实验性肿瘤的联合基因治疗研究

恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年，但疗效尚未确定。治疗策略也不下12种，但何种策略为佳尚无定论。目前采用的策略多数为单一基因治疗，鉴于肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素，发病过程也是多步骤的，该研究探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究。首先克隆一系列的治疗基因，构建不同载体及调控原件，     

内污染核素对免疫细胞的损伤及细胞因子的辐射防护

机体免疫细胞对辐射敏感性很高,内污染核素能抑制免疫细胞的功能,不同性质的射线对免疫细胞分泌细胞因子功能的影响也不同,外源性加入细胞因子能增加免疫细胞的功能,提高受致死剂量照射小鼠的生存率。     

含mIL-12基因多顺反子逆转录病毒载体构建及其在肝癌细胞中的表达

构建含小鼠白细胞介素１２双亚基及新霉素磷酸转移酶基因多顺反子逆转录病毒载体,并观察其在小鼠肝癌细胞中的表达。方法利用脑心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）及脊髓灰质炎（Ｐｏｌｉｏ）病毒内核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）,连接ｍＩＬ－１２ｐ４０及ｐ３５ｃＤＮＡｓ和筛选基因新霉素磷酸转移酶（ＮｅｏＲ）,克隆至逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ中,使三个基因同时受逆转录病毒载体５’端ＬＴＲ启动子控制,转录至同一ｍＲＮＡ转录本上,通过     

实验性肿瘤的联合基因治疗研究

恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定。治疗策略也不下12种,但何种策略为佳尚无定论。目前采用的策略多数为单一基因治疗,鉴于肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的,该研究探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究。首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控原件,然后进行不同基因的联合治疗作用,并与放射治疗相结合,最后还筛选新的肿瘤治疗侯选基因,旨在为临床提供更有效的肿瘤基因治疗策略和方案。     

人TNF—α基因修饰成纤维细胞的抗肿瘤研究

为了探讨人TNF-α基因修饰的成纤维细胞在体内的抗肿瘤作用,本文应用含脑心肌炎病毒(EMCV)内核糖体进入位点(IRES)的双顺反子逆转录病毒载体pGCEN/TNF-α来转导TNF-α基因至小鼠成纤维细胞NIH3T3.人TNF-α基因修饰的成纤维细胞NIH3T3/TNF-α能持续高水平表达TNF-α,在小鼠肝癌H22细胞皮下植入后第3天或第7天,肿瘤部位直接注射2.5×10~5NIH3T3/TNF-α.或1×10~6NIH3T3/TNF-α能明显抑制肿瘤生长(P<0.05),增加小鼠存活率(P<0.025).可见人INF-α基因修饰的成纤维细胞有望成为一种安全、简便且有效的肿瘤生物治疗新途径.     

人TNF-α基因修饰成纤维细胞的抗肿瘤研究

近年来,白细胞介素4(IL-4)基因治疗的研究取得了很大进展并已试用于临床治疗晚期肿瘤.我们的实验也曾表明,IL-4基因转染的肿瘤细胞所制备的瘤苗对于实验性肺转移荷瘤小鼠具有一定疗效,该作用可能与IL-4基因的转染与表达对肿瘤细胞免疫原性的增强及IL-4对机体抗肿瘤免疫功能尤其是T细胞功能的激发有关;关于肿瘤     

浓缩铀诱发免疫细胞的放射免疫毒理效应

我们研究了浓缩铀内污染机体时诱发中枢和外周免疫细胞的免疫毒理效应。结果表明：（１）浓缩铀可抑制中枢免疫器官的胸腺细胞和骨髓细胞对３Ｈ－ＴｄＲ的自发掺入，尤其是对胸腺细胞的抑制更严重；（２）浓缩铀可阻抑外周免疫器官脾脏Ｔ、８淋巴细胞的增殖，且Ｂ淋巴细胞的受抑程度大于Ｔ淋巴细胞；（３）浓缩铀可使脾脏淋巴细胞ＩＬ－１的生成抑制，而使得ＩＬ－２的消耗减少。     

浓缩铀(UO_2F_2)诱发免疫活性细胞DNA合成刺激作用的研究

作者研究了不同水平浓缩铀（ＵＯ２Ｆ２）内污染机体后。对中枢和外周免疫活性细胞ＤＮＡ合成的刺激作用与免疫毒理效应．结果发现，当浓缩铀摄入量为１０～５００μｇ／ｋｇ体重时，脾Ｔ、Ｂ淋巴细胞和胸腺淋巴细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入显著降低（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），其ＤＮＡ合成呈现明显抑制效应．然而，当浓缩铀摄入量为０．１μｇ／ｋｇ体重时，脾ＰＨＡ反应性Ｔ淋巴细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），其ＤＮＡ合成呈现明显的刺激作用．诱发细胞增殖刺激作用的浓缩铀剂量与不同免疫活性细胞的辐射敏感性有关．应用数学方法拟合出不同免疫活性细胞的剂量效应曲线方程，呈直线平方模型．浓缩铀内污染１４天后，各免疫活性细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入率未见恢复正常．     

IL-2基因修饰成纤维细胞对肝癌荷瘤小鼠的治疗实验

目的研究双顺反子逆转录病毒载体介导ＩＬ－２基因转导成纤维细胞对小鼠肝癌的治疗作用。方法利用双顺反子逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ／ＩＬ－２将ＩＬ－２基因转导小鼠成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３，然后将分泌ＩＬ－２的成纤维细胞与６０Ｇｙγ射线照射的肝癌Ｈ２２细胞皮下植入三天前５×１０５或２．２×１０５肝癌Ｈ２２细胞皮下注射的ＢＡＬＢ／ｃ鼠。结果分泌ＩＬ－２的成纤维细胞治疗组能明显增加荷瘤小鼠的生存率（Ｐ＜０．０２５），抑制肿瘤生长（Ｐ＜０．０５），在肿瘤植入第７０天无肿瘤形成的小鼠再次注射１×１０６Ｈ２２细胞仍然不发生肿瘤。５１Ｃｒ释放试验表明来自照射Ｈ２２与分泌ＩＬ－２成纤维细胞混合液注射的小鼠脾细胞与５１Ｃｒ标记的Ｈ２２细胞共培养后，５１Ｃｒ特异释放明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结论实验结果表明ＩＬ－２基因修饰的成纤维细胞能诱导针对肝癌的特异免疫反应。