长角血蜱两性生殖株和孤雌生殖株幼蜱发育零点及有效积温的研究

目的研究长角血蜱两性生殖株和孤雌生殖株幼蜱在不同温度下的发育零点和有效积温。方法将长角血蜱两性生殖株和孤雌生殖株饱血幼蜱置于不同温度的环境中,观察发育历期和积温,采用拟合模型方程求出两性株和孤雌株幼蜱发育的零点温度,计算幼蜱发育的有效积温。结果长角血蜱两性株和孤雌株的发育零点分别为14.89℃和14.95℃,平均积温分别为(265.08±99.37)日度和(306.90±176.24)日度,有效积温分别为(101.44±147.66)日度和(116.51±116.79)日度。结论长角血蜱饱血幼蜱的发育历期随温度升高而缩短,两性株比孤雌株发育快,研究结果可以作为长角血蜱生物学的基础理论参数之一。     

新疆库尔勒市哈满沟煤矿内脏利什曼病流行现况调查

目的 调查新疆库尔勒市塔什店镇哈满沟煤矿内脏利什曼病的流行现况。 方法 2008年6月采用回顾性调查与现况调查相结合, 对哈满沟矿区所有居民进行逐户入室调查。内容包括既往有无疑似内脏利什曼病病史, 部分居民进行利什曼素皮内试验, 并对15岁以下儿童皮内试验阴性者进行体检（肝、脾触诊）和rk39免疫层析试条检测, 具备内脏利什曼病症状和体征、试条阳性者进行骨髓穿刺, 镜检是否感染利什曼原虫无鞭毛体。在居民点及附近野外捕集白蛉, 解剖鉴定白蛉, 并检查前鞭毛体有无自然感染。 结果 接受利什曼素皮内试验185人, 阳性39例, 阳性率为21.1%（39/185）。在当地居住不足6年的成年人和在当地出生的5岁以下儿童共45人, 均为阴性;在当地居住6年以上者阳性率为27.9%（39/140）。15岁以下儿童皮内试验阴性者（81人）接受rk39免疫层析试条检测, 阳性1例, 经骨髓穿刺镜检见利什曼原虫无鞭毛体, 确诊为内脏利什曼病。捕获的12只白蛉, 经剖检鉴定为亚历山大白蛉（Phlebotomus alexandri）, 其中1只雌蛉利什曼原虫前鞭毛体阳性。 结论 哈满沟矿区为内脏利什曼病流行区。     

新疆维吾尔自治区伽师县卧里托格拉克乡居民内脏利什曼病流行现况调查

目的 调查新疆维吾尔自治区伽师县内脏利什曼病流行现况.方法 采用回顾性调查和现况调查相结合,对伽师县卧里托格拉克乡20村1组所有居民进行入户调查.调查内容包括既往有无疑似内脏利什曼病病史,部分居民进行利什曼素皮内试验,对3岁以下婴幼儿皮内试验阴性者进行查体(触诊肝、脾)和rk39免疫层析试条检测.在居民住宅内、外捕集白蛉,解剖鉴定并检查前鞭毛体有无自然感染.结果 接受利什曼素皮内试验149人,阳性率为68.46%(102/149);3岁以下年龄组阳性率为11.76%(2/17),4～75岁年龄组阳性率为75.76%(100/132).3岁以下年龄组皮内试验阴性者有15人接受rk39免疫层析试条检测,1例阳性者(女,1岁),确认为临床诊断病例.2001-2008年7月有既往病史者52例,其中治愈50例,死亡2例.捕获的374只雌蛉,经解剖鉴定为吴氏白蛉(Phlebotomus wui),其中3只雌蛉体内查见自然感染的利什曼原虫前鞭毛体.结论 伽师县仍有内脏利什曼病流行.     

