Wortmannin阻断PI3K/AKT途径对食管癌缺氧诱导因子-1α及糖酵解的影响

目的 探讨人食管癌细胞TE1、TE13中应用wortmannin阻断PI3K/AKT通路对缺氧诱导因子(HIF)-1α的抑制效果及对糖酵解相关基因表达的影响,分析PI3K/AKT-HIF-1α途径对食管癌细胞糖酵解通路之间的关系.方法 wortmannin(2μmol/L)预处理食管癌细胞TE1、TE13后常氧和缺氧培养,分为①常氧组(N);②缺氧组(H);③常氧处理组(N+W);④缺氧处理组(H+W).采用Western印迹检测细胞中HIF-1α蛋白及己糖激酶(HK)-Ⅱ、葡萄糖载体蛋白(GLUT)-1、乳酸脱氢酶(LDH )-A等糖酵解相关基因蛋白的表达;实时定量PCR检测HIF-1α及HK-Ⅱ、GLUT-1、LDH-A等糖酵解相关基因mRNA的表达;分光光度法测定胞液中LDH、HK-Ⅱ活性和培养上清液中乳酸浓度.结果 常氧状态下,在TE1细胞中存在HIF-1α蛋白的表达,wortmannin(2 μmol/L)能抑制HIF-1α蛋白表达,12 h后抑制效应最明显,故选取12 h为后续实验的缺氧时间.TE1、TE13细胞经wortmannin预处理后HIF-1α、HK-Ⅱ、GLUT-1、LDHA蛋白表达较未加药细胞明显减弱(P＜0.05);HIF-1α、HK-ⅡmRNA表达较未加药细胞明显减弱(P＜0.05).常氧和缺氧条件下加用wortmannin的TE1,TE13组食管癌细胞胞液LDH、HK-Ⅱ活性均较未加药细胞组明显减弱(P＜0.05),未加药细胞缺氧后酶活性增强(P＜0.05).常氧和缺氧条件下加用wortmannin组较未加药组细胞上清液乳酸浓度明显减低(P＜0.05),加wortmannin组细胞缺氧后表达增强(P＜0.05).结论 常氧及缺氧条件下,wortmannin能通过抑制食管癌细胞HIF-1α和糖酵解相关基因的表达导致乳酸水平降低,表明PI3K/AKT- HIF-1α途径与食管癌细胞糖酵解通路密切相关.     

比索洛尔联合胺碘酮治疗充血性心力衰竭并快速心律失常的疗效观察

目的观察比索洛尔联合胺碘酮治疗充血性心力衰竭并快速性心律失常的治疗效果。方法选择充血性心力衰竭伴快速性心律失常的患者86例,随机分为治疗组43例与对照组43例。对照组给予胺碘酮,治疗组在对照组基础上使用比索洛尔。观察并比较两组治疗前后心率（HR）,左心室射血分数（LVEF）,校正后QT间期（QTc）和药物不良反应。结果治疗组临床有效率86．0％（37／43）,对照组的有效率62．8％（27／43）,两组差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组对室上性心律失常及室性心律失常的疗效明显优于对照组（P〈0．05）。治疗组治疗前后的心率分别为（90．12±11．20）次／min和（65．87±8．34）次／min;而对照组分别为（89．93±10．98）次／min和（72．23±9．43）次／min。两组治疗后较治疗前心率均明显下降,但治疗组下降更为明显（P〈0．01）。治疗组治疗前后LVEF分别为（31．34±4．58）％和（48．03±5．48）％,对照组分别为（32．03±4．92）％和（40．38±5．29）％。治疗组治疗前后的QTC分别为（401．93±54．30）ms和（437．37±63．54）ms,对照组分别为（418．37±58．49）ms和（487．65±66．48）ms;两组LVEF和QTC较治疗前明显增高（P〈0．01）,但治疗组LVEF较对照组增高更为明显（P〈0．01）,而治疗组的QTC增高较对照组少（P〈0．01）。结论比索洛尔联合胺碘酮治疗充血性心力衰竭合并快速心律失常疗效显著,比单独用胺碘酮效果好,使用安全,耐受性好,不良反应少。     

原发性肝血色病并急性胆源性胰腺炎1例

本院收治原发性肝血色病1例,表现为慢性病程,自幼皮肤黏膜黄染,家族中有7人出现类似症状.近期合并急性胆源性胰腺炎,出现腹痛和黄疸加重而就诊.铁代谢及影像学等检查均提示肝血色素病.     

雷帕霉素对食管癌细胞缺氧诱导因子-1α和糖酵解途径的影响

目的:观察雷帕霉素(Rapamycin)对人食管癌细胞TE1、TE13中HIF-1 α的抑制作用及糖酵解途径相关基因表达的影响;分析mTOR信号通路与糖酵解途径的关系.方法:分别取TE1、TE13细胞株,常氧及缺氧条件下分别予以Rapamycin作用后,将两株细胞各分为四组:①正常对照组,即未处理组(N);②缺氧处理组(H);③常氧Rapamycin处理组(N+R);(④缺氧Rapamycin处理组(H+R)(即雷帕霉素预处理1小时后缺氧培养).采用实时定量PCR检测细胞中缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)蛋白及己糖激酶Ⅱ(HK-Ⅱ)、葡萄糖载体蛋白1(GLUT-1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)等糖酵解相关基因mRNA的表达,Western印迹检测HIF-1α及HK-Ⅱ、GLUT-1、LDHA等糖酵解相关基因蛋白的表达.结果:缺氧处理后与正常对照组相比,HIF-1α、HK-Ⅱ、GLUT-1蛋白表达及mRNA明显增强,而LDHA表达无明显变化;Rapamycin预处理后,正常对照组及缺氧处理组HIF-1 α、HK-Ⅱ、GLUT-1的表达均明显降低,LDHA无明显变化.结论:常氧及缺氧条件下,雷帕霉素可抑制食管癌细胞HIF-1 α及糖酵解相关基因的表达,提示阻断mTOR通路可抑制食管肿瘤细胞的糖酵解途径.     

