干扰趋化因子Fractalkine的表达对胰腺癌细胞株生物学功能的影响

目的 探讨阻断趋化因子Fractalkine(FKN)对胰腺癌细胞株SW-1990和PNAC-1生物学功能的影响.方法 腺病毒作为载体包装FKN-小干扰RNA(siRNA),转染人胰腺癌细胞株SW-1990和PNAC-1.应用克隆形成实验、MTT法和细胞侵袭实验检测FKN-siRNA转染与否、胰腺癌细胞增殖和侵袭力的变化.Western印迹法和RT-PCR检测转染FKN-siRNA的胰腺癌细胞FKN、TNF-α和IL-6蛋白和mRNA的表达.统计学处理采用单因素方差分析.结果 FKN-siRNA转染人胰腺癌细胞株SW-1990和PNAC-1后,与对照组的克隆数[分别为(1.97％±0.25％)和(1.77％±0.25％)]和阴性FKN-siRNA组的克隆数[分别为(2.10％±0.30％)和(1.97％±0.25％)]相比,细胞克隆增大,克隆数[分别为(5.27％±0.35％)和(4.60％±0.30％)]增多,差异均有统计学意义(F=113.51、103.86,P值均＜0.05).MTT实验48 h和72 h后,转入FKN-siRNA的转染人胰腺癌细胞株SW-1990和PNAC-1吸光度(48 h时分别为1.28±0.07和1.19±0.14;72 h时分别为1.49±0.11和1.52±0.16)高于对照组([48 h时分别为0.80±0.03和0.74±0.11;72 h时分别为0.89±0.03和0.93±0.04)和阴性FKN-siRNA组(48 h时分别为0.85±0.02和0.76±0.05;72 h时分别为0.89±0.02和1.07±0.09),差异均有统计学意义(F=83.80、71.99、17.19、23.51,P值均＜0.05).细胞侵袭实验中,转入FKN-siRNA的细胞侵袭力强于对照组和阴性FKN-siRNA组,差异有统计学意义(F=37.37、9.08,P值均＜0.05).FKN-siRNA转染后,SW-1990和PNAC-1细胞中,FKN蛋白(F=118.93、88.62)和mRNA(F=47.91、72.59)表达水平下降,同时TNF-α和IL-6的蛋白(FTNF-α=112.90、77.88,FIL-6=165.27、286.49)和mRNA(FTNFα=47.93、45.19,FIL-6=36.41、23.67)表达水平增高,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 应用siRNA技术静默趋化因子FKN的功能后,胰腺癌细胞株的增殖活性和侵袭力增强,表明FKN可能抑制了胰腺癌细胞的生物学活性.     

PIAS1基因沉默对雨蛙肽诱导胰腺腺泡细胞凋亡的影响

活化STAT蛋白抑制物(PIAS)1基因沉默可增强雨蛙肽诱导的胰腺腺泡细胞炎症反应。目的:探讨PIAS1基因沉默对雨蛙肽刺激胰腺腺泡细胞凋亡的影响。方法:AR42J胰腺腺泡细胞在Lipofectamine~(TM)2000介导下转染PIAS1-siRNA和阴性siRNA。将细胞分为PIAS1-siRNA+雨蛙肽组、阴性siRNA+雨蛙肽组、脂质体+雨蛙肽组、PBS+雨蛙肽组和对照组。以DNA Ladder、Hoechst 33258染色检测细胞凋亡情况,流式细胞术测定细胞周期和细胞凋亡率,RT-PCR和蛋白质印迹法检测1353、Bax、Bcl-2、caspase-3 mRNA和蛋白表达。结果:与其余各组相比,PIAS1-siRNA+雨蛙肽组DNA梯度裂解条带明显增加,荧光着色阳性细胞数增多;G1期细胞数增多,S期细胞数减少,细胞凋亡率增加;p53、Bax、caspase-3 mRNA和蛋白表达明显上调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达下调(P均0.05)。结论:PIAS1基因沉默可增强雨蛙肽活化的caspase-3凋亡途径诱导的胰腺腺泡细胞凋亡,为通过调控PIAS1表达治疗急性胰腺炎提供新的理论依据。     

