庆大霉素耐药基因探针的构建

本文从致痛性大肠杆菌的pEFM2质粒出发,克隆获得重组质粒pBY101,绘制了pBY101的PstⅠ、EcoRⅠ及PvuⅡ的限制性酶切物理图谱,确定Gm耐药基因在8.9kb的pstⅠ—1片段上。用EcoRⅠ酶解pBY101,再连接,次级克隆获得重组质粒pBY102。确证pBY102的4.9kb PstⅠ—EcoRⅠ片段含有编码Gm耐药基因。采用低熔点琉脂糖挖块法回收4.9kb片段,以生物素-7-dAT标记之,并作为探针,以菌落原位杂交珐检测106株Gm耐药性细菌,而且证明本研究构建的Gm—DNA探针与国外引进的ANT(2″)基因探针不同源。     

628株大肠杆菌R质粒的检测

本文检测来源于新生儿及健康猪的628株大肠杆菌的耐药谱及R质粒。这些菌株对四环素的耐药率最高,人源菌株对氨(?)青霉素和庆大霉素的耐药率高达67.82％和51.49％。R质粒的检出率在60％以上。多重耐药菌株中R质粒检出率特别高。三耐以上菌株的耐药谱型多以四环素、磺胺抗性为基础,对比过去的资料;耐药类型由四耐已发展到以五耐以上居优势;应引起医务界及社会上的重视。     

庆大霉素耐药基因的分子克隆及DNA探针制备的研究(简报)

作者首次从流行的致病性大肠杆菌(EPEC)中的多重耐药菌株E2出发,经药敏测定,R质粒的接合传递,质粒DNA的消除试验及质粒DNA的电泳检测,确证庆大霉素耐药基因在可传递性质粒pEFM2上。质粒pEFM2经限制性内切酶切割成15个片段,以pBR322为截体,利用“鸟枪法”随机克隆,获得了1000株重组子的克隆库。从中筛选出1株仅表达庆大霉素(Gm)和四环素(Tc)抗性的重组子85/HB101。它的重组质粒pBY101经数种限制性内内切酶单切、双切,绘制了物理图谱。继而利用EcoRI酶切pBY101,再经连接亚克隆获得     

庆大霉素耐药基因蔓延规律的研究进展

近年来庆大霉素耐药率日益增长,已引起临床医师和有关研究工作者的重视。本文就耐药的遗传学机制、生物化学机制和耐药基因的检测方法研究进展作一简要综述。     

628株大肠杆菌Col质粒的检测及其实际应用的探讨

628株大肠杆菌Col质粒检测结果阳性率为20.79％,源自新生儿的Col~+菌株较少出现R质粒。从全敏感菌株中筛选出9株带有不同Col质粒的大肠杆菌,测定其对15株受检的指示菌(肠道菌)的抗菌作用,结果上述Col质粒的抗菌谱既可用于自身鉴别又可用于肠道菌的分类,将它们同带有ColE1、ColE2及ColIb的3株E.Colik—12及2株Col~+菌对100株致病菌(多耐痢菌62株,ETEC33株)进行抗菌作用测定,结果14株Col质粒携带菌抗菌谱不一致,以B128、B246及P416的抗菌率最高。     

庆大霉素耐药基因的分子克隆

利用基因工程技术,从一株流行的致病性大肠杆菌的65Md的可传递的多重耐药质粒pEFM2出发,克隆获得一重组质粒pBY101,它仅表达庆大霉素和四环素抗性,其庆大霉素耐药基因在8.9kb的Pst Ⅰ片段上。再由EcoRⅠ酶解pBY101,亚克隆获得一重组质粒pBY 102,其庆大霉素耐药基因在4.9kb的Pst Ⅰ-EcoRⅠ片段上。经氨基糖苷类抗生素底物谱分析和用生物素标记的2″-O-腺苷转移酶[ANT(2″)]基因探针,以Southern印迹杂交法检测,证明庆大霉素耐药基因不是编码ANT(2″)的。