结合恶性胸腔积液中脱落细胞探讨上皮细胞-间质转化与非小细胞肺癌的相关性

目的探讨恶性胸腔积液(malignant pleural effusion,MPE)中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子标志物的表达及意义。方法对823例胸水标本进行液基细胞薄层检测(thinPrep cytology test,TCT),结合活检结果确诊107例NSCLC标本,随机分成NSCLC细胞组、NSCLC活检组及NSCLC癌旁组织组三组,对其中39例NSCLC细胞组胸水标本进行沉渣后包埋、切片,采用免疫组化SP法检测三组中vimentin、E-cadherin、N-cadherin、β-catentin的表达,并进行对比分析。结果E-cadherin、β-catentin阳性/异常阳性率在NSCLC细胞组、活检组均明显低于癌旁组织组(P<0.05)。NSCLC细胞组、活检组N-cadherin、vimentin的阳性率均明显高于癌旁组织组(P<0.05)。同时亦发现,在NSCLC细胞组中,E-cadherin表达与分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05),β-catentin异常阳性与分化程度有关(P<0.05),N-cadherin与vimentin表达与淋巴结转移有关(P<0.05)。以上4个抗体表达/异常表达均与患者年龄、性别、吸烟史和组织学分型无关(P>0.05)。结论MPE中NSCLC细胞具备EMT表型,从细胞学角度进一步证实EMT现象存在于NSCLC,为新的靶向治疗药物的研究和治疗靶点提供新思路。     

东北地区汉族人群XPD单核苷酸多态性与结肠癌易感相关性的研究

目的:研究核苷酸切除修复基因XPD单核苷酸多态性与东北地区汉族人群结肠癌风险的关系.方法:以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析170例结肠癌患者标本XPD基因Asp312Asn和Lys751Gln多态性.比较不同基因型与结肠癌风险的关系.结果:Lys751Gln多态在结肠癌患者中的分布和正常对照组差异无统计学意义,与结肠癌风险无关.结肠癌患者中Asp/Asn和Asn/Asn基因型频率明显高于正常对照组,P=0.016;与携带312 Asp/Asp基因型者比较,携带至少1个312 Asn等位基因者(即Asp/Asn和Asn/Asn基因型)罹患结肠癌的风险增加2.11倍(95%CI:1.21～3.66).结论:XPD基因Asp312Asn多态是东北地区汉族人群结肠癌遗传易感因素.     

CKLMW,CEA及MC检测卵巢癌腹腔液内游离癌细胞的临床意义

目的 :探讨一组正反互补单克隆抗体在卵巢癌腹腔液内游离癌细胞中的表达及意义。方法 :应用低分子量细胞角蛋白 (CKLMW)、癌胚抗原 (CEA)、间皮细胞 (MC)及波形蛋白 (VIM) 4种标志物 ,对 6 7例腹腔液中的细胞成分进行免疫细胞化学 (ICC)标记。结果 :ICC阳性率 (86 .2 % )明显优于细胞病理学阳性诊断率 (5 8.6 % ,P <0 .0 5 ) ;ICC阳性率随病期进展而增加 ;CKLMW 、CEA、MC及VIM 4种抗体的敏感度及特异度分别为10 0 .0 % ,5 9.5 % ;72 .0 % ,97.6 % ;85 .7% ,92 .0 % ;85 .7% ,5 2 .0 %。结论 :CKLMW、CEA及MC联合应用检查卵巢癌腹腔液内游离癌细胞 ,对腹腔液良恶性的鉴别、疾病的临床分期、治疗及预后具有重要的临床应用价值 ,而VIM缺乏应用价值     

siGAPDH对TRAIL诱导的人甲状腺癌细胞凋亡抑制作用的研究

目的:探讨3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)促人甲状腺癌细胞凋亡中的作用机制.方法:利用微小干扰RNA(siRNA)技术,设计沉默GAPDH基因表达序列,分别按经N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)预处理前、后(siGAPDH、siGAPDH+L-NAME)组及siRNA对照进行分组,并设空白对照组同步进行甲状腺未分化癌细胞系(FRO)转染实验.蛋白质印迹法检测细胞中GAPDH蛋白表达,台盼蓝法检测细胞生存率,DNA裂解分析检测细胞凋亡,Caspases-3酶分析测定活性,一氧化氮(NO)产物测定法检测各组细胞亚硝酸盐和硝酸盐水平.结果:siGAPDH下调FRO细胞中GAPDH蛋白表达,细胞核中GAPDH几乎完全被封闭;与siRNA对照组细胞生存率(37%)相比,siGAPDH组(60%)和siGAPDH+L-NAME组细胞生存率(67%)显著增加(χ2=4.88,P=0.027;χ2=7.98,P=0.026);CaspasE-3活性显著下降(t=9.59,P=0.001;t=11.86,P=0.000),但两组间差异无统计学意义,t=1.65,P=0.172;siGAPDH组和siRNA对照组NO产物较siGAPDH+L-NAME组显著增加(t=36.95,P=0.000;t=52.1,P=0.000),但两组间差异无统计学意义,t=2.563,P=0.062.结论:GAPDH作为NO产物作用的下游因子参与TRAIL促人甲状腺癌细胞凋亡作用.     

