2003-2008年我国实验猴BV抗体检测结果及抗体水平变化规律的分析

目的 对近年来我国实验猴BV(猴疱疹病毒Ⅰ型)抗体检测结果进行比较分析,以了解我国实验猴BV感染情况及其抗体水平变化规律,为我国实验猴质量控制及标准化提供依据.方法 根据国标中ELISA方法,对2003～2008年我国11个单位送检的2个品种猴血清进行BV抗体检测,并对检测结果进行统计分析.结果 检测的4612份猴血清中,有1843份BV抗体呈阳性,阳性率为39.96%;6年中检测猴群BV抗体阳性率基本在30%～50%.幼年(≤2岁)、青年(2.1～4.0岁)、成年(4.1～6.5岁)、老年(≥6.5岁)4个不同年龄段猴BV感染率分别为26.28%、31.53%、53.74%、87.27%.不同年龄感染率差异显著(P＜0.01).雌猴BV感染率(35.91%)高于雄猴(34.93%),但两者差异不显著(P＞0.05).结论 不同年龄猴BV感染率不同,随着年龄的增长BV感染率升高.     

犬瘟热病毒（CDV）ELISA检测方法的建立与应用

目的 建立犬CDV抗体ELISA检测方法.方法培养vero细胞,接种CDV病毒,制备vero正常抗原和CDV特异抗原,滴定酶结合物和抗原最佳工作浓度,并进行精密性、敏感性、稳定性、特异性实验.结果正常、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为1∶32 000、10 μg/mL和1∶8 000;正常、特异抗原批内变异系数分别为9.1%和5.8%,批间平均变异系数分别为8.8%和6.6%;检测灵敏度为1∶2 560;与犬细小病毒(CPV)、犬肝炎病毒(ICHV)均无交叉反应.稳定性试验相对偏差小于25%.结论建立的ELISA方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强.可用于犬CDV抗体的检测.     

应用脾内直接免疫法制备鼠痘病毒单克隆抗体

复制大鼠肝热缺血模型即使其处于肝全血阻断２５ｍｉｎ。复流１０ｍｉｎ后测定其血清中７种生化酶活性，并与无因损伤的对照组大鼠比较，发现肝热缺血损伤后，血清丙氨酸氨酸（ＡＬＴ）、天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）、磷酸肌酸激活酶（ＣＫ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和α－羟丁酸氢酶（α－ＨＢＤ）活性均极显著升高（均Ｐ〈０．０１），碱性磷酸酶（ＡＬＰ）明显上升（Ｐ〈０．０５０，酸性磷酸酶（ＡＣＰ）无明显变化（Ｐ〉０．０５）     

检测大鼠细小病毒抗体的ELISA、IEA和HI法比较

对检测大鼠细小病毒(RV株)抗体的ELISA、IEA和HI三种方法作了比较。ELISA、IEA和HI法的重复性分别为92.5％、88.2％和68.6％。经对同一批血清检品的检测,ELISA法IEA和检测结果的符合率为90.5％,抗体阳性检出率均为81％,而HI与前两法的符合率均仅为69％,抗体阳性检出率为69％。以上结果表明:ELISA和IEA法在重复性和抗体阳性检出率方面均优于HI(P<0.05)。经ELISA法检测,普通级大鼠中RV抗体阳性率达59％,而在清洁级大鼠中仅为7％。     

兔出血症病毒抗体的实验室检测能力验证结果评价

【摘要】 目的 通过兔出血症病毒抗体检测能力验证计划,了解实验动物检测机构检验能力,提高实验动物质量检测水平。方法 按照CNAS批准的能力验证方案,通过筛选血清制备样品,经过稳定性和均匀性检验合格,作为能力验证样品。采用随机编号,发样给参加单位,并附作业指导书。在规定时限提交检验报告和原始记录复印件,其结果与样品预检结果一致的判为满意结果,不一致或未能提交结果的判为不满意结果。结果 来自14个省市自治区的20个实验室报名参加本次比对实验,均在规定时间内反馈了检测结果,17个实验室检测结果为合格或优秀,占参加比对实验室的85%。在20个实验室中,14个实验室采用了酶联免疫吸附实验（ELISA）方法,6个实验室采用血凝抑制实验（HAI）方法。结论 全国各实验动物检测机构兔出血症病毒抗体总体检测能力较高,实施能力验证计划能够反映实验室的检测水平。     

