线粒体动力学介导冠心病血瘀证心肌能量代谢

目的 以冠心病血瘀证形成过程中3个阶段大鼠模型为切入点,从线粒体融合-分裂动态变化的角度探索冠心病血瘀证形成过程能量变化的机制。方法 30只大鼠随机分为空白组6只和模型组24只。空白组给予普通饲料喂养,模型组大鼠高脂饲料适应性喂养7 d后进行维生素D₃（VitD₃,30万 U·kg^-1）灌胃,14 d后再予以VitD₃灌胃（20万 U·kg^-1）,继续高脂饲料喂养21 d后,随机选择6只大鼠为血瘀证前期组,进行模型验证并同时取材;其余大鼠继续高脂饲养30 d后随机选择6只为亚血瘀证期组;剩下的大鼠为心血瘀阻证期组,继续高脂饲养的同时予以皮下多点注射异丙肾上腺素（ISO,5 mg·kg^-1）连续3 d,1周后记录心电图。采用透射电镜观察线粒体形态、数量变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测线粒体动力学蛋白表达量,免疫荧光技术检测相关蛋白的细胞定位。结果 与空白组比较,血瘀证前期组、亚血瘀证期组总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平明显上调（P<0.05）;与空白组比较,血瘀证前期组血液流变学指标明显上调（P<0.05）。空白组主动脉三层膜结构完整;血瘀证前期组中膜开始出现明显的钙化现象,内膜少量炎性细胞附着;亚血瘀证组动脉内膜下及中膜平滑肌出现空腔结构;心血瘀阻证组动脉管壁三层结构均严重破坏。空白组心电图提示P波规律出现,QRS波波形规律,无宽大畸形,S-T段未见明显压低及抬高;血瘀证前期组心电图与空白组心电图对比未见明显异常;亚血瘀证期组心电图出现J点上抬趋势,S-T段有稍许抬高,但抬高程度≤0.1 mV;心血瘀阻证期心电图提示S-T段明显压低,压低程度>0.1 mV,J点压低>0.1 mV。空白组线粒体大小、形态正常,嵴清晰致密;血瘀证前期组线粒体呈梭形,嵴稀疏;亚血瘀证期组部分线粒体形态上显著拉长,甚至出现空泡样改变;心血瘀阻证期组线粒体呈现破碎状态。与空白组比较,模型组线粒体融合蛋白2（Mfn2）,动力学相关蛋白1（Drp1）,分裂蛋白1（Fis1）表达均明显升高（P<0.05,P<0.01）;与血瘀证前期组比较,心血瘀阻证组Mfn2表达下调（P<0.05）;与空白组及血瘀证前期组比较,亚血瘀证组、心血瘀阻证组视神经萎缩症蛋白1（OPA1）表达下调（P<0.05,P<0.01）;与血瘀证前期组比较,亚血瘀证组Drp1,Fis1蛋白表达明显上调（P<0.05,P<0.01）;与亚血瘀证组比较,心血瘀阻证组Mfn2,Drp1表达下调（P<0.01）。与空白组比较,血瘀证前期组及亚血瘀证组Mfn2及OPA1在线粒体中广泛聚集,而在心血瘀阻证期Mfn2红染明显变少;Drp1/Fis1在空白组及血瘀证前期组荧光表现微弱,而在亚血瘀证组及心血瘀阻证组荧光强度明显。结论 心肌细胞线粒体动力学随着心肌细胞能量需求的改变而变化。Mfn2在冠心病血瘀证形成过程早期阶段以融合效应为主,随着病程的逐渐发展,Mfn2开始介导线粒体自噬过程;OPA1在内膜融合及嵴的完整性中发挥作用,OPA1表达量下降与冠心病血瘀证加速发展密切相关;Drp1与Fis1将受损的线粒体分离出来为线粒体自噬作准备的过程有利于缓解机体能量需求和供应失衡的状态。     

线粒体质量控制体系介导心肌缺血再灌注损伤的治疗策略

冠状动脉疾病是最常见的心血管疾病,最初的器官血流中断和随后的器官血流恢复所产生的心肌缺血/再灌注(ischemia reperfusion,I/R)损伤是急性心肌梗死后伴随各种心脏再灌注治疗策略的重要临床难题。虽然血流量的恢复对于氧气的供应是必要的,但再灌注在促进心肌梗死边缘区血流恢复和心肌细胞挽救的同时,也加重了心肌损伤。线粒体功能障碍已被报道为I/R损伤的原因之一,在介导心肌损伤病理生理过程中起着至关重要的作用。主要综述了I/R损伤中线粒体质量控制系统的分子机制以及确立了以线粒体为潜在治疗靶点的可能性。     

