副溶血性弧菌致病性标志基因tdh的实时荧光定量聚合酶链式反应的建立

目的:建立一个用于副溶血性弧菌致病性定量测定的检测体系.方法:以多组tdh基因的保守序列为基础,设计实时荧光定量PCR扩增适用的引物和TaqMan探针.以定量方式提取副溶血性弧菌基因组DNA,以tdh+菌株为阳性对照,建立实时荧光定量PCR方法.以tdh荧光定量结果与绝对菌数浓度作参比,以确定tdh基因在菌群中的拷贝水平.结果:使用正向序列5-GGAAG ATGTT TATGG TCAAT C-3(位置在467～487 bp处),反向序列5-ACCGC TGCCA TTG-TA TAGTC T-3(位置在571～551 bp处),TaqMan探针5-FAM-TGACA TCCTA CATGA CTGTG AAC-ECLIPSE-3(位置在517～539 bp处)建立一个实时荧光定馈PCR反应,目的片段长度105 bp.建立反应的DNA拷贝数对数值与Ct值线性关系为γ=-3.144 logx+43.229(r=0.997,P<0.001).建立了菌液A值与显微镜下绝对菌数浓度的相关关系为γ=2.0452x+6.2845(r=0.7828,P<0.01).根据tdh基因拷贝数与绝对菌数相比可计算tdh基因的单菌体拷贝量.结论:建立了一个定量副溶血性弧菌tdh基因拷贝水平的实时荧光定量PCR检测方法,可应用于副溶血性弧菌致病性的标准化定量测定体系.     

西药2联用药雾化吸入治疗毛细支气管炎临床疗效及安全性评价

目的：探讨研究西药2联用药雾化吸入治疗毛细支气管炎临床疗效及安全性评价。方法：选取2013年9月-2014年9月在我院治疗的毛细支气管炎患儿共120例，随机分成两组，每组各60例，对照组：采用普米克令舒进行雾化吸入治疗；实验组：采用万托林联合普米克令舒用药进行治疗，治疗后对比两组患者的临床疗效和患者父母的满意度，并记录患者是否产生不良反应情况。结果：经过一段时间的治疗，实验组的总有效率为96.7%，对照组的总有效率为76.7%，实验组患者父母总满意率为95%，对照组患者父母总满意率为73.3%，两组对比具有明显统计学的差异（P<0.05），且两组患者均没有产生明显的不良反应。结论：西药万托林联合普米克令舒治疗毛细支气管炎和传统方法治疗毛细支气管炎相比较，具有更好的疗效，而且患者的满意度比较高，值得推广。     

H1N1患者心肌标志物及常规生化检测的临床意义

目的:探讨心肌标志物及部分生化项目检测对于H1N1甲型流行性感冒患者(简称"甲流")的临床意义.方法:对54例H1N1甲流患者(包括4例重症甲流死亡患者)和50例正常对照者用电发光免疫分析、全自动临床化学分析检测H1N1甲流患者心肌标志物及常规生化项目.结果:与正常对照组相比,甲型H1N1感染者在治疗前血清肌酸激酶(C...     

急性药物中毒157例临床分析

急性药物中毒是极凶险的,在诊治过程中既要尽快明确诊断,又要准确采取急救措施。随着急救医学的发展,各地抢救技术不断地提高,我科1992年至1993年急诊住院急性中毒病人共157例,其中男40例,女117例,死亡10例,存活者150例,。抢救成功率93.6%,进行回颐性分析总结如下。1 临床资料1.1 药物中毒的年龄分布 1～15岁3例(男1例,女2例),16～25岁67例(男15例,女52例),26～36岁50例(男15例,女35例)、36～45岁14例(男1例,女13例),46～55岁9例     

