含Cremophor RH40的自微乳化给药系统对大鼠体内CYP3A酶的抑制作用

［摘要］目的考察包含表面活性剂Cremophor RH40的自微乳化给药系统（SMEDDS）对大鼠体内细胞色素P450（CYP3A)活性的影响。方法以咪达唑仑（MDZ）为模型药物,采用高效液相色谱（HPLC）法测定MDZ及其活性代谢物1’ 羟基咪达唑仑在大鼠体内的血药浓度,并计算其药动学参数,考察MDZ自乳化微乳对大鼠体内CYP3A活性的影响,同时采用蛋白免疫印迹法检测上述制剂对大鼠肠黏膜上CYP3A蛋白表达的影响。 结果MDZ微乳的口服生物利用度为MDZ片 的3.14倍,且显著降低1′ 羟基咪达唑仑与咪达唑仑血浆浓度 时间曲线下面积（AUC）0 ∞的比值（由0.25减少到0.11,P＜0.05）;MDZ自微乳化制剂还可显著延长MDZ在体内的平均滞留时间（MRT）及半衰期（t1/2）［MRT由（0.63±0.13） h延长至（1.23±0.38） h; t1/2由（0.33±0.11） h 延长至（0.65±0.25） h, P＜0.05］;相对于MDZ片,SMEDDS口服给药后,肠道CYP3A的蛋白表达水平显著降低。结论含有Cremophor RH40的SMEDDS能抑制大鼠体内CYP3A的代谢,从而提高CYP3A底物药物的口服生物利用度。     

HPLC与比色法测定复方黄芪注射液中总皂苷与黄芪甲苷含量

目的:建立复方黄芪注射液中黄芪总皂苷与黄芪甲苷含量的测定方法。方法:黄芪总皂苷采用比色法(540nm,722型分光光度计);黄芪甲苷采用 HPLC—ELSD 法,Novapark~(?)C_(18)(3.9*150mm,4μm)色谱柱,流动相为乙腈—水(36:64),流速为1ml/min,柱温30℃,ELSD 参数:移管温度为105℃,气体流量1.50SLPM。结果:总皂苷平均回收率为100.64％,RSD 为1.74％;黄芪甲苷平均回收率为99.62％,RSD 为1.57％。结论:方法简便、快捷、准确、可靠,可用于复方黄芪注射液的质量控制。     

小叶莲中graphislactone A的分离制备及其抗肿瘤作用机制研究

目的确定小叶莲中graphislactone A的制备分离方法;探讨graphislactone A诱导人乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR凋亡的作用机制。方法小叶莲药材采用醋酸乙酯超声提取,提取物经过硅胶柱色谱法富集目标成分,再用重结晶法纯化。采用MTT法检测graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR的细胞毒活性。采用流式细胞术、RT-PCR技术和Western blotting法分别检测graphislactone A对乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR凋亡、凋亡相关基因及P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达的影响。结果建立了小叶莲中graphislactone A的制备分离方法。Graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR具有细胞毒活性,IC50值分别为2.38、9.35μmol/L,且能够上调乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中p53、bax、caspase-3基因的表达,下调bcl-2基因和P-gp的蛋白表达。结论 Graphislactone A为首次从高等植物中发现的酚类化合物,该制备分离方法效率高、样品回收率高,得到的目标成分纯度高。与阳性药依托泊苷相比,Graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR具有较强的细胞毒活性,且能够诱导其凋亡,其机制可能与p53的表达水平上调、激活caspase-3通路、调节bax和bcl-2的相对比例,下调P-gp的蛋白表达有关。     

盐酸小檗碱自微乳释药系统的制备与体外评价

目的:研究盐酸小檗碱自微乳释药系统的制备工艺,并对其进行表征和体外释放行为考察。方法:通过溶解度试验、自乳化效率试验及伪三元相图对盐酸小檗碱自微乳进行处方筛选。以粒径和载药量为考察指标,采用星点设计-效应面优化法对盐酸小檗碱自微乳处方进行优化并验证。结果:盐酸小檗碱自微乳最优处方为中链甘油三酯(MCT)∶RH40∶聚乙二醇400的质量比为23.29%∶54.08%∶22.63%,载药量为95 mg/g,平均粒径为58 nm。盐酸小檗碱自微乳在人工肠液中,2 h内累积释放度90%。结论:盐酸小檗碱自微乳制备工艺简单,有效改善了盐酸小檗碱的溶出速度。     

伊曲康唑Pluronic P123聚合物胶束的制备工艺研究

 目的 制备Pluronic P123为载体的伊曲康唑胶束给药系统。方法 采用薄膜水化法制备载药胶束,考察处方因素及工艺条件对载药共聚物胶束的包封率及载药量的影响,并采用三因素、五水平的星点设计-效应面法优化处方。动态光散射法测定胶束粒径,并对载药胶束的体外溶出度进行了测定,HPLC 法测定胶束的载药量和包封率。结果 制得的载药胶束包封率为60.23%,载药量为1.12%,粒径为30～40 nm。载药胶束在模拟的人工胃液和人工肠液中都可以快速溶出,但市售SporanoxTM胶囊的溶出行为却与溶出介质相关。结论 本实验制备以Pluronic P123为载体的伊曲康唑胶束给药系统工艺简单可行,为其进一步研究奠定了基础。     

姜黄素自微乳化释药系统的制备与评价

目的研制姜黄素自微乳化释药系统(Cur-SMEDDS)并对其理化性能、稳定性等进行评价。方法通过溶解度实验和伪三元相图筛选SMEDDS组分;采用星点设计和效应面法优化处方研制Cur-SMEDDS,并对其形态、粒径、理化参数及稳定性进行考察。结果优化后Cur-SMEDDS的处方为油相MCT∶乳化剂Cremophor RH40∶助乳化剂甘油=22.5∶49.3∶28.2,其平均载药量为1.0%,澄清度好,微乳粒子形态主要为圆球形,平均粒径为40.83 nm,稳定性良好。结论所制制剂理化性质稳定,制备工艺简单,质量稳定,容易控制。     

F127/SWCNTs对P-gp底物在大鼠小肠吸收影响的研究

目的：考察3种F127/SWCNTs载体系统的稳定性及对小肠P-糖蛋白（P-gp）药泵的抑制作用。方法：将F127/SWCNTs稀释至不同浓度后于4℃放置15 d，检测CNTs含量、粒径、Zeta电位等参数的变化；采用大鼠在体单向灌流模型进行肠吸收试验，以P-gp特异性底物罗丹明123（R-123）大鼠回肠段的吸收速率常数（K_a）和表观渗透系数（P_app）为考察指标，评价F127/SWCNTs对R-123肠吸收的影响。结果：储存稳定性和稀释稳定性均表明其中F127/SWCNT-COOH与F127/SWCNT-OH在15 d内4℃放置稳定性良好，无明显沉淀析出，粒径和含量稳定。3种F127/SWCNTs均可在不同程度增加R-123在回肠段的吸收，且具有浓度依赖性。结论：F127/SWCNTs可能通过抑制P-gp药泵作用改善P-gp底物药物的口服生物利用度，为药物特异性口服应用创造独特机会。