黄芪对感染病毒大鼠心肌细胞L型钙通道的效应

目的:了解黄芪对感染柯萨奇病毒心肌细胞 L 型钙通道的影响,以探讨黄芪用于心肌炎治疗的作用机制。方法:以柯萨奇 B_3病毒感染急性分离的成年大鼠心肌细胞,利用膜片钳技术记录 L 型钙通道电流。结果:黄芪不影响正常心肌细胞 L 型钙通道电流的幅度,但可减缓 L 型钙通道电流的衰减。病毒感染增加心肌细胞 L 型钙通道电流的幅度,并改变其电压依赖性而使电流电压曲线向左下偏移。黄芪可抑制病毒感染细胞 L 型钙通道电流的增加。结论:黄芪通过抑制感染细胞经 L 型钙通道的跨膜钙内流和稳定 L 型钙通道的作用,可防止病毒感染可能导致的细胞内钙超载和异常电活动,从而对感染细胞起到保护作用     

大鼠心肌细胞L型和T型钙通道的特性

目的研究大鼠心肌细胞Ｌ型和Ｔ型钙通道的特性。方法参照Ｈａｍｉｌ法记录全细胞跨膜钙电流。结果Ｔ型和Ｌ型钙通道可并存于大鼠心肌细胞膜上。Ｔ型钙通道激活电压在－７０～－６０ｍＶ，持续时间在２０～３０ｍｓ，电流幅度较小；Ｌ型钙通道激活电压在－３０～－２０ｍＶ，持续时间在１５０～２００ｍｓ，电流幅度较大。在细胞外钙离子浓度为０．５、２和１０ｍｍｏｌ／Ｌ时，Ｌ型钙通道的平均电流分别为（１．４３±０．３６）、（１．９６±０．３９）和（４．１３±０．７５）ｐＡ／ｐＦ；峰电流分别为（５．５０±１．５８）、（８．１７±２．１４）和（１３．６３±３．５９）ｐＡ／ｐＦ；电流幅度随时间变化可分为无明显衰减、缓慢衰减和快速衰减３种方式。与豚鼠心肌细胞相比，大鼠心肌细胞对钙通道特异性阻断剂相对不敏感。结论Ｌ型钙通道是大鼠心肌细胞膜上的主要电压依赖性钙通道，而Ｔ型钙通道在心室肌细胞上不起主要作用。     

柯萨奇B3病毒对心肌细胞钙平衡的影响

目的 探讨柯萨奇Ｂ３病毒（Ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓ Ｂ３,ＣＶＢ３）对膜离子通道及离子交换载体的影响,了解病毒感染导致细胞内钙超载的原因。方法 酶灌注法获得单个心肌细胞后用光聚焦显微镜和钙离子荧光探针（Ｆｌｕｏ ３／ＡＭ）检测ＣＶＢ３感染对心肌细胞内游离钙离子浓度的影响及利用模片钳全细胞电流记录技术观察ＣＶＢ３对Ｌ型钙通道电流,钠通道电流和钠钙交换电流的影响。结果 ＣＶＢ３感染使细胞内的游离钙     

Effects of taurine on L-type voltage-dependent Ca~(2 ) channel in rat cardiomyocytes infected with coxsackievirus B_3

目的：观察牛磺酸对正常和感染柯萨奇Ｂ３病毒大鼠心肌细胞Ｌ型钙通道的影响．方法：用膜片箝技术记录经Ｌ型钙通道的Ｃａ２＋电流．结果：正常心肌细胞Ｌ型钙通道的Ｃａ２＋电流密度为４１±０８ｐＡ／ｐＦ，柯萨奇Ｂ３病毒感染后Ｃａ２＋电流密度增加到４９±１４ｐＡ／ｐＦ．牛磺酸１６ｍｍｏｌ·Ｌ－１不仅使正常心肌细胞Ｌ型钙通道的Ｃａ２＋电流密度降为３５±０５ｐＡ／ｐＦ，也使感染柯萨奇Ｂ３病毒后心肌细胞的Ｃａ２＋电流密度降为３８±０８ｐＡ／ｐＦ．柯萨奇Ｂ３病毒感染使引起最大Ｃａ２＋电流的膜电压（Ｖｐ）由８±８ｍＶ减为５±３ｍＶ，牛磺酸可使降低的Ｖｐ恢复到８±４ｍＶ．结论：牛磺酸抑制柯萨奇Ｂ３病毒感染引起的Ｃａ２＋电流的增加，并使因感染而降低的引起最大Ｃａ２＋电流的膜电压正常化．牛磺酸对Ｌ型钙通道的影响是牛磺酸减轻病毒感染引起的细胞内Ｃａ２＋增加和异常电活动的机制之一．     

