重组IL-12对乙肝疫苗在小鼠诱导免疫应答的作用

目的:观察重组IL-12对乙肝疫苗在小鼠诱导应答的强度与性质的作用,探讨将重组IL-12用作乙肝治疗性疫苗分子佐剂的可能性.方法:将乙肝疫苗联合重组IL-12肌注免疫小鼠,检测小鼠产生的抗乙肝表面抗原特异性体液和细胞免疫应答.结果:乙肝疫苗联合重组IL-12能明显增强小鼠T淋巴细胞的增殖活性、促进分泌细胞因子IFN-γ和IL-2并提高IgG2a抗体水平.结论:重组IL-12可显著增强乙肝疫苗诱导的细胞免疫应答,并使免疫应答转向Th1型.     

蛋白质芯片技术在肿瘤检测中的应用

随着人类基因组全序列草图的完成,从基因水平向蛋白质水平深化已成为生命科学研究的迫切需要和新的任务.蛋白质芯片技术的建立为研究蛋白质水平的生命活动开辟了更为广阔的前景,提供了新型有效的研究手段.从蛋白质整体水平上研究肿瘤的发生与转移,寻找与肿瘤发生及转移相关的新的蛋白质、肿瘤特异性的标志物及肿瘤药物治疗的靶标,对肿瘤的诊治将起到重要作用.本文对蛋白质芯片技术在肿瘤检测中应用的最新进展作一综述.     

美沙拉嗪对2，4，6-三硝基苯磺酸诱导溃疡性结肠炎大鼠脾脏组织NF—κBp65表达的影响

目的 探讨美沙拉嗪对2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的溃疡性结肠炎大鼠脾脏组织NF-κB p65表达的影响.方法 将42只SD大鼠随机分为空白对照组、结肠炎模型组和美沙拉嗪治疗组,每组各14只.除空白对照组外,其他两组均应用TNBS灌肠制作溃疡性结肠炎大鼠模型;模型建成2d后,空白对照组和结肠炎模型组均用蒸馏水、美莎拉嗪治疗组用美莎拉嗪蒸馏水混悬液3 mL灌胃;连续灌胃15 d后取脾脏组织,采用RT-PCR法检测NF-κB p65 mRNA,Western blot法检测NF-κB p65蛋白.结果 与空白对照组比较,结肠炎模型组NF-κB p65 mRNA、蛋白表达均升高（P均＜0.05）;与结肠炎模型组比较,美沙拉嗪治疗组NF-κB p65 mRNA、蛋白均下降（P均＜0.05）.结论 美沙拉嗪能通过下调TNBS诱导的溃疡性结肠炎大鼠脾脏组织NF-κB p65的表达,发挥治疗溃疡性结肠炎的作用.     

凝血功能及血浆cTnI、HCY、PCT水平对评价急性脑梗死合并高血压患者脑梗死严重程度及预后的临床意义

目的探讨凝血功能及血浆肌钙蛋白I(cTnI)、同型半胱氨酸(HCY)、降钙素原(PCT)水平对评价急性脑梗死合并高血压患者脑梗死严重程度及预后的临床意义。方法选择该院2018年1月至2019年1月收治的急性脑梗死合并高血压患者400例纳入研究组,按入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将其分为轻度组(135例)、中度组(145例)、重度组(120例),另选取同期该院收治的高血压患者200例为对照组,检测其凝血功能[纤维蛋白原(FIB)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、D-二聚体(DD)],以及血浆cTnI、HCY、PCT水平,并对上述指标进行对比。研究组治疗1个月后,按改良的Rankin量表(MRS)评分将其分为预后良好组(263例)与预后不良组(137例),观察两组上述指标的变化情况。结果 FIB、DD水平从高到低依次为重度组、中度组、轻度组、对照组,两两比较,差异均有统计学意义(P0.05),PT、APTT、TT水平从高到低依次为对照组、轻度组、中度组、重度组,两两比较,差异均有统计学意义(P0.05)。轻度组、中度组、重度组、对照组患者cTnI、HCY、PCT水平比较,差异均有统计学意义(P0.05),3项指标从高到低依次均为重度组、中度组、轻度组、对照组,两两比较,差异均有统计学意义(P0.05)。预后良好组FIB、DD水平低于预后不良组(P0.05),PT、APTT、TT水平高于预后不良组(P0.05);预后良好组cTnI、HCY、PCT水平低于预后不良组(P0.05)。结论急性脑梗死合并高血压患者凝血功能异常程度及血浆cTnI、HCY、PCT水平与脑梗死严重程度及预后关系密切,对上述指标进行检测能够评估患者脑梗死严重程度及预后情况。     

