经尿道灌注自杀基因治疗大鼠膀胱癌的实验研究

目的:探讨经尿道膀胱灌注脂质体和逆转录病毒载体介导的自杀基因(HSVtk),观察在羟基无环鸟苷(ganciclovir,GCV)作用下大鼠膀胱肿瘤的生长情况.方法:用N-甲基-亚硝基脲(MNU)膀胱灌注建立大鼠原位膀胱癌模型.经尿道膀胱灌注脂质体、逆转录病毒载体HSVtk基因,随后腹腔内注射GCV,连续6天.结果:经尿道膀胱灌注HSVtk基因后48h,RT-PCR检测出膀胱肿瘤中HSVtk基因表达.逆转录病毒组和脂质体组膀胱总重量与裸质粒组和对照组相比有显著差异,表明膀胱肿瘤的生长被抑制.TUNEL法原位检测肿瘤组织中凋亡细胞不仅出现在表层细胞,而且深层细胞大量凋亡,推测旁观者效应可能发挥了一定作用.结论:经尿道膀胱灌注脂质体DNA或重组逆转录病毒载体可以向肿瘤转导HSVtk基因.HSVtk/GCV系统能抑制大鼠原位膀胱肿瘤的生长,显示出抗肿瘤作用.     

螺旋CT扫描在经皮肾镜碎石术围手术期的应用

目的：探讨在经皮肾镜碎石术围手术期中运用螺旋CT扫描及三维重建技术的临床价值。方法：对68例复杂性肾结石患者运用螺旋CT扫描及三维重建技术进行术前模拟定位,制定最佳的穿刺通道,术中根据CT结果搜寻结石,术后即刻、1、3、5天行CT扫描。结果：本组68例复杂性肾结石中建立手术通道75条：从穿刺到建立第一条手术通道的时间为5～10min,通道位置完全符合手术前设计72条;手术时间50～110min;38例结石完全取尽,结石完全清除率55．9％,残留结石碎片者（≤4mm）22例,残留小结石（〉4mm）8例;术中发生集合系统穿孔5例。胸腔积液者30例,占44．1％;全部患者皆有肾周积液,多者延及盆腔,平均约105．8ml,此后逐渐吸收;1例集合系统大量积血,术后全部肾脏肾实质皆较术前增厚,但此后逐渐恢复术前状态。结论：螺旋CT扫描能为经皮肾镜碎石术术前提供精确的穿刺径路,术中为寻找结石提供方向,术后能精确发现残存结石的大小、位置及有无出血、灌注液的逆流和外渗,螺旋CT扫描是经皮肾镜碎石术术前、术后较理想的影像学检查。     

"十字定位法"建立手术通道在经皮肾穿刺取石术中的应用

目的探讨经皮肾穿取石术中通过简单精确的定位建立手术通道的方法。方法术中用C臂机垂直和水平透视,确定穿刺点与结石的水平和垂直距离,计算出进针的角度和深度,精确穿刺。结果86例患者的102条手术通道均一次快速穿刺成功,准确建立。结论“十字定位穿刺法”能确保经皮肾穿刺取石术中快速安全建立手术通道。     

单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷系统对膀胱癌体内杀伤作用的研究

目的：探讨逆转录病毒介导的单纯疤疹病毒胸苷激酶／丙氧鸟苷(HSV-TK／GCV)系统对膀胱癌的体内杀伤作用。方法：用逆转录病毒载体感染鼠源性膀胱癌细胞株T739，体外观察其对GCV的敏感性。在鼠源性T739膀胱癌动物模型中，以逆转录病毒单次或重复感染方法介导TK基因转移，观察GCV治疗前后肿瘤体积大小及动物存活时间变化。结果：TK基因导入T739后获得了GCV敏感性，体内肿瘤生长受到抑制，动物存活时间延长，但单次和重复感染组之间无差别。结论：逆转录病毒成功介导膀胱癌体内基因转移，HSV-TK／GCV系统在体内对膀胱癌有杀伤作用，其可望对膀胱癌作为基因治疗。     

枸橼酸钾对三聚氰胺氰尿酸盐肾结石大鼠的预防作用

目的观察枸橼酸钾对三聚氰胺氰尿酸盐肾结石的预防作用。方法 36只雄性大鼠随机平均分为3组,A组、B组和C组,A组灌胃2 mL蒸馏水,B组灌胃三聚氰胺（30 mg/kg）和三聚氰酸（30 mg/kg）,C组灌胃三聚氰胺（30 mg/kg）、三聚氰酸（30mg/kg）和枸橼酸钾（1 g/kg）。2周后观察大鼠肾组织三聚氰胺氰尿酸结晶的形成情况。结果 C组大鼠肾内草酸钙结晶明显少于模型组（P〈0.05）。结论枸橼酸钾对预防大鼠三聚氰胺氰尿酸盐肾结石的形成有确切效果,其作用可能主要是通过增加尿中三聚氰胺氰尿酸盐结晶的溶解、排泄而达到的。     

尿道下裂手术术式的选择(附93例报告)

