热休克蛋白70诱导抗肿瘤免疫的机制研究

目的　研究肿瘤热休克蛋白 70 (HSP70 )诱导的抗肿瘤免疫产生的机制。方法　用液相色谱法提纯小鼠肿瘤细胞株中的HSP70。通过动物实验观察HSP70的抗肿瘤作用 ,并用流式细胞技术测定HSP70免疫后小鼠外周血中T细胞亚群的变化。用ELISA法测定HSP70免疫后小鼠体内细胞因子的水平。结果　用HSP70免疫后 ,小鼠外周血中CD8+T细胞及几种主要Th1型细胞因子 (IL 2、TNF α、TNF β和IFN γ)均升高 ,与对照组相比较 ,差异显著 (P <0 .0 1)。结论　HSP70免疫后 ,小鼠外周血中CD8+ T细胞及Th1型细胞因子均有明显升高。此作用可能是其诱导特异性抗肿瘤免疫的重要机制     

肿瘤热休克蛋白70-多肽复合物诱导特异性细胞毒T淋巴细胞产生的实验研究

目的　研究肿瘤细胞的热休克蛋白 70多肽复合物 (heatshockprotein 70peptide complexes ,HSP PC70 )诱导活化肿瘤特异性细胞毒T淋巴细胞 (cytotoxicTlymphocytes,CTL)的作用及该CTL的杀瘤效应。方法　利用细胞培养 ,流式细胞技术 ,蛋白质的分离纯化技术 ,电泳技术 ,Western blot检测方法 ,T淋巴细胞的诱导及体外扩增 ,酶标技术等 ,测定肿瘤HSP70 多肽复合物诱导活化小鼠体内CTL产生的作用。结果　HcaF细胞HSP PC70的自然表达率为 6 3.5 % ,热诱导后为 75 .5 % ;HcaF细胞的HSP PC70能够诱导活化肿瘤特异性的CTL ,该CTL在效靶比例为 5 0∶1、2 5∶1、12 .5∶1时于体外对HcaF细胞的杀伤效率分别为 84.2 %± 3.2 %、47.9%± 2 .6 %和 14.8%± 3.0 % ;该CTLCD3、CD8的阳性率分别为 93%± 7% ,92 %± 8% ;将活化的CTL注入荷瘤小鼠体内可见明显的治疗作用 ,注入 10 7CTL 4次后 ,10 0 %的小鼠获长期生存。结论　肿瘤来源的HSP PC70具有强大的免疫原性 ,可活化CD8 T淋巴细胞成为肿瘤特异性的CTL ,该CTL具有较高的体外杀瘤活性和良好的治疗作用。     

肿瘤热休克蛋白70对荷瘤鼠Th1型细胞因子表达的影响

目的：研究应用肿瘤来源的热休克蛋白70治疗后荷瘤小鼠外因中几种Th1型细胞因子水平的动态变化，探讨其打破荷瘤机体的免疫耐受、诱导抗肿瘤免疫的机制，为其应用于治疗人类的恶性肿瘤提供有价值的参考依据。方法：细胞培养、蛋白质纯化技术、电泳技术、Western-blot法、毛细管电泳、动物实验、ELISA等。结果：肿瘤来源的热休克蛋白70具有明显的抑瘤作用，并且能够诱升荷瘤小鼠外周血中几种主要的Th1型细胞因子（IL－2，TNF－β，IFN－γ）的水平，随HSP70的应用频次增加而逐渐升高，在最后治疗的2周后仍未见下降趋势，与对照组相比，差异显著（P＜0．01）。结论：肿瘤来源的HSP70对荷交谈小鼠Th1型细胞因子有明确的诱升作用，进而诱导机体产生并维持有效的抗肿瘤免疫效应，该作用是其抗肿瘤免疫效应的一个重要方面。     

