DLC-1基因甲基化检测与肝细胞癌复发转移的关系

目的:研究DLC-1基因甲基化检测与肝细胞癌(hepatocelluar cardnoma,HCC)复发转移的关系.方法:73例HCC标本依据临床以及病理学特征被分为高侵袭组和低侵袭组;采用甲基化特异性PCR对不同侵袭组HCC之间DLC-1基因甲基化表达进行分析.结果:DLC-1甲基化表达率高侵袭组明显高于低侵袭组,二者之间有明显差异(χ2=4.3567,P<0.05).DLC-1甲基化阳性与阴性患者之间AFP、HBV双阳性率有明显差异(χ2=4.4224,P<0.05);TNM分期越后DLC-1甲基化程度越高(χ2=10.8478,P<0.05);短期随访发现,DLC-1甲基化的HCC患者中位生存期低于非甲基化患者(9.45 mo vs 36 mo,P<0.05).结论:DLC-1基因甲基化可作为HCC复发转移监测指标,并可作为靶向治疗HCC复发转移的新靶点.     

血管内皮生长因子在肝癌血管内皮细胞体外管腔形成中量效和时效局限性的实验研究

目的：利用体外管腔形成模型,研究血管内皮生长因子（VEGF）对肿瘤血管内皮细胞（TECs）调控的精准性,探讨以 VEGF 为靶点的抗肿瘤药物在临床应用中出现缺陷的潜在机制。方法采用 CD31免疫磁珠分选人肝癌标本中的 TECs,在含 Matrigel 基质胶的96孔板中,分别与不同浓度 VEGF 共培养,观察不同时间的 TECs 体外管腔形成能力,以正常人脐静脉血管内皮细胞（ HUVECs）为对照。结果1）体外分离培养的 TECs 拟血管内皮细胞梭状形态,其96％的细胞表达内皮细胞特异性标记 CD31;2）TECs 在微小量（基础培养条件,2 ng·mL -1）VEGF165时,体外管腔形成较少或不成腔,而对照组 HUVECs 却能形成明显的管腔并分支成网;当附加10 ng·mL -1 VEGF165时,在4 h 观察到 TECs 如同 HUVECs 形成了管腔,在6 h 出现明显的分支网;然而,当附加20 ng·mL -1 VEGF165时,在6 h 观察到 TECs 形成的管腔明显减少;统计分析显示,10 ng·mL -1 VEGF165组 TECs 成管能力比2 ng·mL -1 VEGF165组高出6倍（ P ﹤0.001）,而20 ng·mL -1 VEGF165组 TECs 成管能力显著下降至10 ng·mL -1 VEGF165组的4.5倍（P ﹤0.001）;3）10 ng·mL -1 VEGF165组在培养4、6、8 h 均可见 TECs 管腔形成,但以6 h 为显著;在20 h 时,TECs 的管腔消失,而对照组 HUVECs 却还有明显的管腔分支网。结论肝癌 TECs 体外管腔形成对 VEGF165既有依赖性但又有量-效局限性,过高 VEGF 浓度能抑制性影响 TECs（而不是 HUVECs）管腔形成能力。在 VEGF 的刺激下,TECs 体外管腔形成的时效性短于 HUVECs。我们的实验结果提示,临床应用抗 VEGF 的抗肿瘤药物疗效不一可能与 VEGF 在 TECs 体外管腔形成的量效和时效的局限性有关。