CX3CR1在大鼠重症急性胰腺炎继发急性肾损伤中的表达及作用

目的:炎症因子在重症急性胰腺炎（sever acute pancreatitis,SAP）继发急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）中起重要作用,探讨趋化因子受体CX3CR1在大鼠SAP继发AKI的表达及其作用.方法:30只♂SD大鼠,随机分为SAP组、轻型急性胰腺炎（mild acute pancreatitis,MAP）组及假手术（sham operation,SO）组,每组10只,以3.5%牛磺胆酸钠建立SAP模型,以20%L-精氨酸建立MAP模型.光镜下观察胰腺及肾脏组织病理学表现;检测血清淀粉酶、肌酐及尿素氮水平;蛋白质印迹法及免疫组织化学法检测肾脏组织CX3CR1的表达及定位.结果:SAP组胰腺及肾脏组织病理学评分、血清淀粉酶、肌酐、尿素氮及肾脏组织CX3CR1蛋白表达水平均较MAP组及SO组显著升高（P<0.05）.Spearman等级相关系数及Peason相关系数分析示,肾脏组织CX3CR1表达水平与肾脏组织病理学评分、血清肌酐及尿素氮水平呈正相关（r₁=0.878,P<0.01;r₂=0.829,P<0.01;r₃=0.78,P<0.01）.结论:趋化因子受体CX3CR1参与SAP继发AKI过程,其水平可反映AKI严重程度.     

长链非编码RNA转化生长因子-β诱导HOXA转录物调控KHDRBS3介导的肿瘤干细胞机制研究

目的研究长链非编码RNA(LncRNA)转化生长因子(TGF)-β诱导HOXA转录物(HIT)在胰腺癌组织中的表达及其与细胞转移间的关系及机制。方法培养人肾上皮细胞系293T并进行HIT干扰载体的慢病毒细胞包装,构建Capan-1干扰HIT细胞模型,分为对照组、干扰1#组及干扰2#组,以Transwell侵袭及迁移实验检测各组细胞侵袭及迁移数量的变化,以蛋白质印迹(Western Blot)法检测各组细胞KHDRBS3及CD44的蛋白表达变化。结果对照组、干扰#1组及干扰#2组中HIT mRNA表达水平分别为1.00±0.07,0.36±0.02及0.30±0.03,KHDRBS3 mRNA表达水平分别为1.00±0.11,1.22±0.13及0.93±0.09,CD44 mRNA表达水平分别为1.00±0.09,0.61±0.06及0.46±0.04,KHDRBS3蛋白相对表达水平分别为0.81±0.06,0.12±0.01及0.18±0.02,CD44蛋白相对表达水平分别为0.57±0.06,0.19±0.02及0.23±0.03,每视野侵袭细胞数分别为(66.0±7.4),(32.5±5.1)和(26.1±5.8)个,每视野迁移细胞数分别为(71.6±8.0),(21.5±3.7)及(24.9±4.2)个,干扰#1组及干扰#2组侵袭及迁移细胞数显著低于对照组(P<0.01);干扰1#组及干扰2#组KHDRBS3蛋白及CD44 mRNA和蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)。结论LncRNA HIT在胰腺癌组织中高表达,且可通过激活KHDRBS3/CD44通路,促进胰腺癌细胞的侵袭转移能力。     

趋化因子Fractalkine通过调控IL-6/STAT3信号通路对人胰腺癌细胞株增殖和侵袭的影响研究

目的 探讨趋化因子Fractalkine(FKN)通过调控白细胞介素(IL)-6/信号传导与转录激活因子(STAT)3信号通路对人胰腺癌细胞株PANC-1和SW-1990增殖、侵袭的影响.方法 以腺病毒为载体构建、合成FKN-小干扰RNA(siRNA)并转染PANC-1和SW-1990.应用CCK-8法和Transwell检测细胞增殖和侵袭力,蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测FKN、IL-6和STAT3蛋白及mRNA的表达.结果 转染FKN-siRNA 24 h时,PANC-1及SW-1990各组细胞吸光度值(A值)无明显变化,在48 h和72 h时,FKN-siRNA组A值明显高于对照组和FKN-siRNA阴性组(P＜0.05).转染FKN-siRNA后,PANC-1及SW-1990 FKN-siRNA组细胞侵袭力明显强于对照组和FKN-siRNA阴性组(P＜0.05).PANC-1及SW-1990转染FKN-siRNA后,与对照组和FKN-siRNA阴性组相比较,FKN-siRNA组细胞FKN蛋白和mRNA的表达明显减少(P＜0.05),IL-6与STAT3蛋白和mRNA的表达明显增加(P＜0.05).结论 趋化因子FKN可能通过IL-6/STAT3信号通路对胰腺癌细胞生物学活性发挥了抑制作用.     

