二氮嗪对软骨细胞氧化损伤的影响

目的:探讨二氮嗪对双氧水诱导的软骨细胞氧化损伤的影响。方法:取SD乳鼠膝关节软骨细胞进行原代培养,将对数生长期的软骨细胞分成5组,分别为阴性对照组(A组),双氧水组(B组),H2O2+0.1μmol·L-1二氮嗪组(C组),H2O2+1.0μmol·L-1二氮嗪组(D组),H2O2+10μmol·L-1二氮嗪组(E组);A组细胞不做特殊处理,B组用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4 h,C、D、E、F组预先分别用0.1μmol·L-1DZ,1.0μmol·L-1DZ,10μmol·L-1DZ,100μmol·L-1在37℃的恒温箱孵育30分钟,PBS洗涤细胞,再用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4小时。分别检测ABCDE各组细胞的细胞活性,ROS的量,细胞凋亡情况。结果:①MTT法检测各组细胞活性,细胞活性率从大至小依次为D组C组E组F组B组;②用活性氧探针DCFH-DA检测各组细胞中的ROS的量,ROS产量从多至少依次为B组E组D组C组A组;③流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,各组细胞凋亡率由大至小依次为B组E组D组C组。④Western bolt检测各组软骨细胞中HIF-1α蛋白的表达,各组软骨细胞中HIF-1α蛋白表达量依次为C组D组E组A组B组。结论:二氮嗪可降低双氧水诱导的软骨细胞的凋亡率,同时也降低双氧水诱导的软骨细胞ROS的产生,并诱导软骨细胞产生HIF-1α蛋白,可能存在二氮嗪诱导HIF-1α的表达,引起下游相关基因的转录,总体提高软骨细胞对氧化损伤的耐受力,阻碍自由基诱导的软骨细胞的凋亡。     

柠檬酸钙复合材料促进骨腱愈合的实验研究

目的：本实验为研发一种新型促进骨腱愈合材料———柠檬酸钙复合材料,并在合适动物实验模型中探究材料对骨腱愈合的作用。方法实验动物选用成年日本大白兔48只,将其随机分为6组,均采用双侧兔趾长伸肌腱模型,实验侧（右侧）注射注射型海藻酸钠-明胶-柠檬酸钙复合材料,对照侧（左侧）注射等量海藻酸钠－明胶液体。术后2、4、6、8、10、12周取材,行标本组织学染色观察,采用Image-Pro Plus 8.0图像分析软件测定肌腱周围每1mm2新生骨面积,进行生物力学测试。结果术后6周内,组织学示骨腱界面中,实验侧Sharpey纤维、纤维软骨、钙化软骨出现明显早于对照侧,骨腱间间隙明显减小;2、4、6、8、10周及12周,每1mm2中新生骨面积实验组均高于对照组;术后6周内,实验侧骨腱愈合抗牵拉强度明显高于对照侧。结论可注射型海藻酸钠-明胶-柠檬酸钙对骨腱愈合具有明显的促进作用,这种作用主要发生在早期。     

柠檬酸钙在体外条件下对新鲜血液影响的实验研究

目的探讨柠檬酸钙在体外条件下对新鲜血液的影响。方法测量加入柠檬酸钙后新鲜血液中红细胞的溶血率;分别向2 m L血清中加入柠檬酸钙0 mg、1.0 mg、2.0 mg、3.0 mg、4.0 mg、5.0 mg、6.0 mg、7.0 mg、8.0mg、9.0 mg、10.0 mg和12.0 mg后测量血清中钙离子浓度,在此实验基础上,把实验分为四组,向5 m L新鲜血液中分别加入柠檬酸钙0 mg,1.0 mg,5.0 mg和9.0 mg后分别测量血液凝固前血清钙浓度、血液凝固后血清钙浓度、凝血块体积、凝血时间,测算单位体积凝血块中的钙浓度。结果柠檬酸钙具有良好的血液相容性,加入柠檬酸钙后新鲜血液中血清钙离子浓度增加,单位体积血凝块中的钙含量有统计学差异(0.01),新鲜血液凝血时间延长。结论柠檬酸钙具有良好的生物相容性,加入新鲜血液中能够为骨折愈合提供适宜的钙离子浓度,柠檬酸钙溶解的钙离子能储存在凝血块中,可为骨折愈合后期提供所需的钙离子,柠檬酸钙作为骨生物材料具有良好的应用前景。