鼠肺支原体单克隆抗体的研究

通过杂交瘤技术建立了３株抗鼠肺支原体单克隆抗体细胞株，它们分别是ＢＡ１１，ＢＤ７和Ｂ６１２．试验表明：３株细胞所分泌的抗体均属ＩｇＧ１亚类，都是鼠肺支原体的特异性抗体，与多种其它支原体无交叉反应。     

弓形虫McAb的制备和鉴定

弓形虫是一种人兽共患病的病原寄生虫,是一级实验动物必须检测的项目之一。目前最常用的检查方法是检测血清抗体。抗原检查应该是最直接、直观的手段,但是直接涂片、饱和盐水漂浮和动物接种等方法或检出率低或步骤繁琐。制备制异性的ＭｃＡｂ,用于弓形虫抗原检测是这个研究的出发点。我们通过小鼠腹腔繁殖弓形虫速殖子,利用Ｇ２砂蕊漏斗过滤,提纯速殖子,反复冻融及超声波粉碎,制备可溶性抗原。常规方法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,免疫剂量为１００μｇ／只,取免疫后小鼠脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合,间接ＥＬＩＳＡ法筛选,有限稀…     

鸡胚致死孤儿病毒和鸡减蛋综合症病毒多重PCR检测方法的建立及初步应用

目的 建立鸡胚致死孤儿病毒(CELO)和鸡减蛋综合症病毒(EDS)的多重PCR检测方法并进行初步应用.方法 参照GenBank提供的基因序列,设计了2对特异性引物分别扩增CELO长纤突蛋白和EDS六邻体蛋白的基因序列,建立检测CELO和EDS的多重PCR方法,考察该方法的特异性和敏感性,并使用该方法检测流感疫苗主种子批病毒是否存在外源性禽腺病毒的污染.结果 该多重PCR方法成功扩增得到了两条特异性目的条带,并经测序验证.该方法特异性好,灵敏度显示核酸最低检测量可达10^-4μg/mL.使用该方法检测12批次流感疫苗主种子批病毒,外源性禽腺病毒的检测结果均为阴性.结论 成功建立鸡胚致死孤儿病毒和鸡减蛋综合症病毒的多重PCR检测方法,灵敏度高,特异性好.在流感疫苗主种子批病毒的外源性禽腺病毒的检测中具有很高的使用价值和应用前景.     

活疫苗及其生产基质中Sendai病毒RT-PCR检测方法的研究

对我国六个主要单位饲养的KM小鼠的体重及10种脏器重量进行测定,并计算其脏器重量系数。结果显示,六个KM小鼠群体间体重及10种脏器重量均有差异（P＜0．05）,在屏障环境下饲养的KM小鼠群体的体生长及大部分脏器发育比较快;而脾脏和肾上腺发育显得较为缓慢,与其它5个群体相比存在极显著性差异。作者认为,加速我国KM小鼠的标准化研究迫在眉睫。     

兔出血症病毒（RHDV）McAb的研制及初步应用

用酒石酸钾-甘油梯度离心纯化的RHDV抗原免疫BALB／C小鼠．取脾细胞与SP2／0融合，获得4株稳定分泌RHDV McAb的杂交瘤细胞株(1F7，1H4，2A9．2D6)。经检测，所分泌的抗体亚类分别为IgG 2a(1F7．1H4，2D6)和IgG1(2A9)。应用双抗体夹心ELISA法检测70份标本，并与直接免疫荧光法和HA法比较．取得较好的实验结果。