因食用小花蚬子引起的一起副溶血性弧菌食物中毒的调查

1978年6月下旬,发生一起食物中毒,兹将调查结果报告如下: 一、发生经过:芦屯大队小学校师生和少数社员,于6月20日先后食小贩出售的小花蚬子,随买随吃,每人进食量不等,少则二、三个,多则100克左右。食后5小时即有个别学生出现腹痛、腹泻、恶心、呕吐等症状,继之更多患者相继发生,于21日下午7至8时达最高峰。经调查,进食小花蚬子的人为239人,中毒140人,发病率为58.6％,分散在全大队     

HSP70-PCs的抗肿瘤作用

热休克蛋白（heat shock protein，HSP）由Ritossa在1962年研究果蝇唾液腺染色体时首先发现，是一类广泛存在于自然界生物体内、具有重要生理功能且高度保守的蛋白质。在正常细胞中有少量表达，约占细胞总蛋白的5％-10％，当细胞处于高温、感染、创伤、缺氧及恶性肿瘤等应激状态下，     

灵芝提取物在肿瘤免疫治疗中的调节作用

目的将灵芝提取物与肿瘤免疫制剂联合运用,探讨灵芝提取物在肿瘤免疫治疗中的调节作用。方法纯化Hepa1-6细胞的肿瘤热休克蛋白70多肽复合物（HSP70-PCs）,SDS—PAGE及Western—blot对产物进行鉴定。将Hepa1-6细胞浓度调整为4×10^7／ml,按0．1ml／只接种于C57BL／6j小鼠背部皮下建立实验模型。随机将模型分为PBS对照组、灵芝提取物组（L组）、HSP70-PCs组（H组）、CpG—ODN组（C组）、灵芝提取物联合HSP70-PCs组（L＋H组）和灵芝提取物联合CpG—ODN组（L＋C组）,每组10只。L组、L＋c组、L＋H组于建模的第7天开始予灵芝提取物按4g／kg体重灌胃,1次／d,直至实验组小鼠死亡或实验结束;C组和L＋C组予瘤旁皮下注射CpG—ODN100ug／只,每周2次,共8次;H组和L＋H组予瘤体对侧背部皮下注射HSP70．PCs10ug／只,每周1次,共4次。对照组予皮下注射灭菌PBS液0．1ml／只,每周1次,共4次。定时测量瘤体大小,记录肿瘤生长情况、有无转移灶及生存时间。ELISA法检测实验鼠血清CXCL-9、CXCL-10、IFN-γ水平。运用SPSS16．0软件进行数据处理。结果灵芝提取物联合CpG—ODN或HSP70-PCs可以诱导抑瘤作用,肿瘤体积、质量、肿瘤转移率及生存期限与单独使用HSPTO-PCs或CpG—ODN比较差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）;灵芝提取物联合CpG-ODN或HSP70-PCs可以提高荷瘤小鼠血清中CXCL-9、CXCL-10和IFN-y水平,与二者单独使用组比较差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论灵芝提取物可通过诱导Th1型细胞因子表达来发挥免疫调节作用,对肿瘤免疫治疗有增强作用。     

腹腔内温热免疫化疗对胃及结直肠癌腹腔内复发的防治作用

目的评价腹腔内温热化疗合并白细胞介素-2(IL-2)免疫治疗对胃及结直肠癌术后腹腔内复发的治疗或预防作用。方法将1996年1月至1998年6月以来手术切除的35例T3Ⅱ～T4ⅢB期胃癌及111例B～D期的结直肠癌患者随机分成温热化疗组及联合免疫治疗组。温热化疗在手术后全麻下进行1h,化疗药为氟尿嘧啶(5-FU)0.5g/L,丝裂霉素(MMC)8mg/L,术后第3d行IL-2腹腔内免疫治疗。将IL-2100万U加入1000ml生理盐水中滴入腹腔,隔日进行,共10次,于免疫治疗的前后应用ELISA法测定两组患者外周血中几种主要Th1型细胞因子的水平,随访比较两组患者的生存率、腹腔内复发率及肝转移发生率,进行统计学分析。结果与温热化疗组相比,联合免疫治疗组的几种主要Th1型细胞因子的水平均明显升高,差异有非常显著性意义(P<0.01);3年生存率升高13.2%,而腹腔内转移率和肝转移发生率分别下降13.5%和6.2%,差异均有显著性意义(P<0.05～P<0.01)。结论腹腔内温热化疗合并免疫治疗可促进Th1型免疫漂移,增强机体的抗肿瘤免疫功能,对预防和治疗胃及结直肠癌腹腔内复发与肝转移有一定的作用。     

