卡因10m1超声雾化吸入，嘱患者大口吸气，用鼻孔呼气，20min后行电子气管镜检查。     

新兵呼吸道感染肺炎支原体快速检测的结果分析

目的应用快速检测方法对出现呼吸道症状的新兵行肺炎支原体（MP）抗原和抗体的检测,并探讨其临床意义。方法收集北京部队5个营区新兵中出现咳嗽、咳痰、流涕、咽痛等呼吸道症状的398例患者的咽部分泌物,应用快速培养法检测MP抗原,应用间接免疫荧光法（IFA）对腋温≥37．3℃或抗原阳性的新兵MP的IgM抗体进行检测,分析检测结果。结果MP抗原阳性率4．27％;快速培养法检测MP抗原与IFA法检测同一患者相应的IgM抗体结果的差异有统计学意义（P〈0．05）;不同籍贯、不同营区的新兵MP恢复期IgM抗体检测结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MP是成人呼吸道感染的重要病原体,快速培养法、IFA法能够提供早期诊断和治疗的依据,可以作为诊断MP感染的优选检测方法。     

115例急性呼吸道感染患者FluA抗原快速检测与血清抗体对比研究

目的评价胶体金免疫层析（goldirnmunoehromatographicassay,GICA）快速检测甲型流感（influenzaA,FluA）病毒抗原的可行性,并调查部分呼吸科住院患者FluA感染及抗体水平。方法收集2009年09月16日至2011年02月01日期问在北京军区总医院呼吸科住院的115例患者鼻咽部分泌物标本,应用GICA法检测FluA病毒抗原,同时留取患者双份血清。以检测双份血清抗体的Hl法为“金标准”,对GICA法做出评价。结果①GICA法与HI法检测结果行一致性检验,Kappa值为0．628,配对）（2检验,差异无统计学意义（P〉0．05）;GICA法的敏感度为68．2％,特异度为93．5％,符合率为84．3％,误诊率为6．5％,漏诊率为31．8％,约登指数是0．617;②115例住院患者FluAHI法确诊病例共22例,FluA（新型H1N1）检出率为4．3％（5／115）,FluA（季节性H1N1）检出率为2．6％（3／115）,FIuA（季节性H3N2）检出率为6．1％（7／115）,FluA混合感染检出率为6．1％（7／115）。FluA（新型H1N1）检出时间主要集中在09年10月和11月,随后以混合感染形式与FluA（季节性H3N2和H1N1）散发存在。结论①与HI法相比,应用GICA法检测FluA抗原,敏感度略低,特异度较好,二者一致性较好,作为临床筛查FluA感染有一定价值;②初步印证WHO预计的2009年H1N1流感病毒会在未来数年内以季节性病毒的方式继续传播趋势。     

人呼吸道合胞病毒M2-1基因转染对人肺腺癌细胞生长特性的影响

目的:探讨人呼吸道合胞病毒(hRSV)M2-1基因转染对人肺腺癌细胞体外生长特性的影响.方法:应用脂质体转染法,将携带M2-1基因的重组载体pXJ-41/M2-1转入人肺腺癌PAa和A549细胞,并获稳定表达;以不含M2-1基因的空白载体为对照,采用流式细胞术、MTT法、胰酶消化试验、软琼脂集落形成实验和Boyden小室等方法观察转染细胞的生长特性、贴壁能力及侵袭能力变化.结果:与转染前和转染空白质粒组比较,转染M2-1基因的PAa和A549细胞的G2/M期细胞比例均显著增加(P<0.05,P<0.01);细胞增殖明显加快(P<0.01),倍增时间缩短;集落形成率显著增加(P<0.01);PAa细胞胰酶消化离壁时间缩短(P<0.01),而A549细胞在3组间无统计学差异;Boyden小室实验中,A549细胞透膜数显著增加(P<0.01),而PAa细胞因透膜数很少,均无法计数.结论:M2-1基因转染能提高体外培养的PAa和A549细胞的增殖能力和侵袭能力,感染hRSV病毒的肺癌患者应引起重视.     

两种快速检测成人流感病毒(甲、乙)方法的评价

目的：通过对比两种检测流感病毒的方法,寻找一种快速、简便、更适于快速检测的方法,使临床治疗更及时有效。方法：应用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标法（APAAP法）和胶体金免疫层析法（GICA法）,检测北京军区总医院呼吸科2007-07/2008-12住院患者中的感染病例共960例。结果：两种方法的一致性检验,甲型流感Kappa=0.765,乙型流感Kappa=0.754,两者均大于0.75,说明两种方法检测甲、乙型流感均有很好的一致性。结论：与APAAP法相比,GICA法快速、简便,更适合于流感快速检测。     

人呼吸道合胞病毒M2-1基因原核表达质粒的构建与表达

目的 构建人呼吸道合胞病毒（hRSV）MS－1基因原核表达质粒载体,使其于原核细胞中表达。方法 利用Hep-2细胞培养hRSV,提取感染细胞总RNA,通过RT－PCR扩增M2－1基因片段。目的片段与质粒pGEX-2Tx EcoRI、XhoI双酶切后,连接、转化,筛选出阳性克隆。阳性克隆菌经诱导剂诱导后,表达M2－1融合蛋白。结果 成功地构建了M2－1基因原核表达质粒载体,实现了其于原核中的表达。结论 建立了hRSV基因M2－1原核表达载体,为进一步研究hRSV奠定基础。     

实验室人员在消毒灭菌工作中的自身防护

目前，大多数消毒剂中的消毒因子对人体有害，因此，在进行消毒工作中的医护人员一定要有自身防护意识和保护措施，防止消毒操作不当造成对人的伤害。十几年来，我实验室在消毒灭菌工作中没有出现差错，现将我们在消毒灭菌工作中的自身防护措施介绍如下。     

经纤维支气管镜支气管肺泡灌洗操作体会

支气管肺泡灌洗 (BAL)的方法目前不完全统一 ,我们采用BAL技术规范进行支气管肺泡灌洗 ,获得了理想的支气管肺泡灌洗液 (BAL F)标本 ,现将我们工作中体会介绍如下。1　对象和方法我科自 1995 - 12～ 2 0 0 0 - 12对门诊和住院患者 15 8例 ,在纤维支气管镜检查同时根据病变分别行活检和支气管肺泡灌洗。有 38例活检后行 BAL,70例活检前行 BAL。纤支镜型号为olympus BF P2 0 ,按纤支镜检查常规进行术前准备和麻醉 ,随后将纤支镜尖端嵌入 3～ 4级支气管 ,将自制的灌洗瓶两端分别接在纤支镜和负压吸引上 ,并切断负压引力 ,嘱患者减少呼…