清醒大鼠急性高血糖模型的建立及其“肾毒性”损伤特点及机制研究

目的 建立大鼠清醒状态下急性高血糖模型,观察急性高血糖引起肾损伤的特点,并探讨其可能机制.方法 应用随机数字表法将Sprague-Dawley大鼠分为高糖组和对照组(n=10),颈静脉置管术后行高葡萄糖钳夹实验建立急性高血糖模型.术后第5天高糖组经颈静脉置管泵入50％葡萄糖溶液,使血糖维持于16 ～ 18 mmol/L;对照组以同等速度泵入生理盐水,实验持续6h,留取24 h尿液后处死大鼠并取材.光镜和透射电镜观察肾脏结构损伤,检测肾功能、尿微量白蛋白(UMA)及肾损伤分子-1(KIM-1)等肾损伤指标,检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛及8-羟基-2'-脱氧鸟苷(8-OHdG)评估氧化应激水平.结果 高糖组出现明显肾脏结构和功能损伤.结构上可见近曲小管细胞肿胀,细胞内线粒体肿胀、排列紊乱;与对照组相比,高糖组24 h UMA、KIM-1及中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)均显著升高(t=-2.969、-2.220、-2.791,P均＜0.05),而血清及肾组织SOD活性明显下降(t=2.537、2.599,P均＜0.05),血清丙二醛、肾组织丙二醛及尿8-OHdG明显升高(t=-2.532、-2.600、-2.968,P均＜0.05).结论 成功建立大鼠急性高血糖模型.急性高血糖可导致肾脏结构和功能损伤,以肾小管损伤为主,氧化应激及线粒体损伤参与急性高血糖“肾毒性”损伤的发生、发展.     

黄连解毒汤对糖耐量减低大鼠的糖尿病延缓作用

目的 观察黄连解毒汤对糖耐量减低(IGT) Zucker糖尿病肥胖(ZDF,fa/fa)大鼠糖尿病发病的延缓作用并探讨相关机制.方法 以高脂饲料诱导20只ZDF大鼠至IGT期后,将大鼠按随机数字表法分为模型组及黄连解毒汤干预组(黄连组),每组10只,并以Zucker Lean(fa/+)大鼠作为正常对照组,其中,黄连组以黄连解毒汤0.075 g/d灌胃干预,模型组及正常对照组以同体积双蒸水对照,以干预3周后,模型组全部发展至糖尿病为实验终点.行口服葡萄糖耐量试验(OGTF)观察黄连组糖尿病发病率.以酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆脂多糖、胰高血糖素样肽-l(GLP-1)、胰岛素及胰高血糖素(GC)水平,并以稳态模型评估-胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评价胰岛素抵抗;以免疫组化方法观察不同组间回肠occludin、zonula occludens (ZO)-1、核因子-κB和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达.结果 药物干预3周后,模型组全部发展为糖尿病,而黄连组仅50％发展为糖尿病,且与模型组相比,黄连组空腹血糖水平(F=13.940,P＜0.01)显著下降.随着糖尿病病程进展,模型组大鼠空腹血浆GC(F=51.045,P＜0.01)、HOMA-IR(F=19.260,P＜O.01)、脂多糖(F=10.661,P＜0.05)、GLP-1(F=7.077,P＜0.01)水平逐渐升高,而胰岛素(F=13.445,P＜0.01)水平逐渐下降;干预3周后,与模型组相比,黄连组胰岛素(F=1.020,P＞0.05)、HOMA-IR(F=13.227,P＜0.01)、GC(F=23.440,P＜0.05)、脂多糖(F=22.636,P＜0.01)水平均有不同程度下降,GLP-1水平升高(F=4.954,P＜0.05).在回肠,与正常对照组相比,模型组核因子-κB (F=91.951,P＜0.01)和TNF-α(F=83.633,P＜0.01)的表达增加,而occludin(F=105.653,P＜0.01)及ZO-1 (F=71.753,P＜0.01)表达明显减少.黄连组上述指标均有明显改善(P均＜0.01).结论 黄连解毒汤可能通过改善GLP-1的分泌、减轻肠道炎性反应并维持肠道屏障功能,对IGT期ZDF大鼠有延缓T2DM发病的作用.     

2型糖尿病患者早期进行性肾功能减退的危险因素分析

目的分析2型糖尿病患者发生早期进行性肾功能减退的危险因素。方法对107例2型糖尿病患者进行前瞻性随访研究。将入组患者按蛋白尿水平分为正常蛋白尿组（0～30 mg/24 h）、微量白蛋白尿组（>30～300 mg/24 h）。再将两组中估算的肾小球滤过率（eGFR）年下降率≥3.3%归为早期进行性肾功能减退亚组,<3.3%归为肾功能稳定亚组。分析早期进行性肾功能减退的比例,分别比较正常蛋白尿组和微量白蛋白尿组中肾功能稳定亚组和早期进行性肾功能减退亚组的糖尿病病程、体质量指数（BMI）等一般资料和糖化血红蛋白（HbA1c）、肝功能、肾功能等实验室指标。结果合并微量白蛋白尿组发生早期进行性肾功能减退的比例更高。早期进行性肾功能减退组的收缩压(SBP)、脉压(PP)、HbA1c高于肾功能稳定组,而BMI低于肾功能稳定组。对正常蛋白尿组统计分析发现：高密度脂蛋白胆固醇(HDL C)在两亚组间差异有统计学意义。结论T2DM患者均可能发生早期进行性肾功能减退。对于正常蛋白尿患者的2型糖尿病患者,HDL C水平的降低为其发生早期进行性肾功能减退的危险因素;对于合并微量白蛋白尿的2型糖尿病患者,高SBP、PP、HbA1c、低BMI为其发生早期进行性肾功能减退的危险因素。