MicroRNA-30a通过Sox9调控骨髓间充质干细胞软骨分化的研究

[目的]筛选在骨髓间充质干细胞(MSC)软骨分化过程中调控Sox9表达的microRNA (miRNA),探讨软骨形成过程的基因干预靶点和手段。[方法]经过鉴定的MSC行软骨分化,监测分化过程中候选miRNAs的表达趋势,研究差异表达miRNA对MSC软骨分化的影响及其与Sox9的相互作用关系。[结果]在筛选的4条具有调控Sox9能力的miRNA中,miRNA-30a和miRNA-195在MSC软骨分化过程中呈递增趋势。其中,miRNA-30a mimic转染MSC后细胞存活率无明显变化,在软骨分化21 d后,转染组甲苯胺蓝染色较对照组减弱。荧光素酶报告基因结果显示野生型Sox9 3'UTR报告质粒荧光释放被miRNA-30a mimic转染显著抑制,而突变体无此效果,同时,Western blot结果显示转染miRNA-30a mimic的MSC中,Sox9表达量较对照组降低。[结论] miRNA-30a在MSC软骨分化过程中表达逐渐上升并通过Sox9完成其负调节作用。此研究表明miRNA-30a作为调控MSC软骨分化的潜在靶点,对于软骨再生和软骨发育相关疾病的应用和防治具有重要意义。