U251和U87细胞的Ezrin蛋白生物信息学分析

目的 应用生物信息学方法分析Ezrin蛋白的功能、结构域,探讨胶质瘤细胞U251和U87浸润性生长的机制.方法 Transwell检测U251和U87细胞的迁移侵袭能力.RT-PCR钓取U251和U87细胞Ezrin基因,TA克隆后测序.应用Basic Local Alignment Search Tool(nucleotide blast及blastx)分析Ezrin基因与GenBank登录的Ezin的相似性及氨基酸变异,EBI＞ Tools＞ Protein,SWISS-MODEL,SWISS-PDB Viewer分析Ezrin蛋白功能、结构域并建模观察其空间结构及变异氨基酸的位置.结果 Transwell检测结果显示穿过膜底面的U87细胞为(35.5±6.89)个,明显高于U251细胞[(13.3±3.01)个](P＜0.001).RT-PCR扩增产物为l 700 bp,与Ezrin基因的大小相符,TA克隆后XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切选取阻性质粒测序.分析显示,U251和U87细胞Ezrin基因序列与GenBank登陆序列的相似性为99％,U251细胞Ezrin基因序列中有一个位点突变,U87细胞有5个位点;U251细胞Ezrin蛋白第407位氨基酸变异,U87细胞Ezrin蛋白第66、258、265和577位变异.EBI＞Tools＞ Protein在线分析Ezrin蛋白功能,与U251细胞Ezrin匹配的蛋白有362个,与U87细胞Ezrin匹配的蛋白却有1 503个;Ezrin的结构分析显示,蛋白质结构数据库PDB中U87细胞Ezrin的数量多于U251细胞,而蛋白质结构等级分类显示的结构域的结构分级和分层分级相同;U87细胞Ezrin的结构域有45个,而U251细胞的Ezrin只有5个.SWISS-MODEL分析,U87细胞Ezrin的3D空间结构有8处与U251细胞的不同,QMEAN4评分UJ87细胞Ezrin低于U251细胞.SWISS-PDB Viewer显示U87细胞Ezrin第258、265位氨基酸相对位于空间结构的内侧.结论 胶质瘤细胞U87的迁移浸润能力强于U251.U87细胞和U251细胞Ezrin基因序列与GenBank登录的相似性达99％,U87细胞Ezrin氨基酸变异多于U251细胞,导致其功能、结构域及空间结构不同.Ezrin蛋白影响U87、U251细胞的迁移和浸润.     

560例颅内动脉瘤破裂手术时机选择临床观察分析

颅内动脉瘤（intracranial aneurysm，IAN）破裂后引发蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH），约占脑卒中的5％～15％．目前已成为导致病人致死和致残的重要原因之一。12％的颅内动脉瘤破裂后出血患者在未治疗前就已死亡，25％于发病后24小时内死亡，另外有40％～60％的患者于30天内死亡，可见其危害之大。     

慢性硬膜下血肿术后复发因素及治疗的研究进展

慢性硬膜下血肿(chronic subdural hematoma,CSDH)是神经外科最常见疾病之一.目前钻孔引流术是其首选治疗方法,但术后复发率仍然较高,术后血肿复发是导致患者预后不良的主要因素之一.     

超选择性动脉内接触性溶栓治疗急性脑梗死患者27例临床分析

急性脑梗死发病率高、致残率高、死亡率高.许多病人发病后仅给予单纯静脉药物治疗,疗效不理想,预后较差,致残率高.颈内动脉注药有时因局部药物浓度低,治疗效果也不理想.而超选择性动脉内接触性溶栓治疗可使闭塞的血管快速再通,恢复脑组织的血液供应,明显改善预后.本文对27例急性脑梗死病例进行早期超选性动脉内接触性溶栓治疗做回顾性分析.     

神经外科专科培训解剖亚专业教学体会

正专科医师培训制度已在我国逐渐开始,作为"先行先试"之一的神经外科,神经外科专科医师培训体系目前尚处于探索阶段~([1]),同时也是继住院医师规范化培训后又一任重而道远的培训工程。因神经外科手术致死、致残率较高,故增加了神经外科培训过程中的难度与风险。如何确保专培学员在培训过程中掌握手术技术及要点,降低培训过程中的医疗风     

清毒伸筋汤对胶原诱导性关节炎大鼠血清TNF-α、IL-1β水平的影响

目的:观察清毒伸筋汤对胶原诱导性关节炎大鼠血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的影响,从分子水平探讨清毒伸筋汤治疗类风湿关节炎的作用机理。方法:60只大鼠随机选取10只为正常组,其余大鼠采用弗氏不完全佐剂和牛II型胶原蛋白诱导大鼠类风湿关节炎模型,模型制作成功后随机分为模型组,甲氨蝶呤组,清毒伸筋汤高剂量组、中剂量组、小剂量组。各治疗组灌服相应药物,正常组和模型组给予生理盐水。28 d后,各组小鼠主动脉采血,采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠TNF-α、IL-1β水平。结果:清毒伸筋汤各剂量组均能降低大鼠血清TNF-α、IL-1β的水平,其中高剂量组、中剂量组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。清毒伸筋汤中剂量与甲氨蝶呤组比较,差异无统计学意义(P0.05),两者效果相当。结论:清毒伸筋汤能降低类风湿关节炎大鼠血清中TNF-α、IL-1β水平,从而抑制炎症反应,进一步阻止骨质破坏。     

重型颅脑损伤患者大骨瓣减压术后迟发性颅内血肿对预后的影响

目的: 探讨重型颅脑损伤(sTBI)患者行单侧大骨瓣减压术(LDC)后迟发性颅内血肿(DTICH)发生的危险因素及其对预后的影响,为提高sTBI患者救治成功率提供依据。方法: 回顾性分析130例行单侧LDC的sTBI患者的临床资料。依据术后是否发生DTICH分为DTICH组(n=42)和非DTICH组(n=88),对比分析DTICH发生的危险因素及其对预后的影响。结果: 2组患者术前格拉斯哥昏迷评分(GCS)、外伤至手术时间、并发颅骨骨折、中线移位>1 cm、基底池消失、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)与DTICH的发生有关联(P<0.05)。多因素Logistic回归分析,外伤至手术时间、并发颅骨骨折、基底池消失和FIB是DTICH发生的独立危险因素(P<0.05)。对比分析2组患者的3个月后格拉斯哥预后评分(GOS),DTICH组患者预后明显差于非DTICH组(P<0.01)。结论: 对于外伤至手术时间较短、并发颅骨骨折、基底池消失、FIB下降的患者,应高度警惕DTICH的发生。DTICH影响患者预后,提前预防和早期诊断是改善患者预后的关键。