PTEN基因敲除降低辐射敏感性及其机制

目的 探讨PTEN基因敲除对辐射敏感性的影响及机制。方法 采用流式细胞术检测MEF1和MEF1/PTEN^－/－细胞内ROS水平;采用Western blot方法,检测H₂O₂和DPI预处理后AKT激酶的表达变化;采用细胞克隆形成率试验分析细胞对⁶⁰Co γ射线的敏感性。结果 PTEN基因敲除后细胞ROS水平增加,辐射敏感性降低。H₂O₂和DPI预处理后影响MEF1细胞AKT激酶活性,但对MEF1/Pten^－/－细胞无影响。 结论 PTEN基因敲除阻断了ROS对AKT的介导,AKT激酶持续活化,可能是辐射敏感性降低的重要原因。     

Pten基因敲除对过氧化物酶家族表达和活性氧水平的影响

目的:探讨Pten基因敲除后对过氧化物酶家族(Peroxiredoxins,Prdxs)水平和活性氧水平的影响.方法:采用Western印迹和化学/荧光发光分析法分别检测了在Pten / MEF和Pten-/-MEF细胞中PRDXs的表达和细胞内活性氧水平.结果:Western印迹结果显示,与Pten / MEF细胞相比,Pten-/-MEF细胞PRDX Ⅰ,Ⅱ,Ⅴ,Ⅵ蛋白水平下调,PRDX Ⅲ不变,PRDX Ⅳ上调.DCFH探针标记后流式结果显示Pten-/-MEF 细胞活性氧荧光值显著高于对照Pten / MEF细胞(P＜0.05).结论:Pten基因敲除引起数种PRDXs表达下调,细胞内活性氧水平增高.     

Flt-4在不同级别脑星形细胞瘤中的表达意义

目的：探讨不同组织病理分级的脑星形细胞瘤中血管内皮生长因子受体3（Flt-4又称VEGFR-3）的表达意义。 方法： 采用免疫组织化学方法，检测50例不同级别脑星形细胞瘤患者手术切除标本中Flt-4、血管内皮生长因子（VEGF）的表达，并用抗FⅧ因子抗体标记瘤组织血管内皮细胞，计算肿瘤内微血管密度（IMVD）。 结果： Flt-4、VEGF总阳性表达率分别为52%（26/50）、60%（30/50）。Flt-4、VEGF均与脑星形细胞瘤病理分级呈显著正相关（等级相关系数分别为0.359、0.360,P＜0.05）。 结论： 脑星形细胞瘤中有Flt-4表达，主要表达于血管内皮细胞和部分肿瘤细胞，Flt-4既可是内皮细胞自分泌产生，部分还可来自瘤细胞的旁分泌；脑星形细胞瘤中Flt-4阳性表达的脉管是血管；Flt-4的表达与星形细胞瘤的病理分级相关     

子宫平滑肌肿瘤的病理组织学观察

目的 探讨子宫平滑肌肿瘤的病理诊断标准及其预后。方法 对病例进行病理组织学观察,并用ｄｅｓｍｉｎ,ａｃｔｉｎ免疫组织化学染色。结果 多数子宫平滑肌内瘤核分裂像增多同时伴细胞特异性及凝固性坏死,子宫平滑肌瘤则无以上病理变化。子宫平滑肌肉瘤的ｄｅｓｍｉｎ和ａｃｔｉｎ阳性细胞显著低于子宫平滑肌瘤。结论 尽管核分裂诊断是子宫平滑肌肉瘤的重要指标,但不是唯一指标,应综合细胞异型,边界浸润,凝固性坏死这些改变     

Expressions of Beta-Catenin, SUFU and VEGFR-2 Proteins in MeduUoblastoma

Objective： to investigate the expressions of beta-catenin, SUFU and VEGFR-2 proteins in medulloblastoma. Methods： Immunohistochemical staining with SP method was conducted to determine the expressions of beta-catenin, SUFU and VEGFR-2 in 33 cases of medulloblastoma and 10 normal cerebellar tissues. Results： the abnormal expression rates of beta-catenin and VEGFR-2 in medulloblastoma were significantly higher than that in normal tissue. While the positive expression of SUFU gene in medulloblastoma was significantly lower than that in 10 normal cerebellar tissues, A significant negative correlation was found between beta-catenin and SUFU proteins and a positive correlation between beta-catenin and VEGFR-2 was found in medulloblastoma. Conclusion： Beta-catenin, VEGFR-2 and SUFU have important effects on the pathogenesis and development of medulloblastoma.     