冠心病左室舒张功能的初步观察

收缩间期及心尖搏动图,作为冠心病的一种无创性功能检查方法,近年来报道较多,但大多数偏重于收缩功能的测定,而对舒张功能的分析则较少。我们观察了冠心病左室舒张功能的变化,报告如下。     

热休克蛋白70的抗肿瘤免疫效应研究

目的 :研究HSP70诱导的抗肿瘤免疫效应 ,为应用其治疗人类恶性肿瘤提供实验依据。方法 :应用细胞培养、液相色谱法、电泳技术、Western blot法等获得高纯度肿瘤中的HSP70 ,将其应用于同源的 61 5系小鼠 ,观察其抗肿瘤免疫效应。结果 :HSP70免疫后的小鼠能够抵抗同种肿瘤细胞的攻击 ,其中 1 0 μg免疫后的小鼠 1 0 0 %获长期生存 (>90d) ,无一死于肿瘤 ,5μg免疫后的小鼠肿瘤进展受到抑制 (平均生存 2 8 2± 4 8d) ,但无一小鼠获长期生存 ,上述两组与对照组 (平均生存 1 8 3± 3 6d)相比差异均具有显著性 (P <0 0 1 )。HSP70对荷瘤小鼠的治疗研究证明 ,5μgHSP70有一定的治疗作用 ,荷瘤小鼠平均生存 31 3± 2 9d ,而 1 0 μgHSP70治疗组的小鼠生存期 >58 8± 33 7d ,其中 40 %的小鼠所接种肿瘤完全消退 ,获长期生存(>90d) ,与其他组相比 ,差异具有显著性 (P <0 0 1 )。结论 :HSP70可诱发强大的抗肿瘤免疫效应 ,并且有良好的治疗作用 ,对于研究利用HSP70治疗人类的恶性肿瘤有重要的参考意义。     

肿瘤热休克蛋白70联合灵芝孢子粉对荷瘤小鼠的治疗作用

目的研究肿瘤热休克蛋白70（HSP70）与灵芝孢子粉联合运用对荷瘤小鼠的治疗作用。方法液相色谱法纯化小鼠肝癌细胞株中的HSP70,运用SDS-PAGE及Western blot对纯化产物进行定性分析,再用毛细管电泳鉴定其浓度。通过动物实验,观察HSP70与灵芝孢子粉单独应用及联合应用的抗肿瘤作用。ELISA法测免疫小鼠血清中的IFN-γ、CXCL-9、CXCL-10的水平。结果 HSP70与灵芝孢子粉联合应用较单独应用的治疗效果更明显。单独应用灵芝孢子粉能延长荷瘤小鼠的生存期限,其中1只获得长期带瘤生存,而HSP70可使40%荷瘤小鼠的肿瘤全部消退,获得长期无瘤生存,与对照组相比较差异显著（P〈0.01）。联合应用组40%荷瘤小鼠的肿瘤完全消退,3只小鼠获得长期生存,其中2只为无瘤生存,且肿瘤体积及质量均较分别单独应用组差别显著（P〈0.05或P〈0.01）,平均生存期〉（84.6±7.8）d,与对照组相比差异显著（P〈0.01）。两药单独应用组、联合应用组血清IFN-γ、CXCL-9、CXCL-10水平均显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）。联合应用组血清IFN-γ、CXCL-9、CXCL-10水平较单独应用组差别显著（P〈0.05或P〈0.01）。结论 HSP70与灵芝孢子粉联合应用对荷瘤小鼠有明显的治疗作用,可明显抑制肿瘤进展,提高生存率。以上结果对研究人类恶性肿瘤的免疫治疗具有较为重要的借鉴意义。