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研究了革兰氏阴性细菌大肠杆菌JM109和革兰氏阳性细菌地衣芽孢杆菌0204在电转化过程中,高渗溶液如山梨醇、甘露醇、甘油、蔗糖和葡萄糖对其电转化率的影响.结果表明,高渗溶液能够有效保护细胞,提高转化率.在复苏培养基中,0.7mol/L甘露醇对地衣芽孢杆菌0204的保护效果最好,0.1mol/L蔗糖对大肠杆菌JM109的保护效果最好.由此得到质粒DNA对地衣芽孢杆菌0204的最高电转化率为9.8×102转化子/μg,质粒DNA对大肠杆菌JM109的最高电转化率为5.9×108转化子/μg. 相似文献
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对芽孢杆菌2004 β-甘露聚糖酶进行了产酶条件优化、初步纯化及其酶学性质的研究.条件优化结果:1.5 g/dL槐豆胶,2 g/dL蛋白胨,培养温度为40 ℃,250 mL三角瓶装液量为70 mL,其他因素影响不大.此最佳产酶条件下,嗜热芽孢杆菌2004 12 h的产酶水平平均为41.92 U/mL,比原来提高了30倍.培养液离心得到上清液,经硫酸铵沉淀,Sephadex G-200分子凝胶过滤和DEAE纤维素离子交换,酶比活达到722 U/mg,纯化了23.94倍,收率为35.1 %.该酶的最适反应温度为70～80 ℃;反应的最适pH值为5.8～6.0;pH值稳定范围为4.0～9.0.金属离子Mg2 和K 对酶略有激活作用.适当浓度的Mg2 不仅对酶有激活作用,还对酶的热失活具有保护作用. 相似文献
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