神经纤毛蛋白-1及血管内皮生长因子促HaCaT细胞增殖的研究

【摘要】 目的 探讨神经纤毛蛋白-1（neuropilin-1,NRP-1）和细胞外调节蛋白激酶（ERK）在血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor ,VEGF）促HaCaT 细胞增殖中的可能机制。方法 培养HaCaT细胞,转染NRP-1质粒EX-O0008-M02,采用逆转录（RT）-PCR法检测转染后NRP-1 mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测NRP-1蛋白质表达。将部分培养的HaCaT细胞分为脂质体对照组、对照质粒组以及目的质粒组分别予以脂质体、对照质粒pReceiver-M02及目的质粒EX-O0008-M02转染,各组分别加入PBS、MEK1/2抑制剂（U0126）、VEGF或U0126联合VEGF进行处理后,噻唑蓝（MTT）法检测HaCaT细胞增殖的改变,蛋白免疫印迹法观察ERK1/2的磷酸化情况以及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况。采用One-way ANOVA 检验组间差异,LSD法进行多重比较和校正。结果 RT-PCR和蛋白免疫印迹实验结果提示EX-O0008-M02质粒转染可有效促进HaCaT细胞NRP-1 mRNA及其蛋白质的表达。与脂质体对照组（A570值0.63 ± 0.07）及对照质粒组（A570值0.62 ± 0.13）比较,目的质粒组HaCaT细胞增殖活性（A570值0.88 ± 0.14）明显增强,F = 8.755,P < 0.05。与对照质粒VEGF刺激组（A570值0.88 ± 0.10）比较,目的质粒VEGF刺激组HaCaT细胞的增殖活性（A570值1.14 ± 0.18）亦明显增强,F = 4.591,P < 0.05。与目的质粒VEGF刺激组比较,U0126预处理可以明显抑制VEGF对HaCaT细胞的促增殖作用（A570值0.50 ± 0.13,F = 42.106,P < 0.01）。蛋白免疫印迹结果提示与对照质粒转染细胞比较,目的质粒转染后VEGF对HaCaT细胞ERK1/2的促磷酸化及促PCNA表达得到明显提高,然而此作用可以被U0126有效抑制。结论 ERK1/2信号通路的激活在NRP-1蛋白介导的VEGF促HaCaT细胞增殖作用中可能发挥关键性作用。 【关键词】 神经纤毛蛋白质1; 角蛋白细胞; 血管内皮生长因子类; 糖尿病足     

高通量测序技术在黄连解毒汤抗白念珠菌机制研究中的应用及探讨

白念珠菌（Candida albicans）是临床上发生最为普遍的致病真菌，严重时可危及生命，目前主要以三唑类药物进行防治。但是由于药物长期广泛的使用及其作用位点的单一性，导致耐药问题日益突出。中药黄连解毒汤有良好的抑菌效果，并极大增强西药杀菌作用，但至今相关其分子机制的研究鲜有涉及。本文在阐述目前国内外现有高通量基因测序技术的基础上，重点探讨了高通量技术在黄连解毒汤抗白色念珠菌机制研究中的应用。     

柴胡疏肝散加味治疗寻常痤疮疗效观察

目的:观察柴胡疏肝散加味治疗寻常痤疮的疗效.方法:将82例患者按随机数字表法分为两组各41例,治疗组予柴胡疏肝散加味治疗,对照组予盐酸多西环素片治疗,疗程28天.结果:治疗组治愈率、有效率分别为51.22％、85.37％;对照组分别为31.71％、75.61％;两组比较差异均具有显著性意义(P＜0.05).结论:柴胡疏肝散加味治疗痤疮临床疗效满意.