认识抗生素

自从上世纪40年代青霉素问世以来，抗生素就成了人类的救星，在各种常见细菌性疾病的治疗中．发挥了重要的作用。它的发现对人寿命的延长至少贡献了10岁．是大家公认20世纪最伟大的医学发现。     

转化生长因子β2在小鼠心脏近端流出道隔心肌化过程中的作用

目的利用Cx43基因剔除（KO）小鼠模型,观察TGFβ2在心脏流出道隔的表达,探讨Cx43基因剔除小鼠心脏流出道隔心肌化异常与TGFβ2的关系;采用胚心脏体外培养技术,研究外源性TGFβ2是否促进流出道隔心肌化过程.方法选用胚E12.5～E15.5 d的Cx43基因剔除纯合型（Cx43-/-）、杂合型（Cx43＋/-）及野生型（Cx43＋/＋）C57/BL6小鼠作为研究对象,采用PCR方法鉴定基因型,免疫组织化学法测定TGFβ2;选用野生型E12.5进行胚心脏体外培养至E15.5,同时加用TGβ2不同剂量干预处理,免疫组织化学法测定肌节肌动蛋白α-SCA的表达.结果 Cx43 KO小鼠胚期心脏近端流出道隔心肌细胞明显减少,尤其以E13.5和E14.5的Cx43-/-小鼠为著.与Cx43＋/＋小鼠对照,Cx43-/-小鼠心脏近端流出道隔TGFβ2的表达明显降低,以E14.5较为显著;E14.5的Cx43＋/-小鼠表达也有降低.然而TGFβ2不同剂量干预组均没有见到明显的促进离体心脏心肌化的作用.结论 Cx43 KO小鼠心脏近端流出道隔存在明显的心肌化延迟.TGFβ2表达减少可能参与了Cx43-/-小鼠心肌化异常的发病机制.体外应用TGFβ2可能难以模拟在体的时空表达模式,或者心肌化的进行需要精确的TGFβ2的剂量和严格的培养条件.     

双荧光逆向追踪法研究大鼠视网膜节细胞的中枢投射

目的：观察向上丘投射的大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)在视网膜内的分布、密度及细胞类型上的差异。方法：将 DiI 与荧光金(FG)注射入 SD 大鼠的同侧和(或)对侧上丘,不同时相荧光显微镜下观察两种荧光标记 RGCs 的分布情况。结果：视网膜与视神经内均可见荧光标记；视网膜内标记 RGCs 的数目随时间延长略有增加。DiI 与 FG 的标记效率无明显差异；RGCs 大多数为对侧投射；视网膜颞背侧区域可见双侧投射细胞；视网膜颞腹侧周边区集中存在同侧投射细胞,多数胞体较大；视网膜其它区域可见零星同侧投射细胞。结论：DiI 与 FG 可高效率逆行标记 RGCs 及部分突起；SD 大鼠视网膜内并存着向对侧、双侧及同侧脑区投射的 RGCs,后二者数量较少,分布局限；同侧投射以大胞体细胞为多。     

感光细胞缺失对视网膜节细胞melanopsin表达的影响

目的：研究感光细胞缺失对视网膜节细胞 melanopsin 表达的影响。方法：SD 大鼠腹腔注射60 mg/kg N- 甲基-N-亚硝基脲建立感光细胞变性缺失的动物模型,用免疫荧光方法观察视网膜铺片及切片中 melanopsin 阳性细胞的分布及特征。结果：在药物注射12 h 后动物视网膜感光细胞层开始凋亡,细胞数目随时相减少,13 d 后完全消失。在正视网膜节细胞表达 melanopsin,呈串珠样分布在胞体及突起的胞膜上,其树突穿过节细胞层, 在内网层的两侧分叉形成网状结构。在感光细胞缺失动物模型组,12 h 时,节细胞表达 melanopsin 更广泛；而后突起上的 melanopsin 表达随时减少。28 d 时,melanopsin 的表达主要局限于节细胞的胞体。结论：感光细胞缺失影响节细胞突起 melanopsin 的表达。     

