干细胞因子及其受体c-KIT对羊驼毛囊黑色素细胞增殖与分化的影响及其机制

目的 探讨SCF/c-KIT信号通路对羊驼毛囊黑色素细胞分化、增殖和定位的作用及羊驼丰富毛色性状形成的细胞学机制。 方法 选取8只成年雄性羊驼（4只有色被毛,4只白色被毛）,采用免疫组织化学方法研究SCF和c-KIT受体在羊驼皮肤组织中的表达定位;采用实时定量PCR方法分析SCF和c-KIT基因在羊驼皮肤组织中的表达水平。 结果 SCF和c-KIT受体在不同毛色皮肤组织中均有表达,但在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的表达量和表达部位存在差异;ΔΔCt法统计分析SCF和c-KIT基因在不同颜色被毛羊驼皮肤组织中的表达情况显示,SCF基因在有色被毛皮肤组织中的相对表达量是白色被毛皮肤组织的2.41倍,而c-KIT基因在有色被毛皮肤组织中的相对表达量是白色被毛组织的1.20倍。 结论 SCF/c-KIT信号通路参与调节黑色素细胞在皮肤组织中的增殖、分化;成熟黑色素细胞的数量及其在毛囊组织中的分布位置决定羊驼被毛颜色的形成;SCF信号调节不同分化程度黑色素细胞在毛囊组织中的分布。     

小鼠自然毛囊生长周期及β连环蛋白的表达

目的 观察昆明系小鼠自然毛囊生长周期的组织学特点,探讨β连环蛋白(β-catenin)在小鼠自然毛囊生长周期中的表达规律及其与毛囊生长更替的关系。 方法 采用石蜡切片HE染色、Western blotting以及免疫组织化学方法,研究小鼠（90只）毛囊的周期性变化,检测β-catenin在小鼠毛囊生长不同时期皮肤组织中的蛋白表达水平,并对其进行组织定位。 结果 处于不同生长时期的毛囊具有各期的特殊结构;Western blotting结果显示,在小鼠皮肤组织粗蛋白提取物中存在分子量约为85kD且与兔抗β-catenin多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带;免疫组织化学结果显示,β-catenin在不同毛囊生长时期的表皮、皮脂腺、根鞘和真皮乳头均有不同程度的表达。 结论 昆明系小鼠毛囊生长呈周期性变化,β-catenin在毛囊生长周期中的阳性反应与毛囊的周期性变化存在相关性,表明β-catenin在昆明系小鼠自然毛囊生长周期中起维持、促进毛囊生长的作用。     

应激猪睾丸葡萄糖转运蛋白1和葡萄糖转运蛋白2的表达与定位

目的 探讨正常和热应激条件下,葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）和葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）在成年猪睾丸的表达和定位。 方法 性成熟长白公猪9头,随机分为3组。局部阴囊热刺激组（n=3）,用自制电热毯置阴囊42 ℃加热1 h;环境热应激组（n=3）,每天置于37～40 ℃猪舍环境3 h,连续7 d,每天于热处理结束后,将实验猪驱赶回21～25 ℃猪舍环境;对照组（n=3）,饲养在21～25 ℃猪舍环境。局部热刺激6 h后和环境热应激处理结束24 h后,手术摘除双侧睾丸。用Real-time PCR、Western blotting和免疫组织化学技术检测猪睾丸组织内GLUT1和GLUT2的表达。 结果 Real-time PCR和Western blotting结果显示,与对照组相比,环境热应激组GLUT1蛋白和mRNA的表达差异不显著,局部阴囊热刺激组GLUT1蛋白和mRNA表达显著升高;环境热应激组和局部阴囊热刺激组,GLUT2蛋白和mRNA表达均显著升高。免疫组织化学结果发现,热处理前后,GLUT1蛋白在曲精小管内定位于精母细胞和圆形精子细胞;环境热应激组GLUT1蛋白染色与对照组相比,无明显差异,局部阴囊热刺激后,GLUT1染色变深,表达升高。热处理前后,GLUT2蛋白在曲精小管定位于生精细胞和支持细胞,环境热应激和局部阴囊热刺激导致GLUT2染色变深,表达升高。 结论 葡萄糖转运蛋白GLUT1和GLUT2表达于猪睾丸曲精小管,环境高温和阴囊局部热刺激导致GLUT1和GLUT2在猪睾丸的表达水平改变,提示这两种葡萄糖转运蛋白在猪精子发生过程中发挥重要作用。     

