间日疟原虫,恶性疟原虫和伯氏疟原虫各期的提…

用纤维素过滤去除白细胞后再用Ｐｅｒｃｏｌｌ密度梯度离心方法提纯分离间日疟，恶性疟和伯氏疟３种疟原虫。经纤维素过滤后，Ｐ，ｕ病人血和Ｐ。ｂ感染鼠血中白细胞去除率分别平均达９４。７％和７５。４％而且不影响原虫密度和各期构成比，多个Ｐｅｒｃｏｌｌ不连续绨度离心测试３种疟原虫裂殖体、滋养体、环状体和未感染红细胞的相对平均密度（ｋｇ／Ｌ）；Ｐ。ｕ分别为１。０５９、１。０７２、１。０９６和１。０９９；Ｐ。ｆ分     

筛选和制备单或多克隆抗体进行间日疟疾免疫诊断研究——Ⅳ、杂交瘤细胞融合条件的探索及技术方法的建立

对杂交瘤细胞融合基本条件和因素进行比较,理会到骨髓瘤细胞系、牛血清、不同时间更换HAT选择培养基、PEG和HAT主要试剂的质量对融合率和单克隆抗体阳性检出率有明显影响,并对各种因素进行分析。通过摸索,建立和稳定单抗技术方法,融合率达50～95％。     

间日疟原虫、恶性疟原虫和伯氏疟原虫各期的提纯和分离

用纤维素(Cellulose,CF-11)过滤去除白细胞后再用 Percoll 密度梯度离心方法提纯分离间日疟(P.v.)、恶性疟(P.f.)和伯氏疟(P.b.)3种疟原虫。经纤维素过滤后,P.v.病人血和P.b.感染鼠血中白细胞去除率分别平均达 94.7％和 75.4％,而且不影响原虫密度和各期构成比。多个 Percoll 不连续梯度离心测试3种疟原虫裂殖体、滋养体、环状体和未感染红细胞的相对平均密度(kg/L):P.v.分别为 1.059、1.072、1.096 和 1.099;P.f.分别为 1.070、1.079、1.10 和 1.10,配子体 1.085;P.b.分别为 1.059、1.062、1.103 和 1.104。并据此选择各自合适的 Percoll 梯度分离3 种疟原虫,将裂殖体、滋养体同环状体分开,获取原虫纯度(原虫数/100 个红细胞),P.v.由分离前 0.8％至分离后 93.5％,P.f.由2.3％至100％,P.b.由 30.6％至93％,分别提高 113.8、43.4和 2倍。     

抗间日疟原虫单克隆抗体的筛选、制备及鉴定

自从１９７５年Ｋｏｈｌｅｒ和Ｍｉｌｓｔｅｉｎ创立淋巴细胞杂交瘤技术之后,现该技术已成功应用于寄生虫的生物学、诊断学和免疫治疗学的研究［１－２］。为开展对间日疟原虫的免疫诊断,我们应用该技术,制备了抗间日疟原虫单克隆抗体,并对其特异性进行分析。１材料和...     

一种新型的华支睾吸虫病快速ELISA诊断试剂盒

一种新型的华支睾吸虫病快速ＥＮＩＳＡ诊断试剂盒．检查华支睾吸虫病人血清４５３份．非流行区健康对照者血清３５６份．敏感性为９２．１％（４７／４５３）．特异性９８．３％（３５０／３５６）。试剂盒配备齐全．微量检测（血清用量２０～１０微升）．开盒即用、操作简便、整个检测过程约需１５ｍｉｎ．肉眼判断结果．重复性和稳定性良好，特别适合基层医疗卫生单位和现场使用。     

新型的华支睾吸虫病快速—ELISA诊断试剂盒现场应用评价

为对新型的华支睾吸虫病快速－ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒首次现场应用进行评价．在本病流行区选２５９名职工．以双盲法用粪便清水沉淀法进行对照检测，抗体阳性率５０．２％（１３０／２５９）．虫卵阳性率４７．５％（１２３／２５９）．两者无显著性差异。其中两法均阳性１０６例．阳性符合率８６．２％．两法均阴性１１２例．阴性符合率８２．４％．总符合率８１．２％．与我省常规ＥＬＩＳＡ法结果相近．显示试剂盒有良好的应用价值．特别适用于乡、镇卫生院。     

筛选和制备单或多克隆抗体进行间日疟疾免疫诊断研究——Ⅰ、间日、恶性和伯氏三种疟原虫各期提纯分离方法研究

用纤维素(CF—11 cellulose)过滤去除白细胞后再用Percoll密度梯度离心方法提纯分离间日(Pv),恶性(pf)和伯氏(pb)三种疟原虫。经纤维素过滤后,pv病人血和pb感染鼠血中白细胞去除率分别平均达94.7％和75.4％,而且不影响原虫密度和各期构成比。多个Percoll连续梯度离心测试三种疟原虫裂殖期、滋养期、环状期和未感染红细胞的相对平均密度(kg/L):pv分别为1.059、1.072、1.096和1.099;pf分别为1.070、1.079、1.10和1.10,配子期1.085;pb分别为1.059、1.062、1.103和1.104。并据此选择各自合适的Percoll梯度分离三种疟原虫,将裂殖和滋养期同环状期分开,获取原虫纯度(原虫数/100红细胞)在pv由分离前0.8％至分离后达93.5％,pf由2.3％至100％,pb由3O.6％至93.0％,分别提高113.8、43.4和2.0倍。     

筛选和制备单或多克隆抗体进行间日疟疾免疫诊断研究——Ⅱ、单抗筛选检测方法—斑点免疫结合试验的建立

比较间日疟、恶性疟和食蟹猴疟原虫可溶性抗原不同蛋白包被浓度、酶结合物稀释度以及几种混合纤维素膜的测定结果,建立和稳定DIA(斑点免疫结合试验)方法,用以检测和筛选单克隆抗体获得较好效果。与常规IFAT(免疫荧光抗体试验)比较,DIA敏感性高,抗原用量小,可用肉眼判定结果。     

杂交瘤技术方法的建立和融合条件的研究

通过制备抗华支睾吸虫单克隆抗体，建立和稳定了淋巴细胞杂交瘤技术方法，并对影响融合效果的融合条件进行了观察。聚乙二醇浓度、新生牛血清质量、更换ＨＡＴ培养基的时间等因素对融合效果有影响。筛选了５株分泌高滴度单克隆抗体的杂交瘤细胞株。     

华支睾吸虫病快速ELISA诊断试剂盒的建立

本文报告一种华支睾吸虫病快速诊断试剂盒。全程操作１５ｍｉｎ，内容完善，使用简便，可肉眼判断结果及用自来水洗涤。敏感性９２．１０％（４１７／４５３），假阳性率２．２５％（１１／４８８），优于常规ＥＬＩＳＡ。试剂盒重复性好，稳定性高，４℃存放有效期达６个月。初步现场使用，效果良好。