云芝黄芪有效组分对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:应用云芝黄芪有效组分单方及复方治疗肿瘤小鼠,以此来验证云芝黄芪有效组分单方及复方抗肿瘤的免疫调节活性。方法:建立艾氏腹水癌(EAC)实体型荷瘤小鼠动物模型,随机分为6组,每组10只:生理盐水组(NS,0.1 mL.kg^-1.d^-1)、阿霉素单纯化疗组(AMD,4 mg.kg^-1.d^-1,0.2 mL,连续3 d)、云芝糖肽组(PSP,250 mg.kg^-1.d^-1,0.2 mL)、黄芪多糖组(APS,250 mg.kg^-1.d^-1,0.2 mL)、云芝黄芪复方组(PSP+APS,250 mg.kg^-1.d^-1,0.1 mL)和阿霉素云芝黄芪综合治疗组(AMD+PSP+APS,用量同上)。分别治疗30 d后采用免疫细胞化学法检测荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞亚群的变化情况,计算脏器指数、抑瘤率,并与对照组及化疗组进行比较。结果:云芝糖肽组和云芝黄芪复方组小鼠的CD3⁺,CD4⁺T细胞百分率以及CD4⁺/CD8⁺均显著高于对照组(P<0.05),CD8⁺T细胞的百分率较阿霉素化疗组显著降低(P<0.05);综合治疗组CD3⁺,CD4⁺T细胞百分率显著高于单纯化疗组(P<0.05);单纯化疗组小鼠胸腺指数较对照组明显降低(P<0.05),而综合治疗组的胸腺指数显著高于单纯化疗组(P<0.01);并且各给药组肿瘤质量均显著低于NS对照组(P<0.05)。结论:云芝糖肽、云芝黄芪复方对荷瘤小鼠及经化疗后的荷瘤小鼠均具有免疫增强作用。     

基因芯片研究云芝糖肽对健康成人外周血单个核细胞Toll样蛋白受体信号转导通路的影响

目的 利用基因芯片技术检测PSP对健康成人外周血单个核细胞(PBMC)Toll样蛋白信号转导通路的影响,探索云芝糖肽的免疫调节作用机制.方法 体外分离、培养健康成人外周血单个核细胞,摸索云芝糖肽的最佳作用浓度,再分为对照组、云芝糖肽组,72 h后收获细胞抽提总RNA,应用Toll样蛋白受体信号转导基因芯片检测PSP对健康成人外周血单个核细胞TIRs信号传导通路中相关基因的变化.结果 12.5 μg/mL的云芝糖肽可显著促进健康成人PBMC增殖转化(P＜0.01);经云芝糖肽作用后上调≥2倍的基因有22个,占18.8%(如y-干扰素、干扰素-y-诱导蛋白-10等),下调≥2倍的基因有23项,占19.7%(如Toll作用蛋白、共刺激分子CD86等).结论 云芝糖肽可以调节免疫细胞Toll样蛋白受体转导途径中相关基因的表达,为进一步探讨云芝糖肽的免疫调节作用机理提供了依据.     

云芝糖肽、丹参酮ⅡA对荷瘤小鼠的抗肿瘤及免疫调节作用

目的：研究云芝、丹参有效组分单体以及复方对EAC荷瘤小鼠的抗肿瘤和免疫调节作用,为肿瘤的中药治疗新方剂的临床广泛应用提供一定的实验基础。方法：建立EAC实体型荷瘤小鼠动物模型,随机分为6组：生理盐水对照组（NS）、阿霉素治疗组（ADM）、云芝糖肽组（PSP）、丹参酮Ⅱ组（TanⅡA）、复方组（PSP＋TanⅡA）和综合治疗组（PSP＋TanⅡA＋ADM）,并给予相应药物治疗,应用免疫组化法检测小鼠脾脏IL-2、IL-2R和肿瘤组织中周期蛋白CDK4以及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达,并计算抑瘤率、脏器指数,结果与对照组和化疗组进行比较。结果：云芝糖肽组小鼠脾脏IL-2、IL-2R水平高于NS组和化疗组（P〈0.05）,各药物治疗组肿瘤Bax均高于化疗组,CDK4均低于NS组（P〈0.05）,复方组Bax高于NS组（P〈0.05）,云芝组糖肽、丹参酮ⅡA组、综合治疗组CDK4低于化疗组（P〈0.05）,云芝糖肽组、复方组与综合治疗组肿瘤Bcl-2低于NS组（P〈0.05）,各药物治疗组对肿瘤有明显的抑制作用（P〈0.05）,复方组胸腺指数高于NS组,各药物治疗组胸腺指数均高于化疗组（P〈0.05）。结论：云芝糖肽、丹参酮ⅡA对EAC荷瘤小鼠有明显的抗肿瘤和免疫调节作用,并能缓解化疗药物所引起的毒副作用,二者联用存在一定协同作用。     