目的 对尿道下裂进行回顾性研究.方法 2003年5月至2008年9月收治93例确诊尿道下裂患者,根据不同类型分别采用尿道口前移、阴茎头成形法(MAGPI术式)、尿道板纵切卷管法或加盖岛状皮板法(Snodgrass术或Onlay术)、横裁或纵裁包皮岛状皮瓣尿道成形(Duckett术)、阴囊中缝皮管加横裁包皮岛状皮瓣成形尿道(Duplay联合Duckett术)、弧形带蒂阴茎阴囊联合皮瓣尿道成形术治疗不同类型的尿道下裂.结果 治愈82例,并发尿道瘘6例,尿道狭窄5例,治愈率为88.2%(82/93).81例获随访,平均随访时间23.5个月(1～42个月),随访期间患儿排尿正常.结论 尿道下裂术式的选择并无统一标准,应根据术者的经验及患者情况来选择,细心周到的术后护理能降低并发症的发生..     

三聚氰胺氰尿酸盐致肾脏损害的实验研究

目的 研究三聚氰胺氰尿酸盐对大鼠肾脏的毒性作用.方法 SD大鼠90只,随机分为200、400mg/kg三聚氰胺氰尿酸盐组和对照组,每组30只.三聚氰胺氰尿酸盐组分别给予200、400mg/kg三聚氰胺氰尿酸盐灌胃,对照组则给予2ml无菌蒸馏水灌胃,每天1次,连续60d.各组随机选定6只大鼠用代谢笼收集前7d的24h尿液...     

HSVtk/GCV介导的旁观者效应对人膀胱癌的作用机理

目的研究单纯疱疹病毒胸腺苷激酶基因(HSVtk)联合丙氧鸟苷(ganciclovir, GCV)对人膀胱癌细胞(BIU87)的旁观杀伤作用,探讨旁观者效应产生的机制.方法将携带HSVtk基因的细胞BIU87-TK与BIU87混合培养,观测HSVtk/GCV系统的旁观者效应.染料划痕标记观察细胞间缝隙连接功能;RT-PCR 检测连接蛋白Connexin26 (Cx26) mRNA表达.同时观测维甲酸对缝隙连接和旁观者效应的影响.结果当BIU87-TK占40%时,共培养细胞对GCV的杀伤敏感性接近60%,显示出旁观者效应.大量细胞凋亡.划痕实验见染料传至临近细胞,RT-PCR 检测出Cx26mRNA表达(0.15).维甲酸处理后,染料传递至更多细胞,Cx26mRNA表达增加到0.34, HSVtk/GCV的旁观者效应随之提高.结论 HSVtk/GCV对人膀胱癌细胞具有旁观杀伤作用,其机理与细胞间缝隙连接和凋亡有关.维甲酸能增强细Cx26表达和缝隙连接功能,提高旁观者效应.     

自杀基因治疗旁观者效应研究进展

肿瘤基因治疗的一个策略就是应用药物敏感基因转移至靶细胞,在靶细胞内将无毒的药物前体转化为有毒物质,从而达到杀死肿瘤细胞的目的,这种基因被称为自杀基因（ｓｕｉｃｉｄｅｇｅｎｅ）。目前,已建立多个自杀基因系统,如 ＨＳＶ－ＴＫ／ＧＣＶ,５－ＦＣ／ＣＤ,ＰＮＰ／ＭｅＰ－ｄＲ。其中应用得最多的是ＨＳＶ－ＴＫ／ＧＣＶ,对它的研究也比较深入。这种治疗的优点就是旁观者效应（ｂｙｓｔａｎｄｅｒｅｆｆｅｃｔ ＢＳＥ）,即：转移基因阳性表达细胞的死亡可引起邻近阴性细胞的死亡。在ＨＳＶ－ＴＫ系统中,只要有１０％－５０％…     

膀胱灌注逆转录病毒载体HSV-TK基因治疗大鼠膀胱癌

目的：研究膀胱内灌注逆转录病毒载体单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶(HSVtk)基因治疗膀胱癌的作用。方法：用N-甲基-亚硝基脲(MNU)膀胱灌注诱导建立大鼠原位膀胱肿瘤模型,该肿瘤与人类膀胱肿瘤病理特点非常相似。随后经尿道膀胱灌注逆转录病毒载体HSV-TK(基因,腹腔内注射羟基无环鸟苷(ganciclovir,GCV),连续6天。结果：经尿道膀胱灌注逆转录病毒HSV-TK基因后48小时RTPCR检测出膀胱肿瘤中HSV-TK基因表达。GCV处理后．肿瘤体积以及膀胱总重量检测表明膀胱肿瘤的生长被显著抑制。肿瘤细胞DNA电泳显示诱导凋亡可能是HSV-TK／GCV系统治疗肿瘤的重要机制。结论：经尿道膀胱灌注重组逆转录病毒载体可以向肿瘤转导HSV—TK基因。HSV-TK／GCV系统能抑制鼠原位膀胱肿瘤的生长。