自噬活性的降低增加人鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性

目的 研究自噬与人鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性之间的关系。方法 采用慢病毒介导的RNA干扰技术建立稳定沉默自噬相关基因ATG5的人鼻咽癌CNE-2细胞系,实验分为未转染的CNE-2细胞组(对照组)、转染NC-shRNA的CNE-2细胞组(NC组)及转染ATG5-shRNA的CNE-2细胞组(ATG5组),应用CCK-8法、流式细胞术及克隆形成实验检测细胞增殖、凋亡及放射敏感性的变化。结果 CCK-8实验结果显示,与对照组和NC组相比,各剂量点ATG5组的细胞存活率均显著降低(F=3.755、46.086、8.609、44.160,P<0.05),绘制细胞生存曲线可见下调ATG5的表达后可以增加CNE-2细胞的放射敏感性;流式细胞术结果显示,经6 Gy X射线照射后,ATG5组细胞的凋亡率较NC组及对照组明显升高(F=394.876,P<0.05);克隆形成实验结果提示沉默ATG5基因可增加鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性。结论 降低鼻咽癌CNE-2细胞的自噬活性可以增强其放射敏感性。     

骨桥蛋白与头颈部肿瘤的研究

骨桥蛋白是一种具有多种功能的磷酸化糖蛋白,不仅广泛分布于骨基质等正常组织细胞中,而且在许多肿瘤组织中都过量表达。多项研究表明,骨桥蛋白通过和其受体的相互作用等机制影响着肿瘤的发生、发展和转移,而其与甲状腺癌、喉癌等头颈部肿瘤的密切关系也逐渐被证实。     

10Gy X射线照射鼻咽癌移植瘤组织差异表达蛋白质的初步筛选

目的 比较不同放射敏感性的鼻咽癌裸鼠移植瘤组织蛋白质表达的差异,筛选出与鼻咽癌放射抗拒性相关的蛋白质。方法 建立人鼻咽低分化鳞癌细胞（CNE-2）及其放射抗拒性细胞（CNE-2R）裸鼠移植瘤模型,予X射线10 Gy单次照射移植瘤,提取瘤体组织总蛋白质并酶解成肽段,用i TRAQ试剂分别标记后再用二维液相色谱分离,在LTQ-Orbitrap高分辨率质谱仪上鉴定并筛选差异表达的蛋白质,并对差异表达的蛋白质进行基因本体论（Gene Ontology,GO）基因功能分类。结果共鉴定出差异表达的蛋白质61个,其中上调17个,下调有44个,GO分析显示差异表达的蛋白质主要涉及细胞周期调控、分解代谢、信号通路调节、压力应激反应及氧化还原反应等生物学过程。结论 Annexin2、PDIA3、Ubiquitin、14-3-3δ/ζ、CKAP4、HSPA8、NLRC4等差异表达的蛋白质可能与鼻咽癌放射抗拒性相关。