牛磺酸对感染柯萨奇B3病毒大鼠心肌细胞L型电压依赖性钙通道的影响

AIM: To study the effects of taurine on L-type voltage-dependent Ca2+ channel (VDCC) in adult rat cardiomyocytes infected with coxsackievirus B3 (CVB3). METHODS: Whole-cell Ca2+ current of L-type VDCC was obtained by patch-clamp techniques. RESULTS: The density of L-type Ca2+ current was 4.1 +/- 0.8 pA/pF in normal cardiomyocytes, but increased to 4.9 +/- 1.4 pA/pF with CVB3 infection. At 16 mmol.L-1, taurine decreased the density to 3.5 +/- 0.5 pA/pF in normal cardiomyocytes, and to 3.8 +/- 0.8 pA/pF in CVB3-infected cardiomyocytes. In addition, CVB3 shifted the membrane potential depolarizing to peak current (Vp) from 8 +/- 8 mV to 5 +/- 3 mV which could also be reverted to 8 +/- 4 mV by taurine. CONCLUSION: Taurine inhibited the increase of Ca2+ inflow through L-type VDCC and normalized the decreased Vp induced by CVB3 infection. The effect of taurine on L-type VDCC was the mechanism of taurine attenuating the intracellular Ca2+ accumulation and abnormal electric activities induced by CVB3 infection.     

心肌细胞感染病毒后钙、钾通道电流及其表达改变和牛磺酸的作用

目的 观察心肌细胞感染病毒后心肌细胞钙，钾通道电流及通道表达改变和牛磺酸的作用。方法 （1）体外心肌细胞感染病毒；用胰蛋白酶和胶原酶消化法分别获得大鼠，乳鼠培养和分离的心肌细胞并感染柯萨奇B3病毒，用于检测Ca^2 跨膜内流，电压依赖性钙通道电流（Lca)和外向钾通道电流（Iout)。（2）在体小鼠感染病毒；BALB/c小鼠腹腔内注射柯萨奇B3病毒7d后取出心脏用于检测电压堆呀性钙通道α1亚单位抗原和电压调控性钾通道（Kv)mRNA的表达。相应各组加入不同剂量的牛磺酸并观察其作用。结果 （1）感染柯萨奇B3病毒后Ca^2 跨膜内流量及Ica增加，牛磺酸对其有抑制作用。（3）柯萨奇B3病毒感染out明显增大。牛磺酸可使病毒感染后的Iout趋于恢复正常。（3）柯萨奇B3病毒感染后小鼠心肌出现强电压依赖性钙通道α1亚基抗原阳性信号。Kv1.2,Kv2.1,Kv4.2mRNA与3种探针的杂交信号亦明显增强，牛磺酸可使增强的阳性信号减弱。结论 柯萨奇B3病毒感染后心肌细胞钙，钾离子通道电流及表达均增加，牛磺酸可通过抑制其改变而发挥对感染病毒心肌细胞的保护作用。     

EFFECT OF COXSACKIEVIRUS B3 ON ION CHANNEL CURRENTS IN RAT VENTRICULAR MYOCYTES

Objective. To investigate the effects of coxsackievirus B3 ( CVB3 ) on ion channel currents in rat ventricular my-ocytes. Methods. Rat hearts were isolated with collagenase to acquire single ventricular myocytes, L-type voltage-depen-dent calcium channel( VDCC) current (ICa),Na^ current (INa), outward potassium current (Iout), inwardly rectifying potassium current(IKI) were recorded using whole cell patch clamp techniques. Results. CVB3 infection increased Ica and Iout, while decreased IKI; but it had no obvious effect on INa. Conclusion. The effects of CVB3 on ICa,Iout, IKI may be one of the mechanisms of myocytes damage and the oc-currence of abnormal electroactivities induced by CVB3 infection.     

黄芪对感染病毒大鼠心肌细胞钙通道及钠钙交换载体的效应

目的与方法；以柯萨奇Ｂ３病毒感染急性分离的成年大鼠心肌细胞，利用膜片和记录技术了解黄芪对感染柯萨奇病毒后心肌细胞Ｌ型钙通道及钠钙交换载体的影响，以探讨黄芪用于心肌炎治疗的作用机制，结果：黄芪不影响正常心肌细胞Ｌ型钙通道电流的幅度，但可缓缓Ｌ型钙通道电流的衰减。黄芪也不影响内向ＮＣＥ电流，但使外向ＮＣＥ电流增加，从而使动作电位期间由ＮＣＥ转运人细胞内的钙离子增加。病毒感洒增加心肌细胞Ｌ型钙通道电流的