新型冠状病毒肺炎患者消化系统表现的回顾性研究

背景新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)在全球范围内蔓延,以呼吸道症状为主要表现,部分患者合并明显的消化系统表现,甚至仅表现为消化系统症状.因此,明确COVID-19患者的消化系统表现及其规律,具有重要意义.目的探讨我院350例COVID-19住院患者消化系统表现,为COVID-19的诊断和治疗提供一定的帮助及参考.方法回顾性分析武汉市第四医院COVID-19住院患者资料,如一般情况、起始症状、疾病危重程度、消化系统症状、肝功能指标等.对COVID-19非危重组及危重组患者的消化系统症状、肝功能指标进行比较.统计学方法采用独立样本中位数检验、连续性校正卡方检验、单因素方差分析.结果350例患者均为COVID-19确诊患者,男性176例(50.3%),女性174例(49.7%);年龄范围17-94岁,中位年龄59岁;非危重组254例(72.6%),危重组96例(27.4%).首发症状以发热、干咳、乏力、胸闷等为主.262例(74.9%)出现发热,189例(54.0%)患者出现干咳,237例(67.7%)出现乏力,195例(55.7%)出现胸闷,212例(60.6%)出现纳差.79例(22.6%)患者出现消化系统症状,主要表现为腹泻、呕吐、腹痛等症状.42例(12.0%)患者出现腹泻,48例(13.7%)患者出现呕吐,3例(0.9%)患者出现腹痛.5例(1.4%)患者以单纯消化系统症状为首发症状.150例(42.9%)患者出现肝功能指标异常(ALT、AST、TBIL、DBIL至少一项升高),其中73例(20.9%) ALT升高,98例(28.0%) AST升高,60例(17.1%) DBIL升高,27例(7.7%) TBIL升高·此外,275例(78.6%)血白蛋白(ALB)浓度降低.非危重组患者出现消化系统症状的比率(52/254,20.5%)与危重组患者(27/96,28.1%)相比,差异不具有统计学意义(χ~2=2.334,P0.05).非危重组患者肝功能指标异常比率(87/254,34.3%)与危重组患者(63/96,65.6%)相比,差异具有统计学意义(χ~2=28,P0.05).非危重组ALB降低的比率(182/254,71.7%)与危重组(93/96,96.9%)相比,差异具有统计学差异(χ~2=26.322,P0.05).无论是非危重组,还是危重组,肝功能指标升高多数不超过2ULN,ALB降低多数在30-40 g/L范围.腹泻组ALB降低的比率(39/42,92.9%)与非腹泻组(236/308,76.6%)相比,差异具有统计学意义(χ~2=5.785,P0.05).不同白蛋白浓度分组之间的发病时间无统计学差异(P0.05).结论 COVID-19住院患者部分合并消化系统症状,以腹泻、呕吐症状较常见,少数患者以单纯消化系统症状为首发表现,易于误诊.部分COVID-19患者合并肝损伤,多数轻微,无肝衰竭发生,提示新型冠状病毒可能对肝脏有一定的损伤作用.非危重组与危重组相比,消化系统症状的发生率总体相近,但是危重组肝功能指标异常发生率及异常程度更高.COVID-19患者多数可出现血白蛋白浓度降低,腹泻患者更容易出现血白蛋白浓度降低.以上结论有助于临床医生加深对该疾病的认知,并提高治疗水平.     

游离脂肪酸诱导肝细胞脂肪变模型中锌指蛋白A20的表达及其作用机制

背景:肝内脂肪酸蓄积是非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生的基础,炎症是促其发展的关键。锌指蛋白A20可通过抑制NF-κB信号通路而发挥抗炎功能,但其对NAFLD作用的研究未见。姜黄素具有明确的抗炎作用。目的:探讨游离脂肪酸(FFAs)诱导的肝细胞脂肪变模型中A20的表达及其对NAFLD的作用机制。方法:以不同浓度混合FFAs(油酸:软脂酸=2:1)诱导HepG2细胞脂肪变模型,MTS法测定细胞活力,行油红O染色鉴定,筛选出最佳造模浓度。蛋白质印迹法检测A20表达。以不同浓度姜黄素干预肝细胞脂肪变性模型,采用蛋白质印迹法检测A20表达,ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β含量。结果:成功建立HepG2肝细胞脂肪变模型,选择0.25 mmol/L FFAs作为最佳造模浓度。随着FFAs浓度增高,A20表达在6 h呈增加趋势,而12 h、24 h时A20表达呈先减少后增加的趋势,0.5 mmol/L是分界点。与0.25 mmol/L FFAs组相比,20μmol/L姜黄素干预可显著抑制A20表达,细胞上清中TNF-α、IL-1β含量显著减少(P<0.05)。结论:锌指蛋白A20可能通过抑制NF-κB信号通路激活来抑制炎症的发生,从而发挥保护肝细胞的作用,为防治NAFLD提供了可能的有效作用靶点。     

A20在肝纤维化小鼠肝组织中的表达及相关研究

目的研究在肝纤维化小鼠肝组织中A20的表达以及炎性反应激活情况。方法通过喂养C57/B6雄性小鼠含有0.1%的3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢-2,4,6-三甲基吡啶(DDC)饲料,构建肝纤维化模型,分别通过Western印迹、PCR检测肝组织中A20、TGF-β、TNF-α、MCP-1、TLR4的表达情况。结果 DDC饲养小鼠肝纤维化明显,小鼠肝组织中A20表达明显升高,A20 mRNA较对照组升高约4.7倍,差异有统计学意义;DDC组小鼠肝内TGF-β、TNF-α、MCP-1、TLR4 mRNA较对照组均升高,分别升高约2.6倍、12.1倍、91.9倍、3.3倍,差异均有统计学意义。结论 A20在肝纤维化小鼠肝组织中的表达增高,A20在肝纤维化的发生发展过程中具有一定的作用。     

