人兽共患疾病的流行现状、危害及其防控对策

人兽共患疾病是一类严重威胁人类和动物健康的疾病，有些疾病一旦发生会给人类社会和经济发展带来灾难性的影响。自从其发现以来，人类与其的斗争一直就没有停止。在国际组织和各个国家的参与下，人类已有效控制和消灭了天花、鼠疫等曾给人类带来灾难的人兽共患疾病。然而，21世纪的今天，一些新发现的和曾被有效控制的人兽共患疾病又频频爆发和肆虐，甚至愈演愈烈，有的发展到难以控制的局面，使人类社会又一次面临严峻的考验。本文概括介绍了人兽共患疾病的流行现状与危害、频繁发生的根源以及防控策略等，积极呼吁和倡导世界各国加强合作，采取协调统一的有效措施控制这类疾病的发生和蔓延，造福人类社会。     

猪带绦虫TSO45W-4BX与猪CD58分子在大肠埃希菌中的联合表达

目的 以猪CD58为分子佐剂，将CD58基因与猪带绦虫疫苗候选抗原基因TSO45W-4BX联合表达，寻找新型抗猪囊尾蚴疫苗。 方法 分别以重组质粒pGEM-4B和pGEM-CD58为模板，PCR扩增猪带绦虫TSO45W-4BX基因和猪CD58基因，将TSO45W-4BX与酶切处理的pGEX-4T-1定向连接，转化大肠埃希菌JM109，重组质粒经鉴定正确后，在其下游酶切插入CD58基因，PCR扩增和测序证明阅读框正确后，用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达，用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE））和蛋白质印迹法（Western blotting）分析表达产物的免疫活性。 结果 pGEX-4BX和pGEX-4BX/CD58分别表达Mr 41 000和Mr 69 000的融合蛋白，pGEX-4BX表达产物主要以可溶性形式存在，而pGEX-4BX/CD58却以包涵体形式存在，但两者都能被囊尾蚴病患者血清识别。 结论 TSO45W-4BX与CD58基因联合表达，TSO45W-4BX仍具有免疫活性。     

羊口疮病毒E3L蛋白亚细胞定位及生物信息学分析北大核心CSCD

目的 克隆羊口疮病毒020基因,构建其重组真核表达质粒并转染HeLa细胞,分析020基因编码E3L蛋白的亚细胞定位,分析该蛋白生物信息学特征。方法 提取羊口疮病毒基因组,PCR扩增020基因并构建重组真核表达质粒,转染HeLa细胞,采用Western blot检测其在该细胞中的表达,免疫荧光法检测该蛋白的亚细胞定位。利用DNAstar软件分析不同毒株ORFV E3L氨基酸序列特点及其遗传演化关系;利用SOMPA软件分析其二级结构;利用SignalP4.0软件预测信号肽;利用TMHMM2.0软件预测跨膜结构;利用NetPhos 3.1预测磷酸化位点;利用NetNGlyc-1.0预测糖基化位点;应用IDEB和SYFPEITHI预测ORFV E3L蛋白的抗原表位。结果 成功克隆得到ORFV 020基因,全长549 bp,编码183个氨基酸;亚细胞定位显示该蛋白定位于细胞核和细胞质。生物信息学分析ORFV E3L蛋白α螺旋约占40.44%、β折叠约占5.46%、延伸链约占16.94%、无规则卷曲约占37.16%;该蛋白无信号肽和跨膜结构,可能存在15个磷酸化位点,7个N-糖基化位点,5个B细胞线性表位,2个CTL表位,3个Th细胞表位,3个B细胞和CTL联合表位,3个B细胞和Th细胞联合表位。结论 ORFV E3L蛋白定位于细胞核和细胞质,含有多个抗原表位,可能具有免疫原性。该蛋白高度保守,具有成为优势保护性抗原的潜力。为进一步揭示ORFV E3L蛋白的功能奠定基础,为ORFV诊断方法的建立及疫苗的研制提供了理论依据。     

马鹿布氏杆菌25kDa外膜蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究

目的克隆马鹿布氏杆菌ML分离株25kDa外膜蛋白(Omp25)基因,并在大肠杆菌中表达。方法运用RT-PCR技术从马鹿布氏杆菌分离株中扩增出Omp25基因,将其克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定和遗传变异分析,并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中诱导表达。结果该基因全长642bp,编码213个氨基酸;其中前23个氨基酸残基构成信号肽。在推导的氨基酸序列中,存在两个跨膜区,但没有潜在的N-联糖基化位点。与GenBank中已经登录的布氏杆菌其他11个分离株相比,马鹿布氏杆菌分离株Omp25基因变异较小,以散在的点突变为主,Omp25基因核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99.1%-99.4%和99.2%-99.5%之间。转化重组质粒pETOMP25的大肠杆菌BL21(DE3)在IPTG的诱导下,可表达出具有反应原性的目的蛋白,表达量占菌体蛋白的18.6%。结论马鹿布氏杆菌分离株与流产型布氏杆菌其它分离株Omp25基因同源性很高,可能是一个毒力较强的野毒株。     

Toll样受体介导的先天性抗病毒免疫反应研究进展

TLRs是先天性免疫系统最重要的模式识别受体,通过识别病毒的PAMPs/DAMPs,活化依赖和非依赖于MyD88的信号通路,诱导I-IFN、炎性因子和趋化因子等的释放,发挥抗病毒作用.现就TLRs的基本概况、结构特征、抗病毒信号通路及对不同病毒的天然免疫反应等相关研究进展进行简要综述.     