免疫细胞化学染色技术在浆膜腔积液涂片中的应用

对应用免疫细胞化学染色技术检测浆膜腔积液中癌细胞的方法进行了探讨。并谈了个人的体会。     

胃癌组织中caspase 9的表达及其多态性变化

目的:探讨胃癌中caspase 9基因的表达及其单核苷酸多态位点的分布.方法:应用Western-blot方法检测70例胃癌患者及对应癌旁正常组织中caspase 9的表达情况.应用限制性片段长度多态性技术结合测序,分析70例胃患者及100例正常人caspase 9基因rs1052576位点基因型.应用列联表法统计分析患者组和对照组SNP位点基因型及等位基因频率.结果:51.4%(36/70)的胃癌组织caspase 9基因表达明显下调,与癌旁正常组织相比差异有统计学意义(P<0.05).位于caspase 9基因第5外显子的SNP位点rs1052576的基因型频率和等位基因频率在两组人群中的分布差异有统计学意义.患者组G等位基因频率明显高于对照组(22.9% vs 13.0%,P<0.05),AG基因型频率在有淋巴结转移的患者中明显高于无淋巴结转移的患者(P<0.05).结论:caspase 9基因在胃癌中低表达,rs1052576多态位点G等位基因和胃癌的发生相关,AG基因型和淋巴结转移有关.     

CASP9基因在非小细胞肺癌中的表达及其多态性研究

目的探讨caspase9(CASP9)基因在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)位点在非小细胞肺癌患者和正常人中的分布情况。方法应用逆转录-PCR方法检测了81例NSCLC患者及对应癌旁正常组织中CASP9的表达情况;应用限制性片段长度多态性技术结合测序法,分析81例NSCLC患者及100名正常人CASP9基因2个SNP位点基因型;应用列联表法统计分析患者组和对照组各SNP位点基因型及等位基因频率。结果44.4%(36/81)的NSCLC组织CASP9基因表达明显下调,与癌旁正常组织相比差异有统计学意义(P<0.05)。位于CASP9基因第1外显子的SNP位点rs1052571的基因型频率和等位基因频率在两组人群中的分布差异无统计学意义;位于CASP9基因第5外显子的SNP位点rs1052576的基因型频率和等位基因频率在两组人群中的分布差异有统计学意义;患者组G等位基因频率明显高于对照组(P<0.05);AG基因型频率在有淋巴结转移的患者中明显高于无淋巴结转移的患者(P<0.05)。结论CASP9基因在NSCLC中低表达,rs1052576多态位点G等位基因和肺癌的发生相关。AG基因型和淋巴结转移有关。     

卵巢颗粒细胞瘤伴发血睾酮升高、继发性闭经1例

卵巢颗粒细胞瘤(granulosa cell tumor,GCT)是最常见的卵巢性索间质肿瘤,占卵巢肿瘤的1%～2%,占卵巢恶性肿瘤的3%～5%.GCT诊断时大多处于临床早期,但却以晚期复发而闻名.GCT可分泌多种激素如:卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌激素、抑制素(inhibin)、孕酮、雄激素、抗苗勒激素等.成人型GCT常表现为高雌激素体征,而以男性化体征为临床表现者罕见.目前,国外文献报道以雄激素增高进而出现男性化体征的成人型GCT例数较少.在此,我们报道1例以血睾酮增高和继发性闭经为首发表现的成人型GCT.     

GLUT1和MC在肺癌患者胸水中的表达及意义

目的 探讨葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和MC在肺癌患者胸水中的诊断价值.方法 应用免疫化学S-P法研究GLUT1和MC在56例肺癌患者胸水中的癌细胞和44例肺良性疾病胸水中的反应性间皮细胞的表达.结果 GLUT1在肺癌患者胸水中的阳性率92.8%(52/56),明显高于在良性胸水中的阳性率6.8%(3/44),差异非常显著(P<0.01);而MC在良性胸水中的阳性率93.2%(41/44),明显高于在肺癌患者胸水中的阳性率19.6%(11/56),差异也非常显著(P<0.01);GLUT1和MC联合应用敏感性和特异性分别高达100%和89.3%.结论 GLUT1和MC对肺癌患者胸水中癌细胞的诊断及鉴别诊断具有重要的临床应用价值.     

肺癌细胞系中p120-catenin亚型1A和亚型3A对E-cadherin和β-catenin的调节功能

背景与目的 p120-catenin(p120ctn)作为catenin家族的重要成员,具有多种功能各异的亚型.由于这些亚型存在着组织和细胞学特异性,因而在不同的组织和细胞当中,p120ctn各亚型可能对细胞粘附发挥不同的调节功能,但至今尚缺乏直接相关的实验证明.方法 选取p120ctn低表达的肺癌细胞系A549和NCI-H460,分别向其中转染P120ctn亚型lA和p120ctn亚型3A的cDNA质粒,应用RT-PCR、Western Blot、Transwell检测p120ctn各亚型对E-cadherin/β-catenin复合体的影响,及其对肺癌细胞侵袭和转移能力的调节作用.结果 p120ctn亚型1A的高表达能够通过促进E-cadherin/β-catenin的表达,进而明显抑制肺癌细胞的侵袭能力;而P120ctn亚型3A的高表达却没有这样明显的调节作用.结论 P120ctn亚型1A和亚型3A可能通过对E-cadherin/β-catenin的不同调节作用.在不同程度上调控肺癌细胞的侵袭能力.