高效液相色普法测定兔灌胃后血清中百草枯浓度及其变化特征

目的 探索建立高效液相色谱法（HPLC）在测定兔血清中百草枯浓度的可行性,并观察不同剂量 百草枯灌胃后兔血清浓度的经时变化情况。方法 12 只家兔按照随机数字表法分为两组,每组6 只,分别灌胃 给予100 mg/kg（高剂量组）和20 mg/kg（低剂量组）百草枯,于给药后1、2、5、12、24、48 及72 h 采集血 清,血清用乙腈直接沉淀蛋白处理后进行高效液相测定。色谱柱条件：流动相为0.1 mol/L 磷酸缓冲液（含 12.5 mmol/L 庚烷磺酸钠）- 乙腈（90 ︰ 10,TFA 调pH=2.8）,流速为1.0 ml/min,检测波长为258 nm,柱温为 30℃。结果 所建立的方法在0.2 ～ 100.0 mg/L 浓度范围内线性关系良好（r =0.999）。相对回收率在97.82% ～ 101.20% 之间,绝对回收率在84.37% ～ 88.80% 之间,日内和日间精密度（RSD）<5%。百草枯血药浓度时间 曲线为单峰,无论是高剂量组还是低剂量组,给药2 h 后其血清浓度达到峰值,之后逐渐下降,其中,高剂量组于 给药后72 h 后检测不出百草枯,低剂量组于药后24 h 检测不出百草枯。重复测量设计的方差分析结果显示, 不同时间点间、不同剂量组间的百草枯浓度及高、低剂量组随时间变化趋势差异有统计学意义。结论 所建 立的HPLC 方法可用于测定兔血清百草枯浓度,不同剂量百草枯兔灌胃后其血清浓度和蓄积的时间与剂量有 关,给药2 h 后血药浓度达峰值。