鸡实验性骨折愈合过程TGF-β1 免疫组织化学研究

目的　探索鸡实验性骨折愈合过程中骨折局部TGF β1及其含量变化。 　方法　 16只 6月龄新罗曼母鸡 ,无菌手术条件下制造右肱骨中部一致性骨折模型 ,取骨折局部 3、6、10和 15d的组织材料 ,采用SABC法对TGF β1进行检测。 　结果　SABC染色显示骨折后 3d ,TGF β1阳性物出现于血肿的细胞中 ;6dTGF β1阳性反应出现在结缔组织细胞膜上、胶原纤维和细胞外基质中 ;10d、15dTGF β1阳性物存在于软骨细胞外基质 ,与骨折后 3d相比 ,6d、10d、15dTGF β1的分布明显增加 (P <0 0 1)。 　结论　TGF β1的表达与鸡骨折愈合过程密切相关。     

Smad2和Smad4在家猫睾丸发育和精子发生中的表达与定位

目的 研究转化生长因子β(TGF-β)超家族的下游信号转导分子Smad2和Smad4蛋白,在不同发育阶段家猫睾丸中的表达和定位,探索Smad2和Smad4蛋白与家猫睾丸发育和精子发生的关系. 方法 应用免疫组织化学技术,研究Smad2和Smad4蛋白在幼年(n=3)、青春期(n=3)和性成熟(n=18)睾丸中的定位,并通过Western blotting技术对免疫组织化学中所用抗体的特异性进行了检测. 结果 免疫组织化学结果显示,Smad2和Smad4蛋白定位于各发育阶段家猫睾丸的生殖细胞、支持细胞和间质细胞的胞质中;Western blotting结果显示,多克隆兔抗Smad2和Smad4抗体与家猫睾丸蛋白提取物中分子量约为58kD、66kD的蛋白条带发生免疫阳性反应. 结论 Smad2和Smad4蛋白在家猫睾丸发育和精子发生的各个阶段均有表达,提示其参与睾丸发育和精子发生的调节.     

羊驼胚胎移植研究动态

羊驼作为中国首次引进的动物新品种,其繁殖时间较长,作为一项普遍饲养的畜牧业,存在许多不利因素。运用家畜胚胎移植技术,可以提高羊驼的繁殖速度及品质。因此,掌握胚胎移植技术,加速发展羊驼养殖业,应是目前一项重要任务。     

哺乳动物卵母细胞孤雌激活研究进展

卵母细胞激活是核移植的关键技术,也是研究哺乳动物受精机制及发育机理的有效方法。本文主要阐述了卵母细胞孤雌激活的机制及不同哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展。     

转化生长因子-β1及其信号传导分子Smad2与Smad4在羊驼睾丸的表达

目的 研究转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2、Smad4在羊驼睾丸的表达与定位,探索TGF-β1在羊驼睾丸发育及精子发生中的作用.方法 以24月龄的羊驼睾丸为研究对象,采用Western blotting技术及免疫组织化学SABC法对TGF-β1、Smad2、Smad4在羊驼睾丸的表达进行研究.结果 Western blotting结果显示,羊驼睾丸组织粗蛋白提取物中存在分子量约为25kD、52kD、62kD,与多克隆兔抗TGF-β1、Smad2、Smad4抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带;免疫组织化学结果显示,TGF-β1、Smad2、Smad4在24月龄羊驼睾丸的间质细胞、支持细胞和各级生精细胞均有不同程度的表达.结论 TGF-β1通过Smad2与Smad4传导途径参与性成熟羊驼睾丸组织的发育与精子发生的调控.