骨髓干细胞参与小鼠急性肾小管坏死修复的实验研究

【摘要】 目的 观察在生理和病理情况下,骨髓来源的干细胞(BMSC)能否分化成肾小管上皮细胞。 方法 绿色荧光蛋白(GFP)标记的C57BL/6转基因小鼠提供骨髓细胞。同种无荧光标记的C57BL/6小鼠100只分为正常对照组、全身照射组、缺血再灌注组、骨髓移植组、骨髓移植+缺血再灌注组。受体鼠的骨髓重建经血液常规检查和流式细胞仪检测确认,并采用荧光组织化学、免疫组织化学等方法观察绿色荧光标记的BMSC在受体鼠肾脏的分布及数量。 结果 全身致死剂量γ射线照射未造成小鼠肾脏组织结构和生理功能的明显改变。骨髓移植后第56、84天的受体鼠肾小管中有少量GFP阳性细胞的存在[(78.75±5.99)%、(79.58±4.60)%],激光共聚焦显微镜进一步证实这些细胞位于肾小管,并表达肾小管上皮细胞特异性的功能蛋白megalin。 结论 在生理和病理情况下,骨髓干细胞均可以向肾小管上皮细胞转分化,参与肾小管上皮细胞的更新,并且在急性肾小管坏死的病理条件下,骨髓干细胞的肾向转化率与肾脏受损程度有关。     

骨髓细胞参与甘油引起的小鼠急性肾小管坏死修复的实验观察

目的：观察骨髓来源的细胞能否分化成肾小管上皮细胞。方法：15只绿色荧光蛋白（GFP）标记的C57BL／6转基因小鼠提供骨髓细胞，64只同种无荧光标记的C57BL／6小鼠随机分为正常对照组（N组）、全身照射组（TBI组）、骨髓移植组（BMT组）、骨髓移植＋甘油注射组（B＋G组），每组16只。各组小鼠于不同时间点取血检测血常规、尿素氮及血肌酐，并取肾行H-E染色检查肾脏病理变化。流式细胞仪可以明确受体鼠骨髓细胞中CFP阳性细胞的比例，利用荧光显微镜及激光共聚焦显微镜采用荧光组织化学、免疫组织化学等方法观察GFP阳性细胞在受体鼠肾脏的分布及数量。结果：致死剂量^60Co照射虽然引起血常规三系减少，但并未对肾脏的组织结构及功能造成损伤。BMT组受体鼠在骨髓移植后第56天、84天时，肾小管中有少量GFP阳性细胞的存在，B＋G组受体鼠于上述同样时间点时肾小管中的GFP阳性细胞增多。激光共聚焦显微镜进一步证实了这些GFP阳性细胞位于肾小管上皮，并且荧光组织化学显示，这些GFP阳性细胞表达肾小管上皮细胞特异性功能蛋白Megalin。结论：骨髓细胞可以向肾小管上皮细胞分化．参与肾小管上皮细胞的更新。并且损伤可以使骨髓细胞的肾向分化率增加。     

小鼠骨髓干细胞参与肾小管上皮细胞更新的实验研究

目的：观察骨髓来源的干细胞能否分化成肾小管上皮细胞，深化对骨髓干细胞可塑性的认识。方法：绿色荧光蛋白标记的C57BL／6转基因小鼠提供骨髓，同种无荧光的C57BL／6小鼠经致死剂量7射线全身均匀照射后接受骨髓移植，分别在移植后第56d、84d处死，采用荧光组织化学、免疫组织化学等方法观察绿色荧光在骨髓移植小鼠肾脏肾小管的分布及数量，观察骨髓干细胞在无损伤的小鼠肾脏中的分化。结果：骨髓移植后56d、84d的小鼠肾小管中有少量绿色荧光蛋白阳性细胞存在。激光共聚焦显微镜进一步证实这些细胞位于肾小管，并表达肾小管上皮细胞特异性的功能蛋白megalin。结论：骨髓干细胞可能参与肾小管上皮细胞的更新。     

生理条件下骨髓细胞参与肾小管上皮细胞的更新

目的:观察生理情况下骨髓细胞能否分化成肾小管上皮细胞.方法:绿色荧光蛋白(GFP)标记的C57BL/6转基因小鼠提供骨髓,同种无荧光标记的C57BL/6小鼠分为3组,每组各15只.正常对照组未做任何处理;全身照射组经致死剂量γ射线全身均匀照射后不接受骨髓移植,1周内处死;骨髓移植组照射后接受骨髓移植,分别于移植后56 d、84 d分2批处死小鼠.取3组小鼠血液行血常规、血肌酐、尿素氮检测,同时取其肾脏标本行H-E染色.流式细胞仪检测骨髓移植组骨髓细胞中GFP阳性细胞比例,免疫组织化学法观察GFP阳性细胞在其肾脏内的分布及数量.结果:与正常对照组相比,放射组和骨髓移植组的血尿素氮和肌酐无明显变化.肾脏病理检查示全身致死剂量γ射线照射未造成小鼠肾脏组织结构和生理功能的明显改变,但血常规提示其三系减少,与其他2组相比有统计学差异(P＜0.05).荧光显微镜和激光共聚焦显微镜发现骨髓移植后56、84 d的受体鼠肾小管中有少量GFP阳性细胞存在,流式细胞仪检测发现其骨髓中GFP阳性细胞的比例分别为(78.75±5.99)%和(79.58±4.60)%,免疫组化定量结果显示GFP阳性细胞所占肾小管上皮细胞的比例分别为(4.17±1.66)%和(3.88±1.35)%,两亚组间比较无明显差别.结论:在无肾小管损伤的生理情况下,骨髓细胞也可以参与肾小管上皮细胞的更新.