微小RNA-107 调控内质网应激对喉癌Hep-2 细胞癌增殖及凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miR-107)调控内质网应激对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响。方法将miR-107类似物和阴性对照片段转染至对应组细胞中,以未转染组作为空白组。采用荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组Hep-2细胞中miR-107相对表达量,用蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组Hep-2 细胞中的内质网应激有关蛋白即蛋白激酶R 样内质网激酶(PERK)及活化转录因子4(ATF4)蛋白的表达,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定Hep-2细胞的增殖能力,用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果三组转染细胞miR-107相对表达量差异有统计学意义(χ2=11.50,P<0.05)。其中mimics组miR-107的相对表达量为(15.32±1.94),与mimics组相比较,NG组、空白组miR-107相对表达量均降低(P<0.05)。三组转染细胞的PERK和ATF4蛋白表达水平均差异有统计学意义(F=70.35、13.77,P<0.05)。其中mimics组PERK 和ATF4蛋白的相对表达量为(0.53±0.07)和(0.75±0.06),与mimics组相比较,NG组和空白组的PERK和ATF4蛋白相对表达量均降低(P<0.05)。MTT分析结果显示,三组细胞的增殖能力差异有统计学意义(F=21.44、28.38、59.14,P<0.05)。其中mimics组Hep-2细胞增殖能力在12、24、36 h时分别为(0.15±0.01)、(0.33±0.03)和(0.47±0.04),与mimics组比较,在12、24、36 h后NG组、空白组Hep-2细胞增殖能力均有显著升高(P<0.05)。三组转染细胞的细胞凋亡率比较差异有统计学意义(F=102.32,P<0.05)。其中mimics组Hep-2细胞凋亡率为(10.18±0.93),与mimics组相比较,NG组和空白组的细胞凋亡率均降低(P<0.05)。结论上调miR-107的表达能够抑制Hep-2细胞的增殖,促进Hep-2细胞凋亡,内质网应激可能在其中有重要作用。     

肝素减轻内毒素致大鼠急性肺损伤的实验研究

目的探讨不同剂量肝素减轻内毒素（LPS）诱导大鼠急性肺损伤（ALI）的作用。方法股静脉注射LPS5mg/kg建立大鼠ALI模型。50只雄性SD大鼠随机分为5组：对照组（A组）;LPS组（B组）;C1-C3组为肝素＋LPS组,分别于LPS注入即刻静注肝素250u/kg,500u/kg,1000u/kg,每组10只。于LPS注射4h后行血气检测并股动脉放血处死大鼠,取肺组织测定肺组织湿/干重比、肺组织丙二醛（MDA）,取支气管肺泡灌洗液（BALF）检测肿瘤坏死因子-a（TNF-a）水平和蛋白浓度,光镜下观察肺组织形态学变化。结果B组肺湿/干重比、肺组织MDA、BALF中TNF-a水平和蛋白浓度显著增高;PaO2、PaCO2、BE值明显降低;光镜下肺组织损伤程度增加。C1-C3组各项指标均较内毒素组减轻,但随着剂量增大出血并发症增加。结论肝素早期给药可以减轻内毒素致急性肺损伤,250u/kg为最佳治疗剂量。     

肝素早期抗凝对内毒素致急性肺损伤大鼠凝血功能的影响

目的观察内毒素致急性肺损伤大鼠的凝血功能变化及肝素早期抗凝治疗的效果。方法健康雄性SD清洁级大鼠50只,随机分为5组。A1-A3及B组均尾静脉注射大肠杆菌脂多糖（LPS）5mg/kg,A1-A3组分别在给予LPS后1min静注肝素100U/100g、50U/100g、25U/100g,C组给予等容量的生理盐水。B组在LPS注射前和注射后1min、4h,A1-A3组和C组4h经右股静脉取静脉血检测血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、血浆纤维蛋白原水平（FIB）。结果LPS注射1min后B组PT、TT缩短,FIB减少。LPS注射4h后,与C组比较,B组PT、APTT延长,FIB减少（P〈0.05）;与B组比较,A1-A3组FIB显著增加（P〈0.01）;A1组和A2组TT显著延长（P〈0.01）;A1组APTT显著延长（P〈0.01）。结论肝素早期抗凝治疗对内毒素性急性肺损伤大鼠凝血紊乱有改善作用,小剂量治疗较适宜。