以急性胰腺炎起病的胰腺癌患者的临床特征分析

目的 探讨以急性胰腺炎(AP)起病的胰腺癌(PC)患者的临床特征.方法 回顾性分析2009年9月1日至2019年9月30日宁夏医科大学总医院收治的34例以AP起病的PC患者(病例组)的临床资料,选取同期单纯PC患者(单纯PC组)及AP患者(AP组)为对照.收集及分析患者入院时一般临床资料,血清淀粉酶、结合胆红素、CA199、CEA,腹部B超,腹部增强CT,内镜逆行性胰胆管造影(ERCP)等检查血清学和影像学特征.结果 病例组血清淀粉酶较单纯PC组明显升高(P＜0.01),而AP组血淀粉酶较病例组更高(P＜0.05);病例组CA199、CEA、结合胆红素较AP组明显升高(P＜0.05).影像学检查方面,病例组胰管扩张、肝内外胆管扩张等特点与单纯PC组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),而病例组胰管扩张、肝内外胆管扩张与AP组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 以AP起病的PC患者的临床症状反复,血清学检查易出现血清淀粉酶、CA199、结合胆红素的升高,影像学检查易出现胰管扩张和肝内外胆管扩张.     

非甾体类抗炎药和幽门螺杆菌与消化性溃疡发病关系的临床分析

目的分析非甾体类抗炎药(NSAIDs)、幽门螺杆菌(Hp)与消化性溃疡发病的关系。方法对溃疡组与对照组进行询问服用NSAIDs史,采用快速尿素酶试验检测是否感染Hp。应用病例对照研究的方法,进行统计学处理与分析,采用单因素分析及多因素分析的方法计算病例组和对照组暴露于NSAIDs和Hp这一事件的优势比(OR)来评价发生消化性溃疡的相对危险度。结果①服用NSAIDs的消化性溃疡OR值为2.225;②服用NSAIDs发生消化性溃疡并发上消化道出血的OR值为3.635;③服用NSAIDs发生胃溃疡的OR值为2.537;发生十二指肠溃疡的OR值为1.996;④单纯感染Hp的消化性溃疡患者OR值为6.85,单纯服用NSAIDs的消化性溃疡患者OR值为6.10,既服用NSAIDs,且感染Hp的消化性溃疡患者OR值为13.70。结论①服用NSAIDs发生消化性溃疡的机率较不服用NSAIDs的大;②服用NSAIDs发生消化性溃疡并发上消化道出血的风险高于不服用NSAIDs;③服用NSAIDs发生胃溃疡比发生十二指肠溃疡的机率高;④Hp感染者同时应用NSAIDs增加发生消化性溃疡的危险性。     

以呕吐为主要表现的颅脑疾患11例临床误诊分析

目的:探讨以呕吐起病的颅脑疾患临床误诊原因及疾病的特点。方法:对11例患者的一般临床资料、辅助检查进行回顾性分析。结果:11例以呕吐为主诉收入消化内科的患者确诊为颅脑疾患。结论:对患者的临床表现进行综合判断，正确评价症状、体征的意义，影像学辅助检查可以减少对疾病的误诊与漏诊。     

五种评分系统预测高甘油三酯血症性急性胰腺炎严重程度的比较

目的 探讨PASS评分、BISAP评分、APACHE-Ⅱ评分、HAPS评分和Ranson评分五种评分系统对高甘油三酯血症性急性胰腺炎(HTGAP)病情和预后评估的价值。方法 回顾性分析宁夏医科大学总医院2016年1月—2022年1月收治的300例HTGAP患者的临床资料,根据患者病情程度分为轻症急性胰腺炎、中度重症急性胰腺炎、重症急性胰腺炎三个组别,比较三组患者的临床资料和评分系统差异,计数资料组间比较采用χ²检验,正态方差齐的计量资料采用方差分析,非正态分布的计量资料三组间比较采用Kruskal-Wallis H检验。根据病情程度是否重症,绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),比较指标的ROC曲线下面积(AUC)。结果 三组间PASS评分(χ²=219.351)、Ranson评分(χ²=83.084)、APACHE-Ⅱ评分(χ²=43.388)和BISAP评分(χ²=50.785)差异均有统计学意义(P值均<0.01)。在病情严重程度的评估和预测方面,PASS评分的敏感...