siRNA反向转染法提高原代癌相关纤维母细胞转染效率的研究

目的探讨提高原代癌相关纤维母细胞转染效率的方法,并优化实验条件。方法对比正反两种转染方法转染siRNA至原代癌相关纤维母细胞的转染效率,并分析两种转染试剂在转染原代细胞方面的不同。结果反向转染组转染siRNA至原代癌相关纤维母细胞的转染效率高于正向转染组(P<0.05);两种转染试剂转染效率无统计学差异(P>0.05)。结论反向转染法可以显著提高原代癌相关纤维母细胞siRNA转染效率;两种转染试剂转染效率无明显差异。     

人胃癌肿瘤相关成纤维细胞的原代培养和鉴定

目的 探讨人胃癌肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)的培养和鉴定方法,并分析其与胃正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)在生物学特性和蛋白表达方面的差异,为其功能研究奠定基础.方法 采用组织块法和酶消化法进行人胃癌CAFs和NFs的原代培养,通过酶消化法进行人工纯化,通过形态学观察和多种蛋白的免疫细胞化学染色对其进行鉴定.结果 获得纯化的人胃癌CAFs和NFs.胃癌CAFs呈长梭形,大小不等,生长密集,排列紊乱.除表达vimentin这一成纤维细胞的标记物外,还表达FAP、SMA,但不表达CK、desmin.结论 只要给细胞创造良好的生长条件并规范操作,组织块法和消化法均可成功的培养出人胃癌CAFs和人胃NFs.胃癌CAFs与NFs在形态结构、生长方式和蛋白表达等方面均存在明显差异.     

肿瘤相关巨噬细胞与肿瘤关系的研究进展

肿瘤相关巨噬细胞（ Tumor associate macrophages ,TAMs）是肿瘤的炎症微环境与肿瘤细胞间的重要信使。它是从血液中的单核细胞演变而来,主要通过集落刺激因子（ Colony -stimulating factor , CSF）趋化至肿瘤组织中。本文简述了TAMs通过影响血管生成和淋巴管生成,抑制免疫,调节基质,与干细胞相互作用等方面促进肿瘤的进展。分析表明靶向于TAMs的治疗策略是未来治疗肿瘤的一个新方向。     

FAP-α和VEGF在卵巢癌中的表达及意义

目的:检测卵巢癌组织中纤维母细胞活化蛋白-α(fibroblast activation proteinα,FAP-α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达情况,探讨其与卵巢癌侵袭和转移的关系.方法:应用免疫组织化学法检测80例卵巢癌组织和30例正常...     

间充质干细胞在肿瘤发展过程中的作用

肿瘤间质在肿瘤发展过程中的作用逐渐受到人们的重视,作为肿瘤问质的重要组成成分之一,骨髓来源的间充质干细胞,在肿瘤的发生发展中有着不可忽视的作用。本文对问充质干细胞与肿瘤发生发展的研究进展作一综述。     

胃癌中SPARC、TGFβ1和Ki-67的表达及意义

目的 探讨胃癌组织中SPARC和TGFβ1的表达及其与胃癌细胞增殖的关系.方法 用免疫组织化学方法检测80例胃癌组织和30例癌旁正常组织中SPARC、TGFβ1和Ki-67的表达.结果 (1)SPARC在胃癌中的阳性率高于正常胃黏膜(P=0.001)并主要表达于胃癌间质纤维母细胞的胞质,且与胃癌的分化程度、临床分期、Lauren分型及淋巴结转移相关有显著性(P<0.05);(2)胃癌中TGFβ1的阳性率和Ki-67标记指数均高于正常胃黏膜(P<0.001),且均与浸润深度、临床分期和淋巴结转移相关(P<0.05);(3)随着胃癌组织中SPARC的减少及TGFβ1的增多,Ki-67标记指数逐渐增大,且差异有显著性(P<0.05).结论 胃癌组织中SPARC抑制癌细胞的生长,而TGFβ1则促进癌细胞的生长,它们在胃癌的发生、发展中起着重要的作用.     

