昆明小鼠3.5 d和4 d囊胚不同分离方法的比较

背景：远交系的昆明小鼠作为中国自然科学研究主要实验动物,其胚胎干细胞建系的成功率一直很低。 目的：探讨昆明小鼠胚胎干细胞体外分离培养的最佳方法和最适合的采胚时间。 方法：采集孕3.5 d和4 d的囊胚分别以免疫外科法和全胚培养法在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上分离和克隆昆明小鼠胚胎干细胞集落。 结果与结论：免疫外科法和全胚法培养3.5 d囊胚的内细胞团贴壁率和原代克隆形成率差异均不显著(P  > 0.05);全胚法培养4 d囊胚的内细胞团贴壁率显著高于免疫外科法(P < 0.05),但原代克隆形成率显著低于免疫外科法(P  < 0.05);全胚法培养4 d囊胚的原代克隆形成率显著高于3.5 d囊胚(P  < 0.05);免疫外科法分离4 d囊胚内细胞团的贴壁率和原代克隆形成率显著高于以同样方法分离培养的3.5 d囊胚(P  < 0.05)。结果显示用免疫外科法分离4 d囊胚更适合于昆明小鼠胚胎干细胞的体外分离培养。     

被动吸烟对大鼠卵泡发育和胚胎发育的影响

目的探讨被动吸烟对大鼠卵泡发育和胚胎发育的影响。方法取4周龄SD雌鼠60只,随机分为实验组(40只)和对照组(20只)。实验组大鼠给予6h/天被动吸烟处理,对照组为无烟同等条件饲养。处理8周后分别取实验组和对照组雌鼠各10只制作卵巢组织切片,观察卵泡发育情况;各组余鼠按♂/♀1︰3合笼,合笼后将实验组孕鼠随机分为孕后吸烟戒断组和孕后继续被动吸烟组。孕满18 d剖腹取胎,记录各项发育指标。结果实验组受孕率较正常对照组明显偏低(P0.05);实验组大鼠卵巢的次级卵泡(P0.01)和成熟卵泡(P0.05)较对照组明显减少,闭锁卵泡显著增多(P0.01);胎鼠存活率在孕后被动吸烟组显著低于对照组和孕后吸烟戒断组(P0.01);与对照组比较,胎儿宫内发育迟缓(IUGR)发生率在孕后吸烟戒断组(P0.05)和孕后继续被动吸烟组(P0.01)均具有统计学意义,在体重、身长、尾长方面差异极显著(P0.01);被动吸烟可引起胎鼠腹腔出血(P0.01)和心脏淤血(P0.05)等病理改变,亦可导致骨骼发育迟缓(45.5%17.3%,P0.05;58.817.3 P0.01),与对照组相比具有统计学意义。结论被动吸烟严重影响大鼠卵巢的卵泡发育和胚胎发育,且孕后戒烟并不能完全消除被动吸烟对胚胎发育的影响。     

昆明小鼠3.5d和4d囊胚不同分离方法的比较

背景:远交系的昆明小鼠作为中国自然科学研究主要实验动物,其胚胎干细胞建系的成功率一直很低.目的:探讨昆明小鼠胚胎干细胞体外分离培养的最佳方法和最适合的采胚时间.方法:采集孕3.5 d和4 d的囊胚分别以免疫外科法和全胚培养法在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上分离和克隆昆明小鼠胚胎干细胞集落.结果与结论:免疫外科法和全胚法培养3.5 d囊胚的内细胞团贴壁率和原代克隆形成率差异均不显著(P > 0.05);全胚法培养4 d囊胚的内细胞团贴壁率显著高于免疫外科法(P < 0.05),但原代克隆形成率显著低于免疫外科法(P < 0.05);全胚法培养4 d囊胚的原代克隆形成率显著高于3.5 d囊胚(P < 0.05);免疫外科法分离4 d囊胚内细胞团的贴壁率和原代克隆形成率显著高于以同样方法分离培养的3.5 d囊胚(P < 0.05).结果显示用免疫外科法分离4 d囊胚更适合于昆明小鼠胚胎干细胞的体外分离培养.     

