大鼠胚胎来源肝干细胞分离纯化方法的比较

目的 观察比较机械分离法和酶消化法分离纯化孕鼠胚胎来源肝干细胞的优劣.方法 取孕13.5 d SD大鼠胚胎肝后分别用机械分离法和酶消化法分离纯化肝干细胞,比较两种方法所得细胞总量和存活率的差异,用免疫荧光染色法鉴定细胞,并比较原代培养前后肝干细胞存活率的变化.结果两种方法分离培养出的细胞形似卵圆形,经免疫荧光染色法检测表达干细胞标志物CD34和胆管细胞标志物CK19,机械分离法分离的肝干细胞数量(57.49±14.25)×106与酶消化法(63.36±12.67)× 106相当,两者比较差异无统计学意义(P>0.05),但机械分离法所得肝干细胞的存活率(96.37±0.82)%高于酶消化法(93.53±0.63)%(P<0.05),并且培养前后细胞存活率也明显高于酶消化法,两两比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 机械分离法是一种简单、经济、实用的胚胎来源肝干细胞分离纯化方法.     

维生素D受体基因TaqⅠ和ApaⅠ位点单核苷酸多态性与特发性低枸橼酸尿症关系的研究

目的：探讨维生素D受体（VDR）基因TaqⅠ和ApaⅠ位点单核苷酸多态性与特发性低枸橼酸尿症的关系及其临床意义。方法：实验筛选出无特发性低枸橼酸尿症者50名及特发性低枸橼酸尿症患者21名．通过PCR—RFLP技术检测VDR基因TaqⅠ及ApaⅠ位点单核苷酸多态性，并分析其与特发性低枸橼酸尿症之间的相关性。结果：两组间VDR基因ApaⅠ位点各基因型频率差异无统计学意义（P〉0．05）；而TaqⅠ各基因型频牢差异有统计学意义（P〈0．05）．在特发性低枸橼酸尿症患者组中TT型较为多见。且两组人群中基因型为TT者21h尿枸橼酸含量明显低于同组的其他基因型（P〈0．05）。结论1特发性低枸橼酸尿症与VDR—TaqⅠ单核降酸多态性间存在遗传相关性，而与VDR ApaⅠ单核苷酸多态性关系不明显。VDR基因TaqⅠ位点的TT型基因有望成为特发性低枸橼酸尿症的遗传标志基因。