老年人丙戊酸钠抗癫痫治疗的剂量和有效血药浓度的初步研究

目的：老年人虽然属于成年人的范畴,但身体各脏器的生理功能、对药物和损伤的耐受能力与中青年人存在着差别。推测老年人这组特殊成人的服药量比一般意义上的成人（中青年人）低。本研究目的是探索丙戊酸钠治疗老年癫痫病人的剂量和有效血浆药物浓度,为老年癫痫病人合理应用丙戊酸钠提供依据。方法和材料：研究对象为我科2009年8月到2010年3月新诊断的60岁以上的癫痫病人。给病人小剂量起始量丙戊酸钠0．2—0．4／日,以完全控制癫痫癫痫发作为目标上下调整剂量形成个体化的维持剂量。于用药1周、1月或3月检查丙戊酸钠空腹和服药后两小时血药浓度。结果：病人用药维持剂量为0．1-0．6／天,平均剂量约0．289／天（D=0．089）,是通常成人丙戊酸钠推荐维持剂量（0．6—1．5,天）的20—50％。血空腹丙戊酸钠浓度是4．97—33．71mg／L,平均19．1mg／L（D=8．57）,也几乎是正常丙戊酸钠抗癫痫血药浓度（40—100mg／L）的20—50％。所有病人癫痫发作控制良好。结论：老年癫痫病人服用丙戊酸钠约0．1—0．4／天是有效的。有效丙戊酸钠空腹血浆浓度可以在4．97—33．71mg／L。本研究提示应该生产小剂量丙戊酸钠片（0．1）或控释片（0_3）,以满足老年癫痫病人的需求。随着社会的老年化,用成人药物剂量来代替老年人药物剂量已不再适合社会发展的需求。医学界需要对其他药物,尤其是需要长期服用的药物（如其他抗癫痫药物、降压药、降血糖药）的老年人推荐剂量和有效血药浓度进行研究,使得老年病人得到更加安全合理的治疗。     

颗粒溶素重组表达载体的构建和原核表达

目的：构建人颗粒溶素（Granulysin,GNLY）基因的表达载体并在大肠杆菌中表达。方法：抽提体外培养的单个核细胞总RNA,通过RT-PCR的方法获得含有222bp的颗粒溶素cDNA,克隆到pMD18-T载体,测序正确后再亚克隆到质粒pET28a（＋）中,构建重组表达质粒pET28a（＋）-GNLY,在大肠杆菌中诱导表达并经Ni亲和层析纯化。用SDS-PAGE和Westernblot对表达产物进行鉴定。采用MTT法检测GNLY融合蛋白的生物学活性。结果：酶切结果证实,成功地构建了GN-LY原核表达载体,并在大肠杆菌中获得稳定的表达,表达产物的相对分子质量（Mr）同预期值相一致。结论：成功构建了重组表达质粒pET28a（＋）-GNLY,并在大肠杆菌BL21（DE3）plysS中表达,获得了具有良好的抗原性和特异性的GNLY融合蛋白,为下一步研究人GNLY的功能奠定了基础。     

颗粒溶素的研究进展

颗粒溶素(GRA)是NK细胞和CTL细胞胞浆颗粒中的一种蛋白质分子,具有广泛的杀菌、杀病毒、杀伤肿瘤细胞的活性。通过对GRA的结构、功能及与临床关系的研究,探究其对靶细胞的杀伤机制、在微生物免疫中的作用及其与感染性疾病、肿瘤及其他疾病的相关性,均表明其具有广泛潜在的临床应用价值。     

乙型肝炎病毒表面-核心融合抗原和白细胞介素-12共表达DNA疫苗的免疫原性

乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞免疫应答对急性HBV感染的恢复起关键作用,其中HBV表面抗原和核心抗原均是重要的靶抗原。曾构建HBV表面-核心融合抗原DNA疫苗,可有效诱导小鼠细胞和体液免疫应答,为进一步增强该DNA疫苗     

急性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道电流的影响

目的：研究急性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道（Kv）电流的影响。方法：雄性SD大鼠20只随机分为常氧对照组和急性缺氧组（各10只）。急性缺氧组大鼠在低氧仓中缺氧停留8h后进行实验。应用全细胞膜片钳技术记录肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道电流（Ik）。结果：急性缺氧显著降低大鼠肺动脉平滑肌细胞的Ik密度。在大鼠肺动脉平滑肌细胞静息膜电位-60mV至-10mV时,急性缺氧降低大鼠肺动脉平滑肌细胞的IK密度不明显（P〉0．05）。在0mV时,大鼠肺动脉平滑肌细胞的峰值Ik密度显著下降[从（38．1±5．2）pA／pF→（9．82±2．1）pA／pF,P〈0．05）],此后随着细胞静息膜电位的增加,平滑肌细胞的Ik密度下降幅度逐渐增加（P〈0．05）;从＋30mV至＋60mV时,平滑肌细胞的Ik密度下降幅度更大（P〈0．01）。在＋60mV时,IK密度峰值从（135．4±16．5）pA／pF降到（73．1±10．6）pA／pF,降幅达（46．8±3．3）％。结论：急性缺氧可降低肺动脉平滑肌细胞Kv电流,导致肺血管缺氧性收缩。     

重组戊型肝炎疫苗在恒河猴中保护性免疫力的持久性

戊型肝炎病毒(HEV)核壳蛋白基因0RF2在昆虫细胞中表达的分子量为56kDa的蛋白在恒河猴中具有高度免疫原性，可有效抵抗第2次接种后1个月的静脉HEV攻击。本文旨在观察该重组疫苗的保护作用能否持续更长时间。