昆明小鼠3.5 d和4 d囊胚不同分离方法的比较*

背景：远交系的昆明小鼠作为中国自然科学研究主要实验动物,其胚胎干细胞建系的成功率一直很低。 目的：探讨昆明小鼠胚胎干细胞体外分离培养的最佳方法和最适合的采胚时间。 方法：采集孕3.5 d和4 d的囊胚分别以免疫外科法和全胚培养法在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上分离和克隆昆明小鼠胚胎干细胞集落。 结果与结论：免疫外科法和全胚法培养3.5 d囊胚的内细胞团贴壁率和原代克隆形成率差异均不显著(P > 0.05);全胚法培养4 d囊胚的内细胞团贴壁率显著高于免疫外科法(P < 0.05),但原代克隆形成率显著低于免疫外科法(P < 0.05);全胚法培养4 d囊胚的原代克隆形成率显著高于3.5 d囊胚(P < 0.05);免疫外科法分离4 d囊胚内细胞团的贴壁率和原代克隆形成率显著高于以同样方法分离培养的3.5 d囊胚(P < 0.05)。结果显示用免疫外科法分离4 d囊胚更适合于昆明小鼠胚胎干细胞的体外分离培养。     

蚊香熏染对大鼠胚胎发育的影响

目的探讨短期高浓度蚊香烟熏对大鼠胚胎发育的影响。方法采用自制半封闭式烟熏染毒箱对实验组(分为孕前熏染孕后戒断组和孕前孕后持续熏染组),7周龄健康雌鼠进行8 h/天高浓度蚊香熏染,对照组为同期正常饲养;处理50 d后按雄雌1∶3合笼,孕满19 d剖腹取胎观察致畸效果。计数各组孕鼠胚胎植入数、活胎数、死胎数、吸收胎数、畸胎数,计算胚胎存活率和畸胎率;计量各胚胎体质量、身长、尾长;利用统计学软件进行结果分析。结果各实验组均存在异常胚胎。与对照组比较,胎鼠存活率(P0.017)以及胚胎体质量、身长、尾长等在孕后持续熏染组的差异均具有统计学意义(P0.05)。结论短期高浓度蚊香熏染显著影响胚胎生长发育,并导致异常胚胎的发生。     

昆明小鼠3.5d和4d囊胚不同分离方法的比较

背景：远交系的昆明小鼠作为中国自然科学研究主要实验动物,其胚胎干细胞建系的成功率一直很低.目的：探讨昆明小鼠胚胎干细胞体外分离培养的最佳方法和最适合的采胚时间.方法：采集孕3.5 d和4 d的囊胚分别以免疫外科法和全胚培养法在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上分离和克隆昆明小鼠胚胎干细胞集落.结果与结论：免疫外科法和全胚法培养3.5 d囊胚的内细胞团贴壁率和原代克隆形成率差异均不显著（P 〉 0.05）;全胚法培养4 d囊胚的内细胞团贴壁率显著高于免疫外科法（P 〈 0.05）,但原代克隆形成率显著低于免疫外科法（P 〈 0.05）;全胚法培养4 d囊胚的原代克隆形成率显著高于3.5 d囊胚（P 〈 0.05）;免疫外科法分离4 d囊胚内细胞团的贴壁率和原代克隆形成率显著高于以同样方法分离培养的3.5 d囊胚（P 〈 0.05）.结果显示用免疫外科法分离4 d囊胚更适合于昆明小鼠胚胎干细胞的体外分离培养.     

水牛胎儿成纤维细胞低密度培养条件的研究

目的:探讨胰岛素和务件培养液对低密度水牛胎儿成纤维细胞增殖的影响.方法:根据是否添加胰岛素(2IU/mL)或条件培养液.以及成纤维细胞的培养密度(1、2、4、6、8个/滴),分15个处理组.结果:胰岛素(2 IU/mL)培养液组细胞的平均增殖指数显著高于条件培养液组和对照组(3.49±0.07 vs 1.47 4±0.29,2.97 4±0.17;P<0.05),而条件培养液组细胞的平均增殖指数不及对照组,呈显著差异(1.47±0.29 vs 2.97 4±0.17;P<0.05).同时,细胞增殖指数随细胞密度的逐渐增大而呈上升趋势.结论:适宜浓度的胰岛素对水牛胎儿成纤维细胞的增殖具有促进作用;单个成纤维细胞在体外能培养增殖,但其增殖速度低于群体培养.     

孕期被动吸烟动物模型的制备方法概述

香烟烟雾中含有大量的有害化合物,长期处于被动吸烟的环境中不仅可致亲代多器官系统发生病变,亦可引起子代神经系统发育迟缓和认知障碍。孕期被动吸烟的危害越来越受到关注,但目前国内外被动吸烟动物模型的构建方法多种多样,尚无通用的造模方法。本文结合相关文献对孕期被动吸烟模型制备的种类和方法进行综述,为进一步做好被动吸烟的相关研究提供参考。