内质网应激相关炎性反应及其在非酒精性脂肪性肝病中的作用

内质网是真核生物重要的细胞器,当内质网功能发生障碍时,可引起细胞发生内质网应激反应(ERS)。ERS经蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、需肌醇酶-1α(IRE-1α)及活化转录因子-6α(ATF-6α)等多种信号通路介导发生炎性反应,参与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)胰岛素抵抗(IR)的形成及进展至非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、纤维化等过程。通过调控ERS相关炎性反应可能为防治NAFLD提供一条新的途径。     

维生素E对HepG2脂肪变模型中caspase-3活性影响研究

目的检测HepG2细胞脂肪变模型中caspase-3活性的变化,探讨抗氧化剂维生素E(VitE)对其的影响。方法 0.5 mmol/L和1 mmol/L的混合脂肪酸分别干预HepG2细胞,在不同时间点检测细胞内caspase-3活性。将1 mg/L的VitE干预脂肪变性HepG2细胞,在不同时间点检测caspase-3活性的变化。结果脂肪酸组HepG2细胞caspase-3活性较正常对照组显著升高(P<0.05),VitE干预组细胞caspase-3活性均较脂肪酸组明显下降(P<0.05)。结论脂肪酸可诱导HepG2细胞caspase-3活性升高,抗氧化剂VitE能下调脂肪变性HepG2细胞caspase-3活性从而减轻细胞损伤,这可能与氧化应激和内质网应激的改善相关。     

脂联素对脂肪变肝细胞内C反应蛋白表达的影响及作用机制

目的：探讨脂联素对肝细胞内C反应蛋白（CRP）的影响及可能的作用机制。方法给予 HL-7702细胞不同浓度和比例的油酸软脂酸混合液干预不同时间后,CCK-8法测定细胞活力,Nile red染色荧光显微镜拍照,测定荧光强度。实时定量 PCR检测细胞内CRP、CREBH、BIP和CHOP mRNA表达水平变化。Western印迹检测细胞核内活化的CREBH蛋白含量。根据是否加入脂联素分组,每组加入不同比例的脂肪酸干预24 h后,实时定量 PCR检测 CRP、CREBH、BIP和CHOP的表达水平变化。结果相比于正常组,混合脂肪酸干预12 h后,仅OP03（1．0 mmol）组CRP表达升高（P＜0．05）,24 h后,OP12（1．0 mmol）、OP03（1．0 mmol）、OP03（0．5 mmol）组CRP表达均升高（P＜0．05）。混合脂肪酸干预24 h后,CREBH、BIP和CHOP mRNA均有不同程度的增高,OP12（1．0 mmol）、OP03（1．0 mmol）组核内活化CREBH蛋白增加。加入脂联素后,各组CRP、CREBH、BIP和CHOP表达水平下降（P＜0．05）。结论软脂酸可上调肝细胞CRP表达水平,其机制可能与活化的CREBH蛋白有关。脂联素可能通过抑制CREBH蛋白相关的炎症通路而下调CRP表达。     

脂肪变肝细胞中炎性调节蛋白A20的表达机制

正非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)已被认为是一种慢性低度炎性反应状态[1],炎性反应在其复杂的发病机制中至关重要,是疾病向终末期肝病进展的关键。锌指蛋白A20是由核因子-κB(NF-κB)激活诱导的炎性反应负性调节蛋白,它通过可逆的去泛素化以及泛素化功能下调活化的NF-κB信号通路,从而抑制炎性反应[2]。近年来研究发现,A20对肝脏再生及功能恢复具有积极作用,可抑制肝损伤、     

PTEN基因沉默骨髓间充质干细胞移植治疗急性心肌梗死

BACKGROUND:Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for myocardial infarction becomes popularized in recent years, but transplanted cells cannot survive and proliferate under early inflammatory reaction or local ischemia/hypoxia microenvironment, eventually hampering the therapeutic outcomes. OBJECTIVE:To investigate the therapeutic effect of PTEN-silenced bone marrow mesenchymal stem cells on acute myocardial infarction. METHODS:(1) Bone marrow mesenchymal stem cells from Sprague-Dawley rats were randomly assigned to receive no treatment, NCsiRNA transfection using Lipofectamin2000 or PTEN siRNA transfection using Lipofectamin2000. Cell growth curves were described using MTT method to detect cell cycle using flow cytometry. (2) Thirty Sprague-Dawley rats were selected to prepare myocardial infarction models that were randomized into three groups (n=10 per group): blank control, negative control and RNAi group. Six hours after modeling, bone marrow mesenchymal stem cells transfected with nothing, NCsiRNA and PTEN siRNA were respectively injected into the infarcted center of the left ventricular anterior wall in these three rat groups. After 4 weeks, all rats were subjected to cardiac function detection using echocardiography, and the survival and proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells in the rats were observed by fluorescence microscopy. RESULTS AND CONCLUSION:Compared with the other two groups, a significant increase in the absorbance values at different culture time, the proportion of cells in S+G2 phase, and the number of bone marrow mesenchymal stem cells in the myocardial tissue was found in the RNAi group (all P < 0.05). Additionally, the left ventricular ejection fraction and left ventricular shortening fraction were significantly reduced in the RNAi group than the blank control and negative control groups at 4 weeks after cell transplantation (P < 0.05). Both in vivo and in vitro experimental findings showed that PTEN silencing could effectively improve cell survival and proliferation in the infarcted myocardium. Moreover, in the in vivo experiment, an overt improvement in rat’s cardiac function was achieved.