癌相关纤维母细胞对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭活性的影响

目的 探讨癌相关纤维母细胞(CAFs)对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭活性的影响,为胃癌的合理有效治疗提供新的思路和作用靶点。方法 (1)原代培养正常纤维母细胞(NFs)和CAFs,用CCK8实验和流式细胞仪检测间接共培养后,NFs和CAFs对MGC-803细胞增殖和凋亡能力的影响;(2)通过transwell共培养小室建立MGC-803与CAFs相互作用的体外模型,分析CAFs对MGC-803迁移和侵袭能力的影响。结果 (1)与NFs相比,CAFs在体外传代培养过程中,仍高表达波形蛋白(Vimentin)、纤维母细胞活化蛋白(FAP);(2)与NFs组相比,CAFs促进MGC-803细胞增殖、迁移和侵袭,但是抑制其凋亡。结论 CAFs在胃癌的生长、迁移和侵袭等过程中起着重要的作用,并且可能成为胃癌治疗的新靶点。     

SPARC和VEGF在胃癌组织中的表达及与血管生成的关系

目的探讨SPARC和VEGF在胃癌组织中的表达及其与胃癌血管生成的关系。方法用免疫组化方法检测80例胃癌组织和30例癌旁正常组织中SPARC和VEGF的表达,用CD34标记胃癌组织的微血管密度(MVD)。结果①胃癌组织中,SPARC、VEGF和MVD均显著高于正常胃黏膜(P<0.05)。②胃癌组织中,SPARC主要表达于间质纤维母细胞的胞质,VEGF主要表达于癌细胞的胞质,且均与胃癌的分化程度、临床分期、Lauren分型及淋巴结转移显著相关(P<0.05);③胃癌组织中的MVD与分化程度、临床分期、Lauren分型、浸润深度及淋巴结转移显著相关(P<0.05);④胃癌组织中,SPARC与VEGF的表达呈反比(P<0.01),且随着MVD的增高,SPARC逐渐减少,而VEGF则逐渐增加。结论 SPARC和VEGF的表达与胃癌的血管生成关系密切,SPARC抑制胃癌的血管生成,而VEGF则促进胃癌的血管生成。     

Versican在肿瘤中的生物学作用

Versican是蛋白聚糖家族之一,其表达水平增高与许多肿瘤的不良预后有关。肿瘤的类型不同,其表达部位也不同,可以表达在肿瘤细胞本身,也可以表达在肿瘤周围的间质中。Versican在细胞黏附、增殖、迁移和血管生成中都起作用,这些特点与肿瘤的侵袭和转移有关。这些功能特点有赖于Versican的中间氨基葡聚糖结合区以及两末端的球状区域与许多细胞外基质和细胞表面成分的相互作用。本文对最近发现的调控Versican表达的机制以及它在肿瘤侵袭和转移中的生物学作用作一综述。     

界面层相关纤维母细胞对胃癌细胞侵袭、迁移、增殖和凋亡的影响

目的探讨界面层相关纤维母细胞(interface zone fibroblasts,INFs)对胃癌细胞侵袭、迁移、增殖和凋亡的影响,为胃癌的合理有效治疗提供新思路和作用靶点。方法原代培养正常纤维母细胞(normal zone fibroblasts,NFs)、癌相关纤维母细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)和INFs,通过Transwell实验共培养小室建立NFs、CAFs和INFs与MGC-803细胞相互作用的体外模型,分析NFs、CAFs和INFs对MGC-803细胞侵袭和迁移能力的影响;用CCK-8实验和流式细胞仪检测间接共培养后,分析NFs、CAFs和INFs对MGC-803细胞增殖和凋亡能力的影响。结果 INFs在体外传代培养的过程中,高表达vimentin、FAP。与NFs和CAFs相比,INFs促进MGC-803细胞的侵袭、迁移和增殖能力,但抑制凋亡(P0.05)。结论 INFs在胃癌的侵袭、迁移和转移等过程中起重要作用,将成为胃癌治疗的新靶点。