siRNA介导的NF-κB P65沉默诱导肝癌细胞SMMC7721凋亡

目的 研究siRNA介导的NF-κBP65沉默诱导肝癌细胞凋亡相关机制。方法实验以肝癌SMMC772l细胞株为材料，分为空白对照（Con）、脂质体对照（LP）以及siRNA干扰实验（siRNA）3组。以体外转录法合成dsRNA，并用脂质体转染SMMC7721细胞株；Westernblotting检测NF．KBP65表达水平，MTT检测细胞增殖情况，Annexin V-PI法检测细胞凋亡，免疫组化检测Bcl-2和Bax表达。结果与Con和LP组相比，siRNA具有抑制SMMC7721细胞NF-κBP65表达的作用，NF-κBP65表达抑制率分别达到64．74％和34．52％。siRNA明显抑制SMMC．7721细胞的增殖，并诱导细胞凋亡，晚期凋亡细胞分别是Con组和LP组的8倍和7倍。siRNA引起Bcl-2表达下调，而Bax表达上调。结论siRNA可以有效抑制NF-κBP65蛋白表达，并通过调节Bcl-2和Bax诱导SMMC7721细胞的凋亡。     

镁在基因组稳定中的作用

在细胞内生理浓度下的镁(Mg2 )是保持基因组稳定性的重要因素，它能稳定DNA及染色质结构，是参与DNA合成和分解过程中酶系统必要辅助因子。也作为核苷切除修复、碱基切除修复及错配修复过程中的辅助因子。动物实验及流行病学研究表明，镁的缺乏会影响细胞膜的完整性及其功能、增加氧化应激反应的易感性，从而导致心血管疾病，加速衰老过程。镁与肿瘤形成之间的关系更为复杂，镁在肿瘤形成早期起抑制作用，但可促进已形成肿瘤的生长。尽管镁在人体内发挥着重要作用，但在大多数工业国家，镁的摄入量并未能达到推荐的日常摄入标准，因此，临界镁缺乏是非常普遍的。     

医学研究生遗传学实验改革实践

遗传学实验是医学研究生专业教育的重要组成部分。本次实验改革方案是在原有遗传学实验的基础上,遵循基础性、实用性、前沿性、创新性的一套综合性实验内容,让研究生在学习新技术的过程中,培养系统性的科学思维方式。     

肝豆状核变性中铜转运及其缺陷-ATP酶上铜结合域的特征

铜是构成多种酶成分所必需的一种微量元素，是维持生命所必需的。但铜过量对人体有很大的毒性。就有关正常铜吸收、细胞内转运及其毒性作一介绍。肝豆状核变性是一种遗传性的铜转运失调，引发铜在组织中的蓄积(如肝脏和脑)，从而导致进行性的肝脏和神经系统损害。肝豆状核变性致病基因编码是公认的铜转运P-型ATP酶。该酶最重要特征之一就是存在一个大的N-末端区域。该区域包括6个重要的铜结合基序，一般认为这些基序负责先结合铜然后使其通过膜。经克隆，表达并提纯了肝豆状核变性中ATP酶的N-末端区域(大约70kd)。该区域的金属结合特性显示出该结合蛋白可结合除铜之外的几种金属，但铜对此区域的亲和力较高。铜以一价形式结合于该区域，铜与蛋白结合比率为6．5：1。X线吸收光谱研究证明，铜结合于半胱氨酸残基上。园二色性光谱分析表明，铜结合于该区域时，其2级和3级结构变化。铜结合研究表明，在结合铜的过程中存在一定程度的协同性。这些研究和详细的铜结合域的结构信息在确定铜转运ATP酶在体内自身稳定调控作用和ATP酶基因突变阻断铜运输方面是极其重要的。     

肺癌相关miRNAs研究进展

肺癌的发生发展为复杂的多基因事件,microRNAs（miRNAs）参与其中并发挥重要作用。miR-NAs为一系列长约19-25nt的内源性非编码微小RNA,可抑制靶基因转录或蛋白翻译从而沉默靶基因的表达。部分miRNAs在肺癌组织中表达上调,并证明可负性调节抑癌基因。亦有部分miRNAs在肺癌组织中表达下调,被认为是抑癌基因且其中一部分也已得到证实,在临床潜在应用方面,目前研究证实miR-101可发挥放疗增敏效应,而miR-134、miR-379与miR-495或有助于指导肺癌化疗用药的选择。通过回顾最新文献,本文对肺癌高度相关的miRNAs及其靶基因进行了总结,并在生物学效应、潜在靶基因、基因诊断、治疗、预测预后等方面进行探讨。