上海市松江区消化性溃疡患者的心理社会因素调查

目的调查上海市松江区消化性溃疡患者的心理社会因素。方法对松江区中心医院2011年9月至2012年9月收治的75例消化性溃疡患者(疾病组)和82例非消化性溃疡患者(对照组)使用自制量表、艾森克人格问卷(EPQ)、社会支持评定量表(SSRS)进行调查分析。结果两组调查对象的人口学特征比较,差异无统计学意义(P>0.05);疾病组调查对象在吸烟量和烟龄上都显著高于对照组;N(情绪稳定性)得分、E(内—外倾向)得分、主观支持得分、客观支持得分、利用度得分及社会支持总分与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论消化性溃疡患者具有明显的心理特征,需要进行针对性心理干预。     

沙利度胺治疗原发性巨球蛋白血症疗效观察

目的：探讨小剂量沙利度胺治疗原发性巨球蛋白血症(WM)的临床疗效。方法：WM患者4例。沙利度胺75mg／d,疗程3个月以上根据治疗前后血液免疫球蛋白含量的变化来评定疗效。结果：4例患者血清免疫球蛋白的含量均有不同程度的下降,其中下降幅度最高达21．5g／L。4例WM患者仅1例出现轻微不良反应。结论：小剂量沙利度胺治疗原发性巨球蛋白血症有一定疗效。     

上海松江地区胆囊良性疾病的流行病学调查30901例

目的:研究上海松江地区胆囊良性疾病的流行病学特点.方法:回顾性分析2009年全年在我院经腹部B超检查、血液生化检测的30901例体检人群,对胆囊良性疾病进行分析,并对胆石症与肥胖、血糖、血脂间的关系进行探讨.结果:胆囊良性疾病患病率为15.87%,男女之比为1.252∶1,其中胆囊结石、胆囊息肉样病变、胆囊炎最为常见,患病率分别为5.94%、5.23%、3.91%,男女之比分别为0.998∶1、1.678∶1、1.518∶1.胆囊良性疾病患病率随年龄增长而上升,其中胆囊结石患病率随年龄增长而增加,胆囊息肉样病变患病率随年龄增长而减少,均与性别关系不大.胆石症患者中肥胖、高血糖、高三酰甘油以及高密度脂蛋白偏低分别占10.73%、21.73%、19,66%和2.07%,而在非胆石症患者中则分别占7.04%、13.37%、16.56%和1.45%,差异有显著性(P<0.05).结论:上海松江地区胆囊良性疾病患病率随年龄增长而增加,男性患病率略高于女性.其中,胆囊结石和胆囊息肉样病变所占比例最高,前者患病率随年龄增长而增加,后者则相反.肥胖、高血糖、高三酰甘油、低高密度脂蛋白是胆石症的危险因素,而胆固醇与胆石症的发生...     

缺氧诱导因子-1α和己糖激酶-Ⅱ在食管鳞状细胞癌中的表达及对糖酵解的影响

目的 探讨人食管鳞状细胞癌中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和己糖激酶-Ⅱ(HK-Ⅱ)的表达变化及对糖酵解的影响.方法 缺氧条件(1％氧浓度)下培养TE13及Eca109细胞,设置不同缺氧时间(分别为6、12、24、48 h),并以常氧培养(20％氧浓度)为对照.Western印迹检测HIF-1α及HK-Ⅱ的蛋白表达变化;经RNA干扰技术特异性静默HIF-1α,利用实时定量PCR及Western印迹检测HIF-1α和HK-Ⅱ的表达变化;分光光度法检测常氧和缺氧条件下细胞培养液中细胞的乳酸浓度变化.结果 ①缺氧条件下,TE13及Eca109细胞中HIF-1α表达均随缺氧时间延长而逐渐升高(P＜0.05),在缺氧12 h表达达到高峰,后表达又随时间延长而下降.TE13及Eca109细胞缺氧12 h后HK-Ⅱ表达均较常氧培养明显增强(P＜0.05).②实时定量PCR法检测显示,常氧条件下被干扰的TE13/shRNA和Eca109/shRNA细胞中HIF-1α RNA表达量较未干扰的TE13、Eca109细胞明显减弱(P＜0.05).HK-ⅡRNA表达结果与HIF-1 RNA一致.③常氧及缺氧培养时,HK-Ⅱ蛋白在TE13/shRNA和Eca109/shRNA细胞的表达均较未干扰的TE13、Eca109细胞明显减弱,差异有统计学意义(P＜0.05).④缺氧时TE13和Eca109细胞乳酸分泌量为14.707±3.594和15.062±3.901,较常氧时增多(6.070±1.839和6.891±1.592,P＜0.05).TE13/shRNA、Eca109/shRNA乳酸分泌量较未静默TE13、Eca109细胞显著减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 食管鳞癌中HIF-1α及HK-Ⅱ在缺氧条件下表达明显增强,HK-Ⅱ表达及乳酸浓度与HIF-1α表达密切相关,HIF-1α可能通过HK-Ⅱ影响细胞的糖酵解水平.