伯氏疟原虫氯喹抗性逆转的实验观察

Objective To search for reverser of chloroquine-resistance in Plasmodium berghei (P.berghei) ANKA. Methods Seventy-two healthy Kunming mice were each infected with chloroquine sensitive (CS) or chloroquine resistance (CR) P. berghei ANKA respectively, then treated with various schedule of reversal agents C-2832 、D-6182 or ketotifen(Ket) respectively with or without co-administration of low dose (5%ED90) of chloroquine (CQ). Schedule 1: mice infected with CS were randomly distributed into 4 groups, 6 mice in each group, 30 min after infection,then treated i.g. with D-6182, C-2832, Ket or 0. 1% gum tragacanth(control) respectively for 5 consecutive days. The parasitemia of each experiment group was then determined by routine microscopic examination on blood smears from the tail blood of each mouse from D1 to D7.Schedule 2:mice infected with CR were randomly distriduted into 8 groups, 6 mice in each group, 3 d after infection, then treated i.g. with D-6182, C-2832, Ket, chloroquine or 0. 1% gum tragacanth (control) with or without co-administration of 12 mg/(kg · d) chloroquine (5% ED90) 2 h after the first administration for 5 consecutive days. The parasitemia of each experiment group was then determined microscopically by examination on blood smears from the tail blood of each mouse from D4 to D7. The reduction rates of each group were calculated and compared between the groups with or without treatment of reverser. Results 1. The parasitemia of mice infected with CS was going up daily from D1 to D4 and reached the peak on D4 in all groups administered with 80 mg/(kg · d) D-6182, 120 mg/(kg · d) C-2832 or 10 mg/(kg · d) Ket for5 d. From D5 the parasitemia kept going up in control group while it kept at the level of D4 in all treated groups. 2. Chloroquine 12 mg/(kg · d) administered i.g. 2 h after administration of C-2832 or D-6182 or Ket for 5 d(D3-D7) could reach 97.77%, 99.28% or 96.73% of reduction rate of parasitemia on D4 and 99.81%, 98.87% or 100.00% on D7 respectively in CR P. berghei infected mice. Conclusion Two compounds of C-2832 and D-6182 exhibited the reversal activity on CQ resistance in CR P. berghei infected mice at the same range of that of well-recognized reverser Ket.     

白蛉人工光诱法与油纸法比较

目的 比较人工光诱法和油纸法两种白蛉监测方法的适用范围以及各自的优劣,为科学评价其监测结果提供依据.方法 分别比较了人房、畜圈、农田、果园和荒地等处油纸法捕获率的差异,在人房和野外以及不同人员人工光诱法捕获率的差异,着重观察了有无光照对油纸法的影响.结果 人工光诱法捕获率较高,平均每小时捕获数为42 ～405只；熟练培训的捕蛉人在人房和野外捕获白蛉数量差异有统计学意义.油纸法容易受灯光的影响.无光照时,捕获率较低,平均每张油纸捕获数仅为0～4只；有光照时,晚间白蛉集中在距离光源1m范围内活动,1m外则受光照影响甚微.结论 人工光诱法捕获率高,适合多种环境监测；油纸法捕获率低,更适宜在有光照下作为白蛉监测方法.     

新发现的内脏利什曼病流行区新疆民丰县Ⅲ:临床确诊首例患者所在点的流行病学调查

目的 调查新疆民丰县安迪尔牧场首例临床确诊的内脏利什曼病患者所在地该病的流行与分布情况. 方法 2007年11月采用回顾性调查和现况涮查相结合的方法,对民丰县安迪尔牧场开西木库勒村3组所有居民进行逐户入户调查,内容包括家庭成员近20年来的健康状况、既往有无疑似内脏利什曼病病史(包括已过世者),对15岁以下儿章进行杏体(触诊肝、脾),对部分居民进行利什曼素皮内试验和rk39免疫层析试条榆测. 结果调查居民共计407人,未发现现症病例.既往有疑似内脏利什曼病病史者12例,其中自愈者9例,3例已过世.利什曼素皮内试验榆测354人,阳性率为51.13%(181/354);有疑似内脏利什曼病病史者的阳性率为66.67%(4/6);无疑似内脏利什曼病病史者的阳性率为50.86%(177/348).接受rk39免疫层析试条检测的有6人,阳性率为16.67%(1/6),阳性者为2例疑似内脏利什曼病病史者之一. 结论根据所获得的流行病学资料,可确定当地为荒漠型内脏利什曼病流行区.     

