穿心莲内酯对TBHP诱导的椎间盘髓核细胞凋亡的作用及机制研究

目的：探讨穿心莲内酯（andrographolide,ANDRO）对叔丁基过氧化氢（tert-butyl hydroperoxide,TBHP）诱导的椎间盘髓核细胞（nucleus pulposus cells,NPC）凋亡的作用及其机制。方法：用TBHP诱导NPC建立细胞模型。将NPC分为5组：对照组、模型组（100μmol/L TBHP）、ANDRO低剂量组（100μmol/L TBHP+9μmol/L ANDRO）、ANDRO中剂量组（100μmol/L TBHP+18μmol/L ANDRO）和ANDRO高剂量组（100μmol/L TBHP+36μmol/L ANDRO）。流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,ELISA试剂盒检测氧化应激相关指标超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-PX）和过氧化氢酶（catalase,CAT）水平,JC-1探针法检测线粒体膜电位,Western blot检测动力相关蛋白1(dynam...     

lncRNA XIST靶向miR-302a-3p对IL-1β诱导软骨细胞损伤的调控机制

目的 探讨lncRNA X染色体失活特异转录因子（XIST）靶向miR-302a-3p对白细胞介素-1β（IL-1β）诱导软骨细胞损伤的调控机制。方法 SW1353细胞分为Control组、IL-1β组、IL-1β+si-NC组、IL-1β+si-XIST组、IL-1β+si-PDK1组、IL-1β+si-XIST+miR-NC inhibitor组、IL-1β+si-XIST+miR-302a-3p inhibitor组。检测XIST、miR-302a-3p以及3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（PDK1）mRNA表达;噻唑蓝（MTT）实验测定细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT-PCR检测炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10）水平;双荧光素酶报告基因检测实验证实miR-302a-3p与XIST或PDK1的靶向关系;免疫印迹法检测凋亡蛋白（Bcl-2、Bax）及PDK1蛋白表达。结果 与IL-1β组相比,IL-1β+si-XIST组XIST表达下调,细胞活力升高,凋亡率降低,Bax表达及TNF-α、IL-1β、IL-6水平下降,Bcl-2表达及IL-4、IL-10水平升高（P<0.05）。XIST直接靶向下调miR-302a-3p表达,miR-302a-3p下调可恢复si-XIST介导的促增殖、抗凋亡和炎症反应作用（P<0.05）。PDK1是miR-302a-3p的靶基因,沉默PDK1可抑制细胞的炎症反应（P<0.05）。结论 敲低XIST可提高IL-1β诱导软骨细胞的细胞活力,减轻OA样软骨细胞损伤,其作用机制与靶向上调miR-302a-3p进而抑制PDK1表达有关。     

川陈皮素通过抑制STING/NF-κB信号通路促进骨质疏松大鼠的骨折愈合北大核心CSCD

目的 探讨川陈皮素（NOB）通过抑制干扰素基因刺激因子（STING）/核转录因子kappaB(NF-κB)信号通路对骨质疏松（OP）大鼠骨折愈合的影响。方法 通过切除卵巢+右侧股骨干骨折髓内固定术建立OP性骨折大鼠模型；将造模后的大鼠随机分为模型组、NOB高（NOB-H,30 mg/kg NOB）、中（NOB-M,20 mg/kg NOB）、低剂量（NOB-L,10 mg/kg NOB）组以及NOBH+STING激活剂（DMXAA）组（30 mg/kg NOB+25 mg/kg DMXAA），并以仅暴露卵巢的18只大鼠作为假手术组。干预结束后，对大鼠骨折愈合状况进行评估；Micro-CT检测大鼠骨小梁微结构变化；试剂盒检测血清中骨代谢相关指标[碱性磷酸酶（ALP）、钙、磷]及炎症因子（TNF-α、IL-1β）水平；HE检测股骨组织形态学变化及骨小梁面积；Western blot检测STING/NF-κB通路相关蛋白表达。结果 与对照组相比，模型组骨折线清晰，骨小梁结构紊乱、且间隙较大，TNF-α、IL-1β水平、STING、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达显著增加，骨小梁面积、ALP、钙、磷水平、骨密度（BMD）、骨体积分数（BV/TV）、骨小梁数量（Tb.N）和骨小梁厚度（Tb.Th）显著降低（P<0.05）；与模型组相比，NOB-L组、NOB-M组、NOB-H组骨折线逐渐模糊，骨小梁结构排列有序，且间隙逐渐减少，指标变化趋势与模型组相反（P<0.05）;STING激活剂减弱了NOB对OP大鼠的骨折愈合的促进作用，并增加大鼠炎症反应。结论 NOB可减少OP性骨折大鼠炎症反应，促进其骨折愈合，可能与抑制STING/NF-κB信号通路有关。