硫化氢对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及其机制研究

目的 观察硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）对内皮细胞凋亡的影响,并从抗氧化的角度初步探讨其作用机制.方法 以硫氢化钠（sodium hydrosulfide,NaHS）作H2S的供体,人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）经10 μmol/L NaHS预孵育24 h后加入33 mmol/L葡萄糖（高糖）作用48 h,以正常对照组、高糖损伤组和10 μmol/L NaHS预处理组作为对照,DAPI荧光染色观察细胞核形态的变化并检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞黄嘌呤氧化酶（XOD）和超氧化物歧化酶（SOD）蛋白质的表达.结果 DAPI染色荧光显微镜观察发现,与正常对照组相比,高糖损伤组HUVECs中出现大量的核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的凋亡细胞,NaHS预处理的HUVECs中细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的细胞数明显减少,大部分细胞染色质呈弥漫均匀的低强度荧光.Western Blot结果显示,33 mmol/L葡萄糖孵育HUVECs 48 h后,与正常对照组相比,SOD蛋白表达降低37.17%,XOD蛋白的表达增加47.06%;10 μmol /L NaHS 预处理组与高糖损伤组相比,HUVECs SOD蛋白的表达增加27.52%,XOD 蛋白表达降低 31.20%.结论 H2S对高糖诱导的HUVECs凋亡具有拮抗作用,并与其抑制高糖引起的细胞内SOD水平的降低、XOD升高有关.     

间歇性压力刺激通过NO途径改善糖尿病大鼠微血管功能

目的 观察间歇性压力处理对糖尿病大鼠骨骼肌微血管功能的影响.方法 链脲霉素(60 mg/kg)诱导大鼠Ⅰ型糖尿病模型成功后,给予大鼠一侧后肢骨骼肌120 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)的压力,按5 s/15 s的压力/释放模式循环处理30 min/d,持续3周.体视显微镜下分离后肢骨骼肌微动脉,采用微血管离体灌流方法观察微动脉对乙酰胆碱(Ach)引起的舒张反应.应用免疫印迹方法测定微动脉中内皮依赖性的一氧化氮合酶(eNOS)的蛋白表达.结果 与未给予压力处理侧微动脉相比,压力处理使微动脉eNOS的表达增加,同时增强骨骼肌微动脉对Ach引起的舒张反应.结论 骨骼肌间歇性压力处理可以通过增加eNOS表达,改善糖尿病大鼠骨骼肌微血管功能.     

浅谈提高留学生神经病学教学质量的几点体会

神经病学复杂抽象、难以理解,是医学留学生的一门重要临床医学课程。在承担该课程的全英语教学过程中,从提高授课老师教学能力,改进教学方式等方面,探讨留学生神经病学教学实践,以期对今后留学生的教学工作有所帮助。     

NF—κB在模拟缺血／再灌注诱导人离体胃黏膜上皮细胞凋亡中的作用

目的观察核因子KB（NF—κB）在模拟缺血／再灌注诱导人离体胃黏膜上皮细胞凋亡中活性的变化,并进一步阐明其作用。方法采用人胃黏膜上皮细胞株进行体外培养并传代,细胞以缺氧（5％CO2、1％O2、94％N2）＋兀糖KR液模拟缺血、缺氧,复氧、复糖模拟再灌注诱导胃黏膜上皮细胞凋亡,用流式细胞术、免疫组化法、免疫印迹法观察正常对照组、模拟缺血／再灌注损伤组（I—R组）、NF—κB的抑制剂PDTC预处理组（使用10μmol·L^-1PDTC预处删胃黏膜上皮细胞24h）于模拟缺血1h、再灌注6h后细胞凋亡及NF—κB的表达情况。结果①I—R组细胞凋亡率较正常对照组明显增高（P〈0．01）,PDTC预处理组细胞凋亡率较I—R组明显下降（P〈0．01）。②正常对照组胃黏膜上皮细胞核内极少有NF—κB表达,I—R组细胞核内NF—κB表达明显增加,PDTC预处理绀NF—κB核转化现象减轻,胞核染色明显减少。③I—R组与正常对照组比较,胃黏膜上皮细胞核NF—κB蛋白表达水平显著增高（P〈0．01）;PDTC预处理组与I—R组比较,NF—κB蛋白表达水平明显降低（P〈0．01）。结论模拟缺血／再灌注能增加人肖黏膜上皮细胞核内NF—κB的表达,NF—κB的激活具有促进细胞凋产的作用;PDTC叮以抑制细胞凋亡,对人胃黏膜上皮细胞模拟缺血／再灌注损伤有保护作用。     

外源性硫化氢通过抗氧化应激减轻水浸束缚大鼠胃黏膜损伤

目的 观察硫化氢供体硫氢化钠(NaHS)预处理对大鼠水浸束缚所致胃黏膜损伤的影响,并对其机制进行探讨.方法 SD大鼠分为正常组、水浸束缚组(WRS组)及NaHS预处理组.NaHS预处理组大鼠腹腔连续注射NaHS(10 μmol·kg-1·d-1) 7、14、21天后水浸束缚6 h.计算大鼠水浸束缚后胃黏膜大体损伤面积,免疫印迹方法检测胃黏膜组织黄嘌呤氧化酶(XOD)和超氧化物歧化酶(SOD)的表达.结果 WRS组大鼠胃黏膜损伤面积明显高于正常组;NaHS预处理7、14、21天能够减少水浸束缚引起的胃黏膜损伤面积(P<0.05);与WRS组比较,NaHS预处理各组的XOD表达下降(P<0.05)、SOD表达升高(P<0.05).结论 NaHS预处理对水浸束缚大鼠胃黏膜损伤具有保护作用,推测其机制是硫化氢通过提高胃黏膜组织SOD活性、减少XOD表达,促进机体清除氧自由基,同时减少氧自由基生成,从而减轻水浸束缚对胃黏膜的损害作用.