实时荧光定量TaqMan-PCR检测小鼠多瘤病毒方法的建立

目的 建立一种快速、特异、敏感的小鼠多瘤病毒 (murine polyomavirus, MPyV)荧光定量 TaqMan PCR检测方法, 用于MPyV核酸的检测。 方法 根据GenBank中小鼠多瘤病毒基因组序列设计了一对特异性引物及TaqMan探针, 扩增长度为69 bp的片段, 通过优化反应体系和反应条件, 对构建的重组质粒标准品进行检测, 并绘制标准曲线, 进行特异性、敏感性和重复性试验。最后用建立的方法对人工感染MPyV的肺脏、脾脏和粪便, 及86 份小鼠临床样本进行检测, 验证在临床应用中的效果。 结果 所建立的检测方法特异性强, 只能在小鼠多瘤病毒DNA中检出荧光信号, 检测灵敏度达到100拷贝, 批内和批间重复性好, 检测结果变异系数(CV)均小于1.13%, 人工感染MPyV小鼠的肺脏、脾脏和粪便均为阳性, 对86份临床样本进行检测, 有3份样本呈阳性(阳性率为3.5%)。 结论 建立的MPyV荧光定量TaqMan-PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好, 适合用于MPyV临床诊断、日常监测和流行病学调查。     

银汞局部过敏性反应1例

患者男,48岁。口腔科医生,有高血压史,于1994年4月始,发现双手指皮肤粗糙皲裂,夜间有烧灼疼痛感,自用护肤药膏3日后,表皮脱落,指肤潮红,肿胀、疼痛递增,经皮肤科对症治疗60余天后,病情加重影响工作,遂离岗休息俭查:血压23.4/14.3kpa,心电图提示左心室稍肥大改变,血汞含量正常,其他各项检查均正常。休息一周后皮损痊愈。上班接触银汞,病情复发,症状同前,后因公外出数天,又告愈。