环磷酰胺对人腺泡状横纹肌肉瘤细胞裸鼠移植瘤生长和形态结构的影响

目的 检测环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对人腺泡状横纹肌肉瘤细胞株PLA-802裸鼠移植瘤生长和形态结构的影响.方法 16只裸鼠右腋皮下接种PLA-802移植瘤细胞悬液后分成空白对照组(5只)、生理盐水对照组(5只)和20 mg/kg CTX治疗组(6只).接种后第7天开始,经腹腔注射给药,隔日1次,共注射10次.每2天测量1次肿瘤大小绘制移植瘤生长曲线.接种后第26天杀鼠摘取移植瘤称重,组织经制片染色后用光镜和电镜检查.结果 ①CTX治疗组移植瘤生长被明显抑制(P＜0.05),抑瘤率85.55%.②治疗后瘤细胞疏松排列成腺泡状,由纤维间质分隔,血管稀少;瘤细胞椭圆形、网拍状或短梭形;核椭圆或类圆形,大小不一;核分裂相减少.电镜见瘤细胞质内有不等量肌(微)丝,甚至有横纹肌肌原纤维结构形成.结论 CTX对人腺泡状横纹肌肉瘤PLA-802移植瘤生长具有一定程度的抑制作用,治疗后瘤组织形态结构改变.     

genistein抑制人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系SKOV3体外侵袭作用的分子机制

目的 探讨 genistein 抑制人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系 SKOV3体外侵袭作用的分子机制.方法 利用微孔滤膜培养小室进行双室联合培养,建立体外趋化运动模型,观察 genistein 对SKOV3趋化运动能力的影响;用免疫组化和原位杂交方法检测 genistein 对细胞表面黏附分子CD44v6、基质金属蛋白酶及其组织抑制物MMP-9/TIMP-1,MMP-2/TIMP-2蛋白和mRNA表达水平的影响.结果 20 μmol/L和40 μmol/L genistein处理SKOV3细胞后,细胞的运动能力分别下降至对照组的 (46.9±5.8)%和(28.3±4.7)%,差异显著(P＜0.01).免疫细胞化学和原位杂交检测结果表明:和对照组相比,20 μmol/L genistein处理SKOV3细胞后48 h,CD44v6、 MMP-9及MMP-2的蛋白和mRNA表达均减弱(P＜0.05),而TIMP-1和TIMP-2的蛋白和mRNA表达水平增强(P＜0.05).结论 genistein明显抑制SKOV3细胞的趋化运动能力、降低SKOV3细胞黏附分子CD44v6的表达、下调MMP-9与MMP-2表达,并上调TIMP-1与TIMP-2表达,这可能是其抑制人卵巢癌细胞系SKOV3体外侵袭作用的重要分子基础.     

重组E.coli. LLO/OVA明显增强小鼠CD11c细胞活性及抗肿瘤免疫

目的 探讨重组E.coli. LLO/OVA 诱导C57BL/6小鼠机体免疫的途径,观察其免疫后小鼠机体抑制B16-OVA黑色素瘤的效果.方法 磁珠分离E.coli. LLO/OVA及E.coli. OVA免疫后小鼠脾脏CD11c、CD4 和CD8 T细胞并检测CD11c细胞诱导同源CD4 和CD8 T增殖水平和细胞因子分泌程度;流式细胞检测小鼠脾脏内肿瘤抗原OVA257-264 SIINFEKL特异的细胞毒T细胞含量.比较两种E.coli. 免疫后,恶性黑色素瘤B16-OVA在小鼠肺内形成瘤结节的数量.结果 与E.coli. OVA相比, E.coli. LLO/OVA免疫后小鼠脾脏CD11c细胞诱导同源CD4 T细胞增殖作用增强、IL-2分泌增高;同时诱导CD8 T细胞增殖和IFN-γ分泌的作用也明显增强;OVA257-264 SIINFEKL特异的CD8 T细胞含量也明显增高;小鼠肺内形成B16-OVA瘤结节平均数明显减少. 结论 E.coli. LLO/OVA有效地诱导小鼠CD11c细胞活化,增强其对CD4 T细胞增殖和IL-2分泌以及对CD8 T细胞增殖、IFN-γ分泌的作用,诱导了更多的OVA特异的CD8 T细胞,使机体产生了更强的抗肿瘤免疫.     

Survivin在大肠癌中的表达及意义

目的:检测抗凋亡基因survivin 在大肠癌组织中的表达情况及与大肠癌组织生物学特性的关系.方法:收集62例大肠癌组织及25例正常大肠组织,采用RT-PCR 方法,检测大肠癌中survivin mRNA 表达水平,与正常大肠组织进行比较分析,并用免疫组织化学方法检测survivin 蛋白表达.结果:大肠癌组织中survivin mRNA 阳性表达率为58.1%(36/ 62),大肠癌组织survivin 蛋白阳性表达率为56.4%( 35/62),而正常大肠组织无1例表达,且survivin 表达与病理分级、有无淋巴结转移等恶性生物学特性密切相关.结论:Survivin的高表达与大肠癌具有密切相关性,提示survivin 对于大肠癌的预后可能具有重要意义.     

亲验式教学方式在临床病理学讨论课中的应用

亲验式教学方式已逐渐形成一种新的现代课堂教学模式。多年的探索表明,亲验式教学方式在临床病理讨论课中可得以灵活运用。