基于PCR蜱体内巴贝虫检测方法的评价

目的分别对4种牛体表蜱体内巴贝虫和两种犬体表蜱体内巴贝虫基于PCR的检测方法进行评价。方法在广西壮族自治区6个市的62个村,现场采集犬和牛体表蜱。巢式PCR特异性扩增巴贝虫18s rDNA,纯化阳性样本的PCR产物、测序、比对,以确定感染的病原体。应用双重PCR、双重巢式PCR、双重环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测牛体表蜱内病原体双芽巴贝虫(Babesia bigemina)和牛巴贝虫(B.bovis)的感染情况。应用多重PCR检测犬体表蜱的犬巴贝虫(B.canis canis)、佛氏巴贝虫(B.canis vogeli)和罗氏巴贝虫(B.canis rossi)的感染情况。将各方法的检测结果进行比较,对检测方法进行评价。结果采集牛体表蜱102只。巢式PCR、双重PCR、双重巢式PCR检测牛体表蜱内双芽巴贝虫和牛巴贝虫均为阴性,双重LAMP的浊度仪检测结果为5例阳性,颜色观测结果阳性样本为29例,该29例包含浊度仪检测的5例阳性。采集犬体表蜱184只。巢式PCR检测出犬体表蜱佛氏巴贝虫阳性样本9例。其中4例被多重PCR检测出佛氏巴贝虫阳性。同时多重PCR检测检出罗氏巴贝虫阳性样本4例,经测序均为罗氏巴贝虫阴性。结论双重PCR、双重巢式PCR检测牛体表蜱体内巴贝虫未出现假阳性情况,巢式PCR检测微小巴贝虫,双重PCR、双重巢式PCR未发生交叉反应,说明其具有一定特异性,但因无阳性样本,敏感度需要进一步评价。双重LAMP颜色观测结果阳性率15.76%,浊度仪测出阳性率2.72%,其中双重LAMP颜色观测法2例阳性样本为巢式PCR微小泰勒虫阳性(Theieria microti)。双重LAMP法直观快捷,但对其检测的阳性样本需进行进一步确认,同时由于该方法的高度敏感性,需注重预防实验污染。犬体表蜱多重PCR可一次鉴别3种犬巴贝虫,鉴于在本研究中的假阳性和假阴性情况,多重PCR不适用,建议将病原体独立检测。     

新发现的内脏利什曼病流行区新疆民丰县Ⅰ. 流行病学调查

目的 对新疆民丰县一个新发现的内脏利什曼病（黑热病）流行区进行现场流行病学调查。 方法 2007年6月采用回顾性调查和现况调查相结合,对民丰县安迪尔乡所有居民进行逐户入户调查。内容包括家庭成员中20年来的健康状况、既往有无疑似内脏利什曼病史（包括已过世者）,并对15岁以下儿童进行体查（触诊肝、脾）;对部分居民进行利什曼素皮内试验和rk39免疫层析试条检测。 结果 共调查居民313人,未见现症病例。既往有疑似内脏利什曼病史者60例,其中13例已过世。171人进行利什曼素皮内试验检测,阳性率为99.4%（170/171）,其中有疑似内脏利什曼病病史者的阳性率为96.6%（28/29）。197人进行rk39免疫层析试条检测,阳性率为10.2%（20/197）,其中有疑似内脏利什曼病史者的阳性率为19.4%（6/31）,追溯诊断为既往内脏利什曼病病例。 结论 新疆民丰县为内脏利什曼病流行区。     

基于16S rDNA和COⅠ基因的3种血蜱分子生物学鉴定

目的利用16S rDNA基因及线粒体DNA细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome oxidase subunitⅠgene,COⅠ)基因建立3种形态学特征相近的血蜱属蜱类-长角血蜱、褐黄血蜱及铃头血蜱的分子生物学鉴定方法,探讨它们的系统发生关系。方法在上海市动物体表采集寄生蜱,在解剖显微镜下进行形态学鉴定后,提取蜱样本基因组DNA,采用PCR方法从蜱基因组中扩增16S rDNA及COⅠ基因,测序后进行同源性分析,用Mega 6.0软件分别构建系统发生树并进行系统进化分析。结果3种血蜱中长角血蜱的16S rDNA序列和COⅠ序列与GenBank中的长角血蜱的16S rDNA序列和COⅠ序列同源性分别为96.0%~97.2%,96.9%~98.8%;褐黄血蜱的16S rDNA序列和COⅠ序列与GenBank中的褐黄血蜱的16S rDNA序列和COⅠ序列同源性分别为95.9%~98.3%、87.1%~91.9%;铃头血蜱的16S rDNA序列与GenBank中来自日本的铃头血蜱(AB819170)的16S rDNA序列同源性为97.5%;3种血蜱16S rDNA基因之间的同源性分别为88.0%、87.0%、86.9%,COⅠ基因之间的同源性分别为80.4%、80.8%、82.8%。用16S rDNA及COⅠ基因构建系统发生树中,长角血蜱、褐黄血蜱分别与已知的长角血蜱和褐黄血蜱聚在一起,长角血蜱、褐黄血蜱均形成独立的分支。结论在传统形态学分类的基础上结合分子生物学鉴定方法能更准确地鉴定蜱的种类,并能更好地了解其系统发育进化关系。     

不同诱虫灯和引诱剂诱捕白蛉的现场试验

在新疆民丰县安迪尔乡现场观察不同诱虫灯、引诱剂及其联合使用诱捕白蛉的效果。结果表明CO₂与钨丝灯联合使用对白蛉具有较强的引诱效果,且易于分拣。