慢性束缚应激造模及观测高血糖相关指标的方法探索

目的 从束缚强度、高脂饮食、血糖测定等方面探索慢性束缚应激模型用于观测高血糖相关指标的方法。 方法 实验SD大鼠施加为期4个周期、每周期10 d、每天12 h的慢性束缚应激,喂饲普通或高脂饲料,并设高脂+链脲佐菌素(STZ)组、单纯高脂组和正常大鼠为对照。每个束缚周期结束后第3 d用针刺大鼠尾静脉取血,血糖仪监测各组大鼠血糖;最后一个束缚周期结束后第3 d处死大鼠,ELISA检测血清胰岛素、肾上腺素和皮质酮水平;胰腺行HE染色及胰岛素、胰高血糖素免疫组织化学检测。 结果 采用慢性束缚应激成功制备高血糖动物模型,成模率为32.5%;慢性束缚应激成模大鼠血清胰岛素水平高于3个对照组(P<0.05),而高脂+STZ组及单纯高脂饮食大鼠血清胰岛素水平与正常对照组比较差异无统计学意义;胰腺HE染色及免疫组化显示慢性束缚应激大鼠胰腺体积增大,胰岛素水平下降(P<0.05);高脂因素可引起胰岛素和胰高血糖素水平均下降(P<0.05);高脂+STZ大鼠胰岛严重破坏,未见胰岛素、胰高血糖素表达。各实验组大鼠血清肾上腺素、皮质酮水平与正常对照组比较差异均无统计学意义。 结论 在本实验造模条件下可成功制备慢性束缚应激高血糖大鼠模型,相关指标检测方法具有可靠性。     

18月龄与3月龄SD大鼠脑干Caspase-3阳性凋亡细胞的分布比较

目的 观察和比较老龄（18月龄）和年轻（3月龄）SD大鼠脑干Caspase-3阳性凋亡细胞的分布,研究脑干神经元在自然老化的过程中出现凋亡的分布规律。方法 将健康雄性SD大鼠分为18月龄与3月龄2组,每组3只,处死后取脑干部分行石蜡包埋和连续冠状面切片,片厚6 μm,每隔33张取一片,共取3套（每套30张）切片,分别行常规HE染色、免疫组织化学检测与TUNEL检测。并将获得的Caspase-3阳性结果标记到图谱上后进行三维合成。结果 与3月龄大鼠相比,18月龄大鼠脑干相关区域的Caspase-3阳性细胞数量更多、分布范围更广,尤其在孤束核和脑桥网状核增加明显。结论 随着大鼠年龄的增长,脑干发生细胞凋亡的区域增大、数量增多。