bFGF诱导人胚视网膜色素上皮细胞转分化的研究

目的 探讨bFGF体外诱导早期人胚视网膜色素上皮（RPE）细胞转分化现象及其分子机制,为视网膜发育的进一步基础研究和临床RPE细胞移植奠定基础.方法 取4～6代人胚（6 w～10 w）RPE细胞,bFGF（20 ng/ml）诱导培养（4 d～6 d）后观察RPE细胞形态学的改变,用免疫细胞化学作转分化RPE细胞鉴定.RT-PCR分析转分化RPE细胞小眼畸形基因（MITF）的表达.结果 bFGF诱导培养后的人胚RPE细胞呈现类神经样细胞表型,不仅表达自身上皮细胞标记物角蛋白（Keratin）,同时还表达多种神经视网膜上皮细胞标记物（MAP2、GS、GFAP、Peripherin、Opsin,但不表达NCAM）;用RT-PCR方法没有检测到转分化RPE细胞MITF-A mRNA表达.结论 早期人胚RPE细胞的发育具有一定的可塑性,bFGF可以诱导早期人胚RPE细胞表达多种神经视网膜上皮细胞标记物,可能是通过抑制MITF-A的分子信号通路.     

视网膜祖细胞干细胞特性及移植入视网膜后的研究

目的：研究视网膜祖细胞的干细胞特性及移植入视网膜后的存活和迁移。方法：体外培养胎龄18d 大鼠的视网膜细胞,用 RT-PCR、细胞免疫荧光方法鉴定其增殖分化；成年 SD 大鼠腹腔注射 N-甲基-N-亚硝基脲形成视网膜感光细胞退化的动物模型,培养的视网膜祖细胞用 CM-Di(?) 标记后,移植入模型鼠的玻璃体腔。结果：视网膜祖细胞体外表达中间神经丝蛋白 nestin；表达 Flk-1、Pax6及 Notchl 的 mRNA；能掺入 BrdU；分化后表达视网膜各类细胞特异性蛋白；移植后在实验组大鼠视网膜能存活及迁移,而在对照组中仅聚集在玻璃体腔。结论：视网膜祖细胞具有干细胞特性,移植入受损伤视网膜后,能存活、整合及迁移。     

视网膜细胞培养上清液对骨髓基质细胞的诱导分化作用

目的探讨视网膜细胞培养上清液对骨髓基质细胞(BMSCs)的诱导分化作用。方法原代培养胚龄17d(E17)及生后3d(P3)SD大鼠的视网膜细胞,分别收集培养上清液,过滤后与DMEM按2:3混合,用此混合液诱导BMSCs,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,对诱导后的细胞进行神经丝蛋白(NF)、胶质源性纤维酸性蛋白(GFAP)及视网膜特异性标记物进行免疫化学染色,统计分析阳性细胞数;再用RT-PCR进一步检测诱导结果。结果E17和P3细胞上清液均能诱导BMSCs表达NF[(10.35±2.66)%,(10.64±3.94)%]和GFAP[(27.86±7.97)%,(24.38±5.80)%],但只有P3细胞上清液诱导的BMSCs表达视蛋白(opsin),同时RT-PCR也检测到视细胞发育调节转录因子Crx mRNA的表达。结论视网膜细胞培养上清液可以诱导BMSCs向神经元、胶质细胞与视细胞分化。     

灌肠合剂的药效学试验

目的:研究灌肠合剂抗炎、解热及促进大肠运动和直肠蠕动等作用。方法:灌肠合剂生药剂量为9.36g/kg(大剂量)和3.12g/kg(小剂量),相当于临床用药的6.9倍和2.3倍。阳性对照药为导便栓,阴性对照品为蒸馏水,其中抗炎试验未设阳性对照。结果:直肠给药,灌肠合剂对鸡蛋清致大鼠足跖肿胀有抑制作用,大剂量组与蒸馏水组比较有显著性差异(P<0.01);能抑制大肠杆菌内毒素致家兔体温升高,受试组与蒸馏水对照组比较有显著差异(P<0.05和P<0.01);能增强大鼠和家兔的大肠运动,给药后粪便排泄量增加,墨汁推进距离延长,受试组与蒸馏水对照组比较有显著差异(P<0.05和P<0.01)。结论:经直肠给药灌肠合剂有抗炎、解热、增强大肠运动和直肠蠕动作用。     

妊娠糖尿病规范化治疗与妊娠结局的临床分析

目的观察妊娠糖尿病患者经规范化治疗后母婴患病率及不同血糖水平对妊娠结局的影响。方法对86例妊娠糖尿病患者采用规范化治疗后，分析其妊娠结局。结果妊娠糖尿病规范化治疗后与正常孕妇母婴患病率无显著性差异：空腹血糖在4．0～4．8mmol／L，餐后2h血糖在4．8-7．0mmol／L，糖化血红蛋白在5％～6．2％范围内妊娠糖尿病患者母婴患病率最低。结论妊娠糖尿病经规范化治疗能减少母婴并发症，妊娠结局与血糖及糖化血红蛋白水平密切相关。