猪带绦虫六钩蚴TSO18基因的克隆和表达

囊虫和绦虫在中国大部分地区是一个重要的公共卫生问题,对人的健康危害很大。猪的囊尾蚴感染率也较高。每年造成的经济损失达20亿元。猪囊虫病的免疫预防是一个难度很大的课题。主要原因是抗原成分复杂且不能大量生产。随着分子生物学技术在寄生虫研究领域的应用。通过寻找免疫相关基因,在体外克隆并表达该基因,用表达产物作为抗原进行免疫和诊断无疑是一个新的研究方向和热点。     

CpG DNA重组质粒对猪囊尾蚴抗原的免疫佐剂效应研究

用CpG基序寡核苷酸的重组质粒（CpG DNA）与猪囊尾蚴抗原制备疫苗免疫小鼠，检测小鼠抗囊尾蚴总抗体和IgG2a抗体亚类以及体外诱导免疫脾细胞分泌白介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）的含量，观察其免疫佐剂效应。发现CpG DNA重组质粒中无论插入CpG基序多或少都能增强小鼠抗囊尾蚴总抗体和IgG2a抗体亚类含量，都具有免疫佐剂效应，但其免疫强度有差别，其中CpG2的佐剂效应最强；此外，CpG DNA重组质粒能与铝胶、206佐剂配伍发挥免疫增强协同作用。     

超声随访检查对肝泡型包虫病药物治疗效果的评价

目的 分析57例肝泡球蚴病患者阿苯达唑治疗1年后的超声检查结果,评价阿苯达唑治疗效果。方法 对血清学检查（ELISA）阳性和经B型超声检查确诊的57例肝泡球蚴病患者给予阿苯达唑治疗1年后同法复查,根据疗后B超声像变化评价治疗效果。结果 57例患者使用阿苯达唑治疗1年后B超检查9例钙化痊愈,35例部分钙化好转,8例退化稳定,5例扩大恶化。结论 阿苯达唑治疗泡球蚴病有效,B型超声检查可用于阿苯达唑等药物治疗后的效果评价。     

猪囊尾蚴rTS-CC18蛋白的原核表达、纯化及其抗原性分析

目的制备猪带绦虫囊尾蚴rTS-CC18抗原并对其抗原性进行鉴定,为建立猪囊尾蚴检测技术提供诊断抗原。方法用PCR方法从重组质粒pGEM-TS-CC18中扩增TS-CC18编码基因,构建pET30a-TS-CC18重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导筛选高表达量菌株。采用Ni-FF亲和层析方法提纯表达蛋白。Western blotting及间接ELISA检测重组蛋白的反应活性。结果Tricine-SDS-PAGE表明,重组菌经0.5 mmol/LIPTG诱导6 h,可稳定表达可溶性rTS-CC18蛋白,其相对分子质量约16×103。Western blotting检测诱导的蛋白能与猪囊尾蚴阳性血清发生特异性反应;间接ELISA检测血清抗体结果表明:纯化的rTS-CC18蛋白与全囊虫抗原的相对特异性达100.0%,相对敏感性达84.0%,总符合率为94.3%。结论成功制备了猪囊尾蚴rTS-CC18抗原,其特异性、敏感性及稳定性良好,对诊断猪囊尾蚴病及开发诊断制剂具有潜在应用价值。     

人—猪囊虫、猪带绦虫动物模型替代性研究进展

猪囊虫病又称猪囊尾蚴病 (Ｃｙｓｔｉｃｅｒｃｏｓｉｓｃｅｌｌｕ ｏｓｅ)是一种危害畜牧业和人体健康的重要人兽共患寄生虫病 (ＰａｒａｓｉｔｉｃＺｏｏｎｓｉｓ)。该病主要分布于美洲、非洲及亚洲部分不发达地区 ,我国已有 2 7个省、市、自治区发现本病 ,猪囊虫病的感染率在全国平均为 5.32 % ,有的地区高达 30 %～ 50 % ,近有 2 2 0 0多万头猪患囊虫病。另外人囊虫病对人的危害也十分严重 ,可导致患者致残 ,甚至死亡。人是猪囊虫成虫 -猪带绦虫 (Ｔａｅｎｉａｓｏｌｉｕｍ )的唯一终末宿主 ,人的猪带绦虫病既可污染环境造成更多猪只患囊…