我国五十余年来传染病发病情况与防治的文献复习

传染性疾病是由各种病原体感染引起的,可在人与人、或人与动物之间通过接触相互传播的疾病[1].大部分传染病的病原体为微生物,小部分为寄生虫.很多传染病已被发现了几十年甚或几百年.     

严重感染性休克患者血中分离的一株Klebsiella variicola菌株的鉴定

目的 对一株临床分离的Klebsiella variicola疑似菌株进行鉴定.方法 扩增该临床分离菌株的rpoB、gyrA、mdh、infB、phoE和nifH六个基因序列,并测序,构建进化树,分析该菌与Klebsiella variicola以及肺炎克雷伯菌序列的差异性.结果 该菌六个基因的进化树中待测菌株分别与Klebsiella variicola各参比株形成一簇,与肺炎克雷伯菌稳定区分.结论 在感染性休克患者血流中分离到1株Klebsiella variicola,其基因进化与健康人所携带的肺炎克雷伯菌显著不同.

Abstract：

Objective To identify a suspected Klebsiella variicola strain isolated from a patient with severe septic shock. Methods Sequences of rpoB, gyrA, mdh, infB, phoE and nifH genes were obtained from the clinical isolated suspected Klebsiella variicola strain, and used for constructing phylogenectic trees. Characteristics of phylogenetic trees were used to distinguish Klebsiella variicola from Klebsiella pneumoniae. Results All target gene sequences from this clinical isolated strain constantly formed a cluster with their counterparts from other Klebsiella variicola strains. These clusters were readily differentiated from Klebsiella pneumoniae clusters. Conclusions The clinical isolated strain belongs to Klebsiella variicola class and can cause septic shock. From genetic perspective, Klebsiella variicola is distinctly different from Klebsiella pneumoniae, most of which can be isolated from normal healthy people.     

云芝、丹参对EAC荷瘤小鼠的抗肿瘤及免疫调节的作用

目的 研究云芝、丹参有效成分抗肿瘤作用及其免疫调节机制.方法 建立EAC荷瘤小鼠,并随机分为6组,连续给药30d后,测定其抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数以及外周血淋巴细胞亚群CD3 、CD4 、CD8 和CD4 /CD8 .结果 运用单因素方差分析进行统计学分析.结果 云芝、丹参对肿瘤均有明显的抑制作用(P<0.01);云芝 丹参组胸腺指数高于NS对照组(P<0.05),各用药组胸腺指数明显高于阿霉素对照组(P<0.05);外周淋巴细胞分群:云芝组,云芝 丹参组CD3 、CD4 百分率高于NS对照组(P<0.05);各用药组CD3 、CD4 百分率明显高于阿霉素对照组(P<0.05);除云芝 丹参 阿霉素组外,各用药组CD4 /CD8 比值高于NS组(P<0.05),明显高于阿霉素组(P<0.01).结论 云芝、丹参具有明显的抗肿瘤作用和免疫调节作用,二者联用对免疫调节有一定协同作用,其抗肿瘤机制可能通过提高免疫力来实现.