基于代谢组学技术的冠心病血瘀证不同进展阶段大鼠潜在生物标志物及代谢通路研究

目的通过超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-TOF/MS)的非靶向代谢组学方法探索冠心病血瘀证形成过程中大鼠心肌组织代谢特征,寻找潜在的生物标志物,为基于代谢组学的心肌保护相关治疗措施寻找有意义的靶点。方法取27只SD大鼠作为模型组制备冠心病血瘀证模型,另设空白组8只。模型组大鼠采用高脂饲料喂养+维生素D3灌胃+皮下注射异丙肾上腺素方法分3个阶段进行冠心病血瘀证模型的逐步制备。通过UPLC-TOF/MS技术获取大鼠心肌组织内源性小分子代谢物,利用SIMCA 14.1软件和MetaboAnalyst5.0软件进行组间差异性代谢物筛选及相关代谢通路分析,使用SPSS21.0对组间差异性代谢物进行定量分析,受试者工作特征(ROC)曲线评估特征代谢物临床诊断效能。结果筛选出磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、1-酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、L-苯丙氨酸、牛磺酸共5种差异最为显著的潜在生物标志物,涉及甘油磷脂代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢,牛磺酸和亚牛磺酸代谢4条主要差异代谢通路。ROC曲线分析显示,特征代谢物曲线下面积均大于0.7。结论冠心病血瘀证不同进展阶段大鼠心肌组织代谢组学出现改变,其病理机制主要涉及脂类代谢和氨基酸代谢,且特征性代谢产物具有诊断价值。     

益气活血法治疗稳定型心绞痛临床疗效的Meta分析

目的:对运用中医益气活血为原则治疗稳定型心绞痛的临床疗效进行系统评价,为中医药治疗稳定型心绞痛提供循证医学依据.方法:检索国家知识基础设施数据库(CNKI);中国学术期刊数据库(CSPD);中文科技期刊数据库(CCD),中文生物医学文献数据库(CBM),纳入以益气活血为治疗原则,观察组采用中西结合、以中医为主的治疗,对...     

半夏泻心汤加减治疗胃食管反流病的Meta分析和试验序贯分析

目的〓系统评价半夏泻心汤治疗胃食管反流病（GERD）的有效性，为辨治处方提供临床证据。方法 检索CNKI、VIP、WanFang、PubMed、Embase、The Cochrane Library数据库，查找国内外公开发表的关于半夏泻心汤治疗胃食管反流病的临床研究，由2位研究人员按照纳入与排除标准独立筛选文献，提取资料并评价纳入研究的质量，采用Revman5.3软件进行Meta分析，TSA0.9软件进行试验序贯分析，Stata15.0软件进行发表偏倚评估， GRADE3.6软件进行证据质量评价。结果 共纳入13项研究，共计患者1 089例，其中试验组576例，对照组513例。（1）Meta分析结果显示：同常规西药相比半夏泻心汤能有效提高临床治愈率[RR=1.55,95%CI=(1.17,2.05),P=0.002]、胃镜治愈率[RR=1.45,95%CI=(1.07,1.98),P=0.02]、临床总有效率[RR=1.15,95%CI=(1.10,1.21),P＜0.000 01]和胃镜总有效率[RR=1.21,95%CI=(1.09,1.35),P=0.000 3]，降低复发率[RR=0.25,95%CI=(0.09,0.72),P=0.01]。（2）试验序贯分析：临床总有效率的累计Z值在第5项研究穿过传统界值和TSA界值，校正后结果一致，可作为确切证据。（3）发表偏倚：Harbord检验显示不存在显著发表偏倚（P=0.12）。（4）证据质量评价：临床治愈率、胃镜治愈率、临床总有效率、胃镜总有效率、复发率的证据质量均为中，推荐强度均为弱推荐。结论 半夏泻心汤应用于胃食管反流病的临床疗效优于优选西药组合，具有在GERD的临床辨治中推广应用的价值。     

长蛇灸对阳虚质人群Th1/Th2免疫功能影响的临床研究

目的：探索长蛇灸对阳虚质人群Th1/Th2免疫功能的影响。方法：依照纳入、排除标准，筛选90例阳虚质患者，随机分成空白对照组、膀胱经长蛇灸组以及督脉长蛇灸组，各30例。空白对照组不予任何治疗，长蛇灸组在膀胱经或督脉区域施行灸法，每周1次，共12次。以阳虚体质量表、SF-36量表以及IFN-γ、IL-4作为疗效评价指标，观察3组患者治疗后阳虚评分、SF-36指数以及Th1/Th2平衡作用的改变。结果：治疗后督脉长蛇灸组、膀胱经长蛇灸组阳虚质评分均较治疗前显著降低，SF-36评分显著上升（P<0.05），且与同时间点空白对照组比较差异均有统计学意义（P<0.05）；治疗后督脉长蛇灸组、膀胱经长蛇灸组均较空白对照组IFN-γ升高、IL-4下降，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：长蛇灸可以改善阳虚质人群体质评分，提高生活质量水平，同时纠正Th